吴晓敏
- 作品数：1 被引量：6H指数：1
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- 相关领域：生物学更多>>
- 罗非鱼肌肉乙酰胆碱酯酶的纯化、性质及农药敏感性研究被引量：6
- 2012年
- 鱼体内乙酰胆碱酯酶(AChE)活性的变化是水体环境农药污染的重要生物化学标记。以奥利亚罗非鱼(Oreochromis aurea)肌肉组织为材料,研究了乙酰胆碱酯酶的分离纯化方法、性质及杀虫剂对酶的抑制作用。结果表明,当肌肉组织的Triton X-100抽提物采用(NH4)2SO4分级盐析、Sephadex G-100凝胶过滤和DEAE-纤维素DE23离子交换柱层析的分离纯化步骤后,可获得纯化的乙酰胆碱酯酶,酶的比活力达到21.34U/mg,纯化倍数118,回收率22.08%。多因素正交试验分析确定的酶反应条件为反应体系pH7.5,反应温度40℃,反应时间15min,底物浓度7mmol/L。纯化酶水解碘化硫代乙酰胆碱的速度快,Km值为0.229mmol/L,存在过量底物抑制现象。4种杀虫剂(敌敌畏、辛硫磷、三唑磷、灭多威)对罗非鱼肌肉AChE的IC50值均小于5×10-6mol/L,有机磷类杀虫剂对罗非鱼脑AChE的抑制能力高于氨基甲酸酯类,抑制能力分别为:敌敌畏>辛硫磷>三唑磷>灭多威。4种农药对罗非鱼肌肉中AChE的抑制具有很好的剂量-效应关系,相关系数均在0.93以上,表明罗非鱼肌肉AChE可以作为水体环境中农药污染的生物化学标记。
- 丁运华吴晓敏方俊彬
- 关键词：罗非鱼乙酰胆碱酯酶
