龙彩云 作品数:9 被引量:34 H指数:3 供职机构: 赣州市疾病预防控制中心 更多>> 发文基金: 国家重点实验室开放基金 江西省自然科学基金 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 轻工技术与工程 医药卫生 生物学 更多>>
赣州市2014年新型甲型H1N1流感病毒NA基因特征及耐药性分析 被引量:3 2016年 目的分析江西省赣州市2014年新型甲型H1N1流感病毒NA基因的特点,掌握其耐药情况,为临床治疗和疾病控制提供参考依据。方法随机选择17株新型甲型H1N1流感病毒,经核酸提取和one-step RT-PCR扩增NA基因片段,双向序列测定,采用DNAStar5.0和Mage4.0序列分析软件分析NA基因特征以及耐药性位点。结果 17株毒株的NA基因片段与代表株A/California/07/2009(H1N1)的序列核苷酸序列进行比对,核苷酸序列同源性高达98.4%以上,氨基酸的同源性也高达97.0%以上。17株毒株的NA活性中心位点氨基酸及周围的辅助位点氨基酸均未发生氨基酸替换。结论 17株毒株的NA基因片段保持高度的同源性并均对流感病毒神经氨酸酶抑制剂药物敏感,但仍应加强对流感病毒的耐药性监测,为制定新型甲型H1N1流感的防制措施提供技术支持。 熊衍峰 李如 李健雄 施勇 胡晓军 龙彩云关键词:NA 耐药性 牛乳过敏原β-乳球蛋白检测方法的研究进展 被引量:21 2019年 目的食物过敏已成为全球性的食品安全问题,欧美等发达国家均要求对食品中的过敏原成分进行标识,其中就包括作为八大过敏性食物之一的牛乳及其乳制品。β-乳球蛋白是牛乳中的主要过敏原,约占乳清蛋白的50%,牛乳总蛋白的10%,并且约有82%的牛乳过敏患者对β-乳球蛋白过敏,因此其可以作为检测食品中是否含牛乳蛋白的一个有效的标志物。建立灵敏、可靠的β-乳球蛋白检测方法,对牛乳过敏原标识及保障牛乳过敏人群的安全消费具有重要意义。本文主要综述了牛乳β-乳球蛋白的高效液相色谱法、超高效液相色谱法、液相色谱-质谱联用法、酶联免疫吸附法、免疫层析法、电化学免疫法、蛋白微阵列法、等离子体共振法等色谱学和免疫学检测方法的研究进展,并对未来发展方向作出展望,以期促进牛乳β-乳球蛋白等过敏原检测方法的研究与开发。 何圣发 陈红兵 龙彩云 邹丽君 胡恭华 熊亮 高艳芳关键词:Β-乳球蛋白 毒死蜱残留前处理及检测技术研究进展 2024年 毒死蜱(CPF)作为一种中等毒性的有机磷杀虫剂,被广泛应用于农业生产。然而,其毒性和生物蓄积作用对人类具有潜在的健康风险,已成为公共卫生领域令人担忧的安全问题之一。检测食品和环境中的CPF残留,对保障人类生命健康具有重要意义。通常待检样品中的CPF含量极低,且基质复杂,因此选择合适的样品前处理技术和检测技术至关重要。本文综述了近年来应用较广的CPF前处理技术及检测技术,着重阐述了不同技术的原理和优缺点,并对发展趋势进行了展望,旨在为食品和环境中CPF及其他杀虫剂的检测提供参考。 龙彩云 赵海玲 雷琼 何娟 廖勇 何圣发关键词:毒死蜱 前处理 萃取 牛乳主要过敏原α_(S1)-酪蛋白的纯化鉴定及其多克隆抗体的制备 2022年 目的:从牛乳酪蛋白中纯化获得α_(S1)-酪蛋白并对其进行综合鉴定,以及制备特异性识别α_(S1)-酪蛋白的兔多克隆抗体。方法:采用DEAE Sepharose Fast Flow阴离子交换层析色谱对α_(S1)-酪蛋白进行分离纯化,利用酪蛋白的理化性质(等电点和含量)、免疫学技术和质谱技术对纯化的α_(S1)-酪蛋白进行综合鉴定,然后通过透析和冷冻干燥获得高纯度的α_(S1)-酪蛋白,最后免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体,并分析其特异性。结果:在4种酪蛋白中,α_(S1)-酪蛋白在阴离子交换层析色谱中的出峰时间最晚、峰面积最大,在电泳图中的位置最高,最终获得纯度高达94.26%的α_(S1)-酪蛋白,得率为27.19%。免疫5次后,两只兔子的抗血清效价分别为128万和32万,抗血清除了与大豆蛋白存在轻微交叉反应(<0.25%)外,与α-乳白蛋白、β-乳球蛋白、蛋清蛋白、花生蛋白均无交叉反应,表明特异性高。结论:本研究制备了高纯度的α_(S1)-酪蛋白及其高特异性的多克隆抗体,为过敏原蛋白的纯化与综合鉴定提供了思路,为α_(S1)-酪蛋白免疫学检测方法的建立提供了物质基础。 何圣发 何圣发 龙彩云 熊梦 赵江强 燕燕 董亚萍 李欣 李欣关键词:纯化 多克隆抗体 江西省赣州市2013-2016年麻疹病毒分离株N基因和H基因特征分析 被引量:3 2020年 目的分析赣州市流行的麻疹病毒的基因特征。方法采集麻疹疑似病例咽拭子标本,应用荧光RT-PCR方法检测麻疹病毒核酸;用Vero/SLAM细胞对麻疹病毒核酸检测阳性标本进行病毒分离培养,并将麻疹病毒分离株进行核蛋白N基因和血凝素蛋白H基因扩增、测序;运用DNAStar、Bioedit和MEGA 5.0等分子生物学软件对N基因和H基因进行序列特征分析。结果978份疑似麻疹病例咽拭子标本中,检出47份麻疹病毒核酸阳性,阳性率为4.81%,分离到25株毒株;扩增的13株毒株均为H1基因型的H1a亚型,与H1a基因型代表株(CHN/93/2)N基因核苷酸、氨基酸的同源性分别98.0%~98.5%、97.9%~99.6%,与H基因核苷酸、氨基酸的同源性分别为98.2%~98.9%、97.4%~98.5%。各分离株N基因与中国疫苗株Shanghai-191之间核苷酸、氨基酸的同源性分别为93.7%~95.2%、95.2%~96.8%;H基因与Shanghai-191之间核苷酸、氨基酸的同源性为94.2%~96.5%、94.2%~96.6%。结论2013-2016年赣州市麻疹病毒流行株为H1a亚型,疫苗株对现流行株有保护性,但仍需持续监测麻疹病毒基因的变异情况。 熊衍峰 张艳妮 陈祥发 龚甜 于璐 龙彩云 李建华 胡晓军关键词:麻疹病毒 核蛋白基因 基于适配体-悬浮芯片技术检测黄瓜中毒死蜱残留 2024年 文章开发了一种基于适配体-悬浮芯片的技术,用于快速检测黄瓜中毒死蜱残留。将毒死蜱适配体与荧光微球共价偶联作为检测探针,以生物素修饰的适配体3'端互补链为竞争探针,在反应体系中毒死蜱和竞争探针共同竞争结合检测探针上的适配体,竞争探针上的生物素可以与链霉亲和素标记的荧光藻红蛋白特异性结合,使互补链带有荧光。毒死蜱含量与荧光强度成反比,从而通过荧光强度分析样品中的毒死蜱含量。在优化条件下,该方法对毒死蜱表现出高灵敏度和高特异性,检测浓度范围为0.039~234.63 ng/mL,相关系数R^(2)为0.98,检出限为0.014 ng/mL。对黄瓜的加标回收率为92.00%~105.30%,相对标准偏差为1.76%~4.13%。该方法具有高通量、高灵敏度、好的特异性等优点,在毒死蜱残留快速检测方面具有良好的应用潜力。 龙彩云 赵海玲 雷琼 何娟 刘慧 何圣发关键词:毒死蜱 适配体 互补链 悬浮芯片 牛乳过敏原β-乳球蛋白核酸适配体在食品检测中的应用 被引量:6 2022年 食物过敏已成为全球广泛关注的食品安全问题。目前,食物过敏尚无根治疗法,避免摄入含过敏原的食物是患者的最佳选择。牛乳作为八大过敏性食物之一,建立快速灵敏的检测方法对保护牛乳过敏患者至关重要。β-乳球蛋白是牛乳中的主要过敏原,可以作为检测食品中是否含牛乳蛋白的有效标志物。核酸适配体是通过指数富集的配体系统进化技术筛选获得的,能与靶标特异性结合的单链寡核苷酸。作为一种新型识别元件,核酸适配体具有易合成、易修饰、费用低、分子量小、稳定性好、亲和力高等优点,在快速高灵敏检测等方面具有广阔的应用前景。本文简要概述了核酸适配体的筛选流程与筛选方法,重点综述了β-乳球蛋白核酸适配体的筛选及其在检测方面的应用现状,并对核酸适配体技术的未来发展方向进行了展望,以期促进其在过敏原检测等领域的应用。 燕燕 董亚平 龙彩云 赵江强 王建滨 赵伊倩 陈红兵 何圣发关键词:食物过敏 核酸适配体