陈国栋
- 作品数：10 被引量：54H指数：3
- 供职机构：宁波市第一医院更多>>
- 发文基金：浙江省医药卫生科学研究基金浙江省自然科学基金宁波市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- N-乙酰半胱氨酸上调Sirtuin 3蛋白表达对脓毒症小鼠急性肾损伤的保护作用及机制研究被引量：1
- 2022年
- 目的探讨抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)调控沉默信息调节因子3(Sirt3)对脓毒症致小鼠急性肾损伤(AKI)的保护作用及其机制。方法将雄性C57BL/6小鼠随机(随机数字法)分为假手术组(Sham)、盲肠结扎和穿孔术组(CLP)CLP+NAC(50 mg/kg)和CLP+NAC(100mg/kg)组,每组10只;CLP造模后24h处死小鼠,留取血液和肾组织样本;采用HE染色法评估各组小鼠肾组织病理损伤;ELISA法检测血清中肌酐(Scr)尿素氮(BUN)、肾损伤分子1(KIM-1)和中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白(NGAL)水平;采用免疫组织化学检测肾组织Sirt3蛋白表达;RT-qPCR法测定Sirt3 mRNA水平;透射电镜下观察肾小管上皮细胞线粒体损伤情况,并计算线粒体密度,同时检测肾皮质中超氧化物歧化酶(SOD)谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)过氧化氢酶(CAT)和丙二醛(MDA)水平。结果与Sham组相比,CLP导致肾组织病理损伤明显加重(P<0.001),肾功能指标Scr、BUN、KIM-1和NGAL水平均明显升高(均P<0.001),肾组织Sirt3蛋白和mRNA表达均显著降低(均P<0.001),肾小管上皮细胞线粒体结构破坏增加,线粒体密度的明显减低(P<0.001),肾皮质中抗氧化酶SOD、GSH-Px和CAT水平均显著降低(均P<0.001),同时脂质过氧化物MDA显著升高(P<0.001)。与CLP组相比,虽然50 mg/kg NAC预处理组肾损伤评分、肾功能指标Scr、BUN、KIM-1和NGAL水平均有所降低,肾组织中SOD,GSH-Px和CAT的水平均有所升高,但差异无统计学意义。然而,给予100 mg/kg NAC预处理可显著降低CLP引起的肾组织病理损伤(P<0.001),并且均明显降低Scr、BUN、KIM-1和NGAL水平(均P<0.001),显著升高肾组织Sirt3蛋白[(50.20±2.79)vs.(20.00±0.75),P<0.001]和mRNA[(0.57±0.07)vs.(0.41±0.07),P<0.001]表达水平,肾小管上皮细胞线粒体结构更加稳定,线粒体密度明显增加[(0.60±0.05)vs.(0.43±0.06),P<0.001],均显著升高SOD(U/mg)[(67.37±3.79)vs.(21.09±0.89),P<0.001]、GSH-Px(U/mg)[(265.61±9.61)vs.(180.00±3.31),P<0.001]和CAT(U/mg)[(8.58
- 樊恒乐健伟陈国栋孙敏朱建华
- 关键词：N-乙酰半胱氨酸脓毒症急性肾损伤线粒体损伤
- 非ST段抬高型急性冠状动脉综合征相关基因的生物信息学分析
- 2021年
- 目的对非ST段抬高型急性冠状动脉综合征(NSTE-ACS)相关的表达基因进行筛选及功能分析,为筛选NSTE-ACS发病机制相关的分子标志物提供理论基础。方法从高通量基因表达(GEO)数据库中选取GSE60993;并通过GEO2R进行生物信息学分析,筛选出差异表达基因;利用DAVID对差异表达基因进行基因本体(GO)分析、京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路分析;通过STRING数据库和Cytoscape软件构建差异表达基因对应的蛋白质相互作用网络,并利用MCC算法获取具有高度连接性的关键基因。结果通过对NSTE-ACS差异表达基因的筛选,共获得327个差异表达基因,包括上调基因190个、下调基因137个。差异表达基因主要涉及核糖体、哮喘、抗原处理和呈递、同种异体移植排斥反应、病毒性心肌炎等相关信号通路,并通过蛋白-蛋白相互作用(PPI)网络和Cytoscape软件筛选出10个具有高度连接性的关键基因,包括核糖体蛋白S6(RPS6)、X连锁核糖体蛋白S4(RPS4X)、核糖体蛋白L13A(RPL13A)、核糖体蛋白L18(RPL18)、核糖体蛋白L14(RPL14)、核糖体蛋白L24(RPL24)、核糖体蛋白L17(RPL17)、Aurora激酶B(NSA2)、核糖体蛋白37A(RPL37A)、核糖体蛋白S13(RPS13)。结论 NSTE-ACS差异基因可能主要通过核糖体通路、抗原处理和呈递通路及病毒性心肌炎等相关信号通路来发挥相关其作用。
- 李丹辉董进中陈国栋朱建华
- 关键词：急性冠状动脉综合征基因芯片生物信息学
- 富含脂质肠内营养支持对脓毒症小鼠全身炎症反应的影响
- 2021年
- 目的研究富含脂质肠内营养支持对脓毒症小鼠全身炎症反应影响。方法采用盲肠结扎和穿孔(cecal ligation and puncture,CLP)构建脓毒症模型。雄性BALB/c小鼠80只,随机(随机数字法)分为假手术组(Sham),脓毒症组(CLP),低脂肠内营养组(lipid low,LL)和高脂肠内营养组(lipid rich,LR),每组20只。在构建脓毒症模型前后,实验组分别给予小鼠肠内喂养富含脂质或低脂质的营养液,观察各组小鼠生存情况,ELISA检测小鼠血浆、肺、肾和肝组织TNF-α、IL-1β和IL-6以及血浆IL-10水平,苏木精-伊红(HE)染色观察小鼠肺、肾和肝组织病理学改变。采用SPSS 16.0软件进行统计学分析,并使用Kaplan-Meier和对数秩检验评估组之间的生存分析,多组间的差异通过单因素方差分析,两组间比较使用LSD-t检验,以P<0.05为差异有统计学意义。结果与CLP组相比,LR组小鼠生存数量显著升高(P=0.005),肺、肾和肝组织病理损伤均有所减轻,LL组和LR组小鼠血浆、肺、肾和肝组织内TNF-α、IL-1β和IL-6表达水平均显著降低(P<0.01),而血浆IL-10水平明显升高(P<0.01)。与LL组相比,LR组小鼠血浆TNF-α(pg/mL)[(23.19±3.49)vs(33.38±2.07),P<0.01]、IL-1β(pg/mL)[(26.42±2.63)vs(35.14±2.43),P<0.01]、IL-6(pg/mL)[(35.76±2.83)vs(50.75±4.03),P<0.01];肺组织中TNF-α(pg/mL)[(17.99±4.29)vs(23.38±2.07),P<0.01]、IL-1β(pg/mL)[(23.92±2.41)vs(32.97±2.63),P<0.01]、IL-6(pg/mL)[(21.76±4.77)vs(35.35±2.71),P<0.01];肾组织中TNF-α(pg/mL)[(17.98±4.91)vs(23.08±1.67),P<0.01]、IL-1β(pg/mL)[(23.12±2.26)vs(31.57±1.74),P<0.01]、IL-6(pg/mL)[(21.46±3.06)vs(33.55±1.91),P<0.01];肝组织中TNF-α(pg/mL)[(15.05±2.91)vs(22.38±1.19),P<0.01]、IL-1β(pg/mL)[(14.62±2.41)vs(22.97±2.63),P<0.01]、IL-6(pg/mL)[(23.06±4.56)vs(34.05±2.34),P<0.01]水平降低均更加显著。结论短期富含脂质的肠内营养治疗可改善脓毒症小鼠全身性和器官特异性炎症,有望成为调节炎症反应干预措施。
- 樊恒乐健伟王志宇陈国栋叶继辉孙敏朱建华
- 关键词：肠内营养脂质脓毒症炎症反应
- 哌拉西林/三唑巴坦针剂致罕见血小板减少的临床与机制分析被引量：5
- 2017年
- 目的分析哌拉西林/三唑巴坦针剂致血小板减少的临床特点,寻找其发病规律,并初步探讨其可能的致病机制。方法搜集患者完整的临床资料,另外抽取患者外周血液4份,各2m L,37℃水浴孵育,分别加入同等剂量的生理盐水,不同浓度的哌拉西林/三唑巴坦药液,进行体外试验,测定处理后4h,12h,24h,48h血小板计数变化,实验3次,取平均值。结果使用哌拉西林/三唑巴坦d1就可看到血小板减少,停用哌拉西林/三唑巴坦针剂后血小板1~2d开始上升,3~5d恢复正常,骨髓穿刺等检查未发现骨髓抑制,外周血浆血小板抗体阴性,补体C3下降。体外试验发现血小板下降的程度与哌拉西林/三唑巴坦的剂量成正相关,而空白对照及头孢吡肟对照组的血小板则无明显变化。结论哌拉西林/三唑巴坦针剂可致可逆性的急剧性血小板减少,且为剂量依赖性,其致病机制可能与骨髓抑制无关,可能为直接激活补体C3导致血小板破坏。临床医生应该引起重视,哌拉西林/三唑巴坦针剂可致血小板减少。
- 陈红范震孙敏郭飞杨玉敏陈国栋乐健伟王志宇朱永定朱建华
- 关键词：血小板减少
- c-FLIP蛋白在小鼠脓毒症急性肾损伤中的表达及意义被引量：3
- 2018年
- 目的观察细胞型Fas相关死亡域样白细胞介素-1β转换酶抑制蛋白(c-FLIP)在小鼠脓毒症急性肾损伤(SAKI)中的表达并探讨其意义。方法按随机数字表法将30只雄性ICR小鼠分为正常对照组(Normal组)、假手术组(Sham组)和SAKI组,每组10只。采用盲肠结扎穿孔术(CLP)制备小鼠SAKI模型;Sham组不结扎、穿刺盲肠,其余手术步骤同SAKI组;Normal组不做任何处理。于CLP术后24h取小鼠眼眶血和肾脏组织,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血肌酐(SCr)和尿素氮(BUN)水平;取肾组织行苏木素-伊红染色,于光镜下观察肾组织病理学改变并评估损伤严重程度;用免疫组化法检测肾组织中c-FLIP表达;用蛋白质免疫印迹试验(Western Blot)检测肾组织中c-FLIP、Bax和天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3(caspase-3)蛋白表达。采用Pearson法分析SAKI时肾组织中c-FLIP与Bax和caspase-3蛋白表达的相关性。结果Normal组和Sham组肾小管上皮细胞结构规则、完整,间质未见炎性细胞浸润,肾损伤评分均为(1.30±0.48)分;免疫组化显示肾小管上皮细胞可见大量c-FLIP阳性表达(IA:120.20±3.87、116.70±3.46);WesternBlot显示肾组织中c-FLIP呈高表达(c-FLIP/GAPDH:0.99±0.01、0.98±0.02),Bax和caspase-3呈低表达(Bax/GAPDH:0.16±0.04、0.19±0.03,caspase-3/GAPDH:0.24±0.04、0.23±0.05)。与Sham组相比,SAKI组肾小管上皮细胞变性、坏死,间质有大量炎性细胞浸润,肾损伤评分显著升高(分:4.60±0.52比1.30±0.48,P<0.01),血清SCr和BUN水平均显著升高[SCr(μmol/L):193.90±13.54比24.50±3.78,BUN(mmol/L):81.60±7.26比5.20±0.92,均P<0.01],肾组织中c-FLIP阳性细胞明显减少(IA:17.11±0.82比116.70±3.46,P<0.01),c-FLIP蛋白表达水平明显下降(c-FLIP/GAPDH:0.29±0.03比0.98±0.02,P<0.01),而Bax和caspase-3蛋白表达水平均明显升高(Bax/GAPDH:0.87±0.06比0.19±0.03,caspase-3/GAPDH:0.88±0.07比0.23±0.05,均P<0.01)。相关性分析显示,SAKI小鼠肾组织中c-FLIP蛋白与Bax蛋白
- 樊恒乐健伟陈国栋孙敏叶继辉朱永定朱建华
- 关键词：C-FLIP急性肾损伤ICR小鼠CASPASE-3蛋白表达脓毒症WESTERNBLOT
- 重症监护病房脑出血患者并发高钠血症的临床研究被引量：2
- 2020年
- 目的探讨脑出血患者并发高钠血症的特点及预后。方法选取200例脑出血患者,记录患者的最高血钠和平均血钠值,根据血钠浓度进行分组和分层比较,分析其临床特征及预后情况。结果与非高钠血症组相比,高钠血症组格拉斯哥昏迷评分法(GCS)评分更低,急性生理与慢性健康评分(APACHEⅡ)评分更高,肝功能异常和各类感染的并发症更易发生,且预后更差。进一步分层分析结果显示,血钠指标与脑出血患者的并发症和预后呈正相关。结论高钠血症与脑出血疾病的发展及预后密切相关,高钠血症既是影响患者疗效的独立危险因素,同时也是判断患者预后的临床指标。
- 陈国栋樊恒李丹辉董进中朱建华
- 关键词：脑出血高钠血症预后
- 浙江省45家医院ICU重症社区获得性肺炎患者糖皮质激素使用情况调查被引量：20
- 2019年
- 目的调查浙江省医院重症加强治疗病房(ICU)医生对糖皮质激素在重症社区获得性肺炎(SCAP)患者中的使用情况,为指导SCAP患者的临床用药提供参考依据。方法参照国内外权威指南制定问卷调查表,通过Email方式发放问卷,调查浙江省二级甲等(二甲)及以上医院ICU医生对社区获得性肺炎(CAP)相关指南的掌握情况以及糖皮质激素在SCAP中的使用情况,然后对有效问卷进行分析。结果2016年6月共发放问卷340份,2个月后收回问卷340份,有效问卷333份;浙江省45家医院333名ICU医生参与调查。①ICU医生对CAP相关指南的认知:79.58%(265/333)的医生阅读过CAP指南相关知识,其中工作>10年者对指南的阅读率高于工作1~5年和6~10年者〔93.07%(94/101)比74.00%(111/150)、73.17%(60/82),均P<0.05〕,研究生及以上学历者阅读率高于本科者〔85.35%(134/157)比74.43%(131/176),P<0.05〕,高级职称者阅读率高于初级、中级职称者〔93.07%(94/101)比71.43%(80/112)、75.83%(91/120),均P<0.05〕。了解糖皮质激素类药物临床应用指导原则的总体知晓率为13.81%(46/333),其中工作>10年及高级职称医生的知晓率相对较高,分别为23.76%(24/101)和20.79%(21/101),而不同学历、不同等级医院医生的知晓率差异无统计学意义。②糖皮质激素在不同病因肺炎中的使用:44.74%(149/333)的医生赞同在重症病毒性肺炎中常规使用糖皮质激素,而赞同在重症细菌性肺炎、重症真菌性肺炎、重症肺孢子菌肺炎、慢性阻塞性肺疾病(COPD)合并重症肺炎常规使用糖皮质激素的医生分别为22.82%(76/333)、9.31%(31/333)、22.52%(75/333)和18.32%(61/333)。③糖皮质激素使用方案:79.58%(265/333)的医生选择甲泼尼龙,4.20%(14/333)选择氢化可的松,1.20%(4/333)选择地塞米松,15.02%(50/333)未应用激素。分别有52.65%(149/283)和47.35%(134/283)的医师选择在入院24h内及入院1~7d使用糖皮质激素,其中学历和医院等级越低的医�
- 陈国栋陈国栋宣南霞樊恒樊恒朱建华崔巍
- 关键词：问卷调查重症社区获得性肺炎糖皮质激素
- Klotho蛋白对脓毒症急性肾损伤小鼠的肾脏保护作用及其机制研究被引量：18
- 2019年
- 目的探讨Klotho蛋白(一种单向跨膜蛋白)对脓毒症急性肾损伤(AKI)小鼠的保护作用及其作用机制。方法选取6~8周龄、SPF级健康雄性C57BL/6小鼠60只,按随机数字表法分为假手术组(Sham组)、脓毒症模型组(CLP组)和Klotho蛋白干预组(CLP+KL组),每组20只。采用盲肠结扎穿孔术(CLP)制备脓毒症AKI小鼠模型;Sham组除不结扎、穿刺盲肠外,其余手术步骤相同。CLP+KL组术后连续4 d腹腔注射Klotho蛋白0.02 mg/kg;Sham组和CLP组注射等量生理盐水。术后24 h取各组小鼠眼眶血,采用肌氨酸氧化酶法和脲酶法分别检测血肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)水平。术后5 d于麻醉后取小鼠肾组织,采用苏木素-伊红(HE)染色评估肾脏病理损伤;透射电镜下观察肾小管上皮细胞线粒体超微结构;用微量酶标法测定线粒体中还原型谷胱甘肽(GSH)水平,用硫代巴比妥酸法测定线粒体中丙二醛(MDA)含量,用比色法测定线粒体中一氧化氮合酶(NOS)活性;用蛋白质免疫印迹试验(Western Blot)检测肾组织Klotho、Bcl-2和细胞色素C(Cyt C)蛋白表达。结果 Sham组肾组织结构清晰、完整。与Sham组相比,CLP组肾小球和肾小管上皮细胞明显水肿,小管腔内可见透明管型,间质有大量炎性细胞浸润;血清SCr和BUN水平均显著高于Sham组〔SCr(μmol/L):182.60±6.97比47.20±5.37,BUN(mmol/L):53.70±5.12比18.70±2.62,均P<0.01〕;透射电镜下可见线粒体嵴肿胀、变形,嵴结构破坏,基质密度降低,外膜丧失;线粒体氧化应激因子水平显著升高〔MDA(μmol/g):1.172±0.046比0.746±0.094,GSH(μmol/g):5.765±0.059比4.223±0.072,NOS(kU/g):0.91±0.05比0.68±0.03,均P<0.01〕;肾组织Klotho蛋白、Bcl-2蛋白表达水平明显下降,Cyt C蛋白表达水平显著增加(Klotho/-?actin:0.188±0.020比0.538±0.024,Bcl-2/-?actin:0.311±0.010比0.391±0.015,Cyt C/-?actin:0.226±0.010比0.135±0.006,均P<0.01)。与CLP组比较,CLP+KL组肾小球和小管上皮细胞水肿减轻,小管腔内透明�
- 孙敏樊恒乐健伟陈国栋陈红李洁朱建华
- 关键词：KLOTHO蛋白脓毒症线粒体
- 糖皮质激素在重症监护室脓毒性休克中的应用现状调查被引量：3
- 2019年
- 糖皮质激素(本文简称激素)辅助治疗脓毒症已有几十年[1],但是否获益并不清晰[2]。尽管脓毒症拯救指南不断更新推广,但激素在脓毒性休克中具体如何使用等尚不清楚[2-5],国内也缺乏这样的研究。为此,笔者对浙江省部分医院重症监护室(ICU)医生进行问卷调查,旨在了解:(1)激素在脓毒性休克的使用情况?(2)ICU医生对脓毒症相关指南及激素在脓毒性休克治疗中的认知?
- 胡文庆胡文庆宣南霞陈国栋张恺张淑芳崔巍张淑芳
- 关键词：糖皮质激素脓毒性休克重症监护室脓毒症问卷调查ICU
- N-乙酰半胱氨酸上调细胞FLICE抑制蛋白表达对脓毒症小鼠急性肾损伤的保护作用及其机制研究被引量：3
- 2018年
- 目的研究N-乙酰半胱氨酸(NAC)上调细胞FLICE抑制蛋白(c-FLIP)表达对脓毒症小鼠急性肾损伤的作用。方法将30只雄性BALB/c小鼠分为假手术组、脓毒症组和NAC组,每组各10只。采用盲肠结扎穿孔术法制备脓毒症小鼠模型,假手术组除不结扎穿刺盲肠外,其余手术步骤相同,NAC组小鼠术后15 min尾静脉注射NAC 100 mg/kg。造模成功后24 h取小鼠肾脏,光镜下观察肾脏组织病理变化;采用实时定量PCR(RT-PCR)法检测c-FLIP mRNA表达;采用Western-blotting法检测c-FLIP蛋白表达;复制上述实验观察96 h内小鼠的生存情况。结果与假手术组相比,脓毒症组小鼠肾小球萎缩、肾小管上皮细胞变形、肾小管腔内可见大量肾细胞间质和碎片,而NAC组小鼠肾脏组织病变明显减轻。三组间肾脏组织病理学损伤评分、cFLIP mRNA及蛋白表达比较,差异均有统计学意义(F=101.400、31.720、20.330,P均<0.05)。进一步两两比较发现,CLP组小鼠肾脏组织病理学损伤评分较假手术组显著升高(P <0.001),NAC组小鼠肾脏组织病理学损伤评分较CLP组显著降低(P <0.001)。与假手术组相比,脓毒症组小鼠c-FLIP mRNA及蛋白表达均明显下降(P均<0.05),NAC组c-FLIP的蛋白表达有所降低(P <0.05);与脓毒症组相比,NAC组小鼠c-FLIP mRNA及蛋白表达均显著上升(P均<0.05)。KaplanMeier生存曲线结果显示,三组小鼠生存情况比较,差异有统计学意义(χ2=8.806,P=0.012)。进一步两两比较发现,脓毒症组及NAC组小鼠的存活数量均较假手术组显著降低(P均<0.017),而NAC组小鼠存活数量较脓毒症组明显升高(P <0.017)。结论 NAC通过上调c-FLIP表达对脓毒症小鼠的急性肾损伤具有显著的保护作用。
- 樊恒乐健伟孙敏陈国栋朱永定叶继辉朱建华
- 关键词：脓毒症急性肾损伤N-乙酰半胱氨酸
