闫飞
- 作品数:1 被引量:4H指数:1
- 供职机构:吉林大学生命科学学院分子酶学工程教育部重点实验室更多>>
- 发文基金:吉林省科技厅科研基金更多>>
- 相关领域:生物学更多>>
- 具有谷胱甘肽过氧化物酶活性的含硒人源单链抗体的制备被引量:4
- 2008年
- 以谷胱甘肽(GSH)为靶抗原,从噬菌体展示人源单链抗体库中筛选人源单链抗体(scFv).经3轮筛选后,用ELISA方法检测出5个(2,11,16,24,32)可以和GSH结合的克隆.PCR产物的电泳和测序结果表明,只有3个克隆(11,16,24)具有完整的scFv编码基因.选取和GSH结合力高的克隆11的scFv编码基因组装到表达载体pPELB上,在大肠杆菌Rosetta中进行可溶性表达,用Ni2+螯合亲和层析纯化scFv-11,免疫点印迹结果证实该抗体能与GSH特异结合.通过化学突变将scFv-11的丝氨酸转变成硒代半胱氨酸(Sec)后,获得了具有谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)活力的含硒(Se)人源单链抗体(Se-scFv-11),其活力为351U/μmol.
- 霍锐石毅魏景艳徐俊杰吕绍武闫飞苏家明段玉晶王诗雯丛登立李唯闫岗林罗贵民
- 关键词:人源单链抗体谷胱甘肽过氧化物酶硒