赵建军
- 作品数:100 被引量:292H指数:10
- 供职机构:中国农业科学院特产研究所更多>>
- 发文基金:吉林省科技发展计划基金科技部科研院所社会公益研究专项国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学生物学轻工技术与工程更多>>
- 白菜类作物(Brassica.rapa)遗传多样性的AFLP分析
- 利用荧光AFLP技术,采用4对AFLP引物组合对国内外161份白菜类作物(Brassica.rapa)和2份甘蓝型油菜(Brasica.napus)进行了总基因组DNA水平上的多态性检测,获得了524个标记,其中多态性标...
- 赵建军王晓武Guusie.BonnemaDick.VreugdenhilMaarten.Koornneef许泽永孙日飞
- 关键词:白菜类作物多态性检测分子标记
- 文献传递
- 狐、貉和水貂犬瘟热病毒受体SLAM的基因克隆及其真核表达被引量:9
- 2010年
- 信号淋巴激活分子(SLAM)为犬瘟热病毒(CDV)感染其宿主动物识别的细胞受体。本试验应用RT-PCR从狐狸、貉和水貂的外周血淋巴细胞中克隆到其相应SLAM基因。基因测序比较发现,狐狸、貉与同科的犬SLAM基因编码区长度均为1029bp,核苷酸同源性高于98.6%;而水貂SLAM基因编码区长度为1020bp,与以上三种动物遗传关系较远(核苷酸同源性<83.7%),但与海豹SLAM基因遗传关系较近(核苷酸同源性为91.4%)。基于不同动物SLAM基因序列的系统进化树分析显示,犬、狐狸、貉、水貂和海豹在进化树上构成了以CDV为感染宿主的遗传分支。氨基酸序列比较显示,该5种动物SLAM分子上均存在一个长度为26个氨基酸的信号肽序列,且在空间结构上影响宿主——病毒特异性的8个关键氨基酸均完全保守。通过构建表达该狐狸、貉、水貂SLAM基因的三种真核表达质粒,分别转染CRFK细胞后,应用CDV强毒感染试验证实,CDV均能在三种转染细胞上产生明显的细胞病变效应(CPE),而未转染CRFK细胞对照无CPE产生,由此证实作为CDV细胞受体的狐、貉和水貂的SLAM,体外表达后能明显增强犬瘟热强毒株对非敏感细胞的感染能力。
- 赵建军张海玲高晗赵春霏柴秀丽陈涛闫喜军吴威
- 关键词:犬瘟热病毒细胞受体SLAM真核表达
- 犬瘟热病毒临床流行野毒株F蛋白信号肽区分析被引量:2
- 2008年
- 根据GenBank上发表的犬瘟热病毒(CDV)融合蛋白基因(F)序列,设计引物扩增F蛋白部分信号肽区,片段长369bp。对2005年~2007年收集的犬瘟热阳性的水貂、狐、貉实质脏器、血液、尿液等样品进行扩增,获得了13个CDVF蛋白部分信号肽区基因片段。序列分析发现,CDV野毒F蛋白该区段核苷酸与氨基酸序列与目前我国使用疫苗株CDV,及其他国内外疫苗株比较存在较大差异,与CDV3对应区段的核苷酸同源性在80.7%~83.2%之间,而推导的对应氨基酸序列同源性只有64.8%~71.3%。部分信号肽区的氨基酸疏水性分析,推测其调控功能也发生变化,本研究为CDV遗传变异和分子流行病学提供理论数据。
- 王凤雪闫喜军柴秀丽吴威邵西群罗国良张海玲易立赵建军
- 关键词:犬瘟热病毒融合蛋白信号肽
- 利用芥蓝×青花菜DH群体构建AFLP连锁图谱被引量:22
- 2005年
- 利用青花菜(Brassicaoleraceavar.italica)与芥蓝(Brassicaoleraceavar.alboglabra)杂交后代 双单倍体(DH)群体为材料,通过AFLP技术构建了一个甘蓝类作物较高密度的遗传连锁图谱。该图谱包 括9个主要连锁群及2个小连锁群,总图距801.5cM,含337个AFLP标记,标记间平均距离为3.6cM, 为甘蓝类作物基因定位、比较基因组学及重要经济性状QTL分析提供了一个框架图谱。
- 王晓武娄平何杭军杨宝军张延国赵建军
- 关键词:芥蓝青花菜DH群体AFLP
- 犬瘟热病毒CDV-3株感染性克隆的构建与鉴定被引量:1
- 2021年
- 以国内商品化水貂犬瘟热病毒疫苗所用毒株CDV-3为模板,构建犬瘟热病毒感染性c DNA克隆,为犬瘟热病毒新型疫苗研制、致病机理研究提供理论基础。设计13对引物对其全基因组序列测定,分析单一酶切位点,将CDV-3的全长分5个片段进行RT-PCR扩增。经酶切拼接,将5个片段顺次插入到酶切位点改造后的真核载体pc DNA3.2的多克隆酶切位点处,同时在F1首端和F5末端分别加入锤头状核酶和丁型肝炎核酶序列,获得CDV-3株的全长c DNA质粒(pcDNA3.2-CDV-3)。构建表达CDV-3 N、P、L蛋白的3个辅助质粒。利用转染试剂LipofectamineTM 2000将全长质粒和3个辅助质粒共转染293T细胞,3 d后,将上清接种到Vero细胞。观察犬瘟热病毒典型合胞体病变,对重组病毒进行免疫荧光鉴定和标签鉴定。最后,比较wtCDV-3和rCDV-3的生长特性。全长质粒和辅助质粒的酶切鉴定和序列测序均正确。拯救的重组病毒能在Vero细胞上形成典型的合胞体病变,经RT-PCR、间接免疫荧光和电镜观察鉴定,证明成功拯救出重组病毒rCDV-3株。rCDV-3的病毒滴度最高达到107.667 TCID50/mL,比wtCDV-3的滴度106.667 TCID50/mL高出约10倍。rCDV-3感染Vero细胞后,迅速大量增殖,于感染后36 h达到最高病毒滴度。而wt CDV-3增殖平缓,感染后72 h时病毒含量达到最大。文中建立的高效CDV-3株反向遗传操作平台,为犬瘟热病毒新型疫苗研制和致病机理研究奠定基础。
- 卜研闫喜军赵建军李海涛赵传芳薛向红
- 关键词:犬瘟热病毒感染性克隆反向遗传系统
- 狐、貉源犬瘟热病毒H和F基因的克隆与序列分析被引量:4
- 2012年
- 为研究我国圈养狐、貉流行犬瘟热病毒(canine distemper virus,CDV)的基因分型与遗传变异情况,通过RT-PCR方法扩增与测序分析了2009年来源于山东省和河北省病料中的CDV H与F基因,并分别与GenBank CDV野毒株和疫苗株的基因序列比对,构建了核苷酸序列的系统发生树。H基因系统发生分析显示,6株毒株归属为Asia-1型。H蛋白氨基酸序列比较表明,除HeB(09)3株有8个潜在N-连接的糖基化位点外,其余毒株N-连接的糖基化位点均为9个。以往的研究结果显示,日本和中国台湾分离株的潜在N-连接糖基化位点为8~9个。6株野毒F蛋白编码区氨基酸的同源性为98.0%~99.5%,与CDV3(登录号EU726268)和Onderstepoort(登录号AF305419)疫苗株的同源性为89.1%~90.6%,F蛋白的前导区(1~135位氨基酸)与疫苗株相比的同源性为62.2%~66.7%;野毒株F蛋白氨基酸在108~110处比疫苗株CDV3多1个潜在N-连接的糖基化位点,HeB(09)3的F蛋白还在366~369位多1个潜在的N-连接的糖基化位点。目前在山东省和河北省2地狐狸和貉中流行的犬瘟热野毒株为Asia-1型,HeB(09)3株H蛋白和F蛋白在N-连接糖基化方面与其他5株野毒株有明显的不同。
- 闫如勋赵建军柴秀丽闫喜军倪佳张海玲高晗白雪张蕾陈立志吴威
- 关键词:狐狸犬瘟热病毒融合蛋白基因
- 水貂出血性肺炎的诊断与治疗被引量:8
- 2007年
- 水貂出血性肺炎是由绿脓杆菌引起的一种急性传染病,该病曾于2000年在河北某养殖场暴发,2004年山东某养殖场也暴发过此病,近3年来,大连一些貂场也发生过该病,给养殖户造成了较大的经济损失。2007年8月,大连某养殖场发生一种以出血性肺炎为典型特征的疾病,经综合检验,确诊为绿脓杆菌引起的水貂出血性肺炎,现将情况报道如下:
- 罗国良闫喜军赵春霏赵建军张海玲
- 关键词:出血性肺炎水貂绿脓杆菌急性传染病养殖场
- 犬瘟热疫苗株CDV_3核蛋白基因全序列测序及分析被引量:5
- 2007年
- 根据GenBank上发表的犬瘟热病毒(CDV)核蛋白(N)蛋白基因序列,设计合成了1对寡聚核苷酸引物,提取犬瘟热病毒疫苗株CDV3的RNA为模板,采用RT-PCR扩增病毒的N蛋白基因,并进行产物克隆和序列分析。将CDV3疫苗株N基因与GenBank数据库中的疫苗株Onderstepoort及中国、美国和德国等分离的疫苗株或毒株共14株CDV N基因序列进行同源性分析,发现CDV3 N基因序列与疫苗株Onderstepoort的同源性为97.1%,与其他分离毒株的核苷酸同源性为92.8%~94.0%,其中与中国分离的TN株同源性为93.6%;然而,CDV3 N蛋白与它们的氨基酸同源性却基本都为96.6%~97.3%。这说明虽然犬瘟热弱毒株CDV3在核苷酸水平上与其他疫苗株毒株的差异较大,但是在氨基酸水平上的比较差异较小。
- 王凤雪闫喜军柴秀丽张海玲邵西群罗国良赵建军
- 关键词:犬瘟热病毒N基因同源性
- 犬细小病毒:从起源到进化被引量:37
- 2011年
- 犬细小病毒(Canine parvovirus,CPV-2)首次分离于1978年,被认为是由遗传关系相近的猫泛白细胞减少症病毒(FPLV)或其他肉食兽细小病毒(FPLV-like virus)跨宿主感染犬产生的新病原。其感染能引起新生犬急性心肌炎或幼犬出血性肠炎,造成较高的发病率和死亡率。该病原爆发后短短一年时间内即广泛流行到世界各地。随着CPV-2对宿主的适应和变异,新抗原变异型(CPV-2a、CPV-2b和CPV-2c)不断产生并在世界各地逐步替代了CPV-2的流行。伴随CPV-2抗原变异的同时,其对宿主(犬、猫)嗜性、毒力等生物学特性也随之改变。本文综述了CPV-2过去30多年在世界流行和变异情况,并探讨了基因变异在病毒跨宿主传播中的意义。
- 赵建军闫喜军吴威
- 关键词:犬细小病毒进化抗原变异
- 貉犬瘟热病毒弱毒疫苗株及其在制备貉犬瘟热活疫苗中的用途
- 本发明公开了一种貉犬瘟热病毒弱毒疫苗株及其在制备貉犬瘟热活疫苗中的用途,属于兽用生物制品技术领域。本发明通过貉体连续传代的方式,人工驯化了犬瘟热疫苗株CDV‑O2,获得了一株对貉安全、免疫原性良好、滴度稳定的犬瘟热病毒弱...
- 闫喜军胡博吕爽王洋廉士珍刘昊张蕾白雪鲁荣光张海玲赵建军朱言柱史宁薛向红邓效宇徐淑娟
- 文献传递