李海霞
- 作品数：13 被引量：41H指数：4
- 供职机构：军事医学科学院毒物药物研究所更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划国家科技重大专项国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学化学工程更多>>
- 壳寡糖对猪蓝耳病灭活疫苗的佐剂活性研究
- 目的研究探讨不同聚合度、不同脱乙酰度的壳寡糖对猪蓝耳病灭活疫苗(PRRSV)的免疫佐剂活性。方法不同聚合度和脱乙酰度的壳寡糖COS(聚合度2-8,脱乙酰度>95%)、COSNAC(聚合度2-8,乙酰度>90%)、HCOS...
- 贾培媛李海霞巫亚俊刘坤璐武军华王玉霞单俊杰刘洪涛程功杜昱光
- 关键词：壳寡糖佐剂免疫调节猪蓝耳病灭活疫苗
- 文献传递
- 牛膝粗多糖、多糖组分和均一多糖、其制备方法及其用途
- 本发明属于医药技术领域，具体地，涉及疫苗和免疫领域。具体地，本发明涉及从牛膝中提取的牛膝粗多糖、牛膝多糖组分以及牛膝均一多糖。其中，所述牛膝粗多糖选自：牛膝粗多糖1：主要由果糖组成；分子量为1000－3000Da；优选地...
- 单俊杰王玉霞汪艳艳麻浩李帅李海霞巫亚俊武军华刘坤璐陈志宏刘圆圆
- 文献传递
- 茯苓多糖PCP-Ⅰ和PCP-Ⅱ作为疫苗佐剂的免疫原性被引量：11
- 2017年
- 目的研究茯苓多糖(PCP)中PCP-Ⅰ和PCP-Ⅱ作为疫苗佐剂的免疫原性。方法 1采用钥孔戚血蓝蛋白(KLH)和牛血清白蛋白(BSA)为载体蛋白分别与PCP-Ⅰ或PCP-Ⅱ连接制备免疫抗原KLHPCP-Ⅰ和KLH-PCP-Ⅱ及筛选抗原BSA-PCP-Ⅰ和BSA-PCP-Ⅱ。KLH-PCP-Ⅰ和KLH-PCP-Ⅱ分别与弗氏佐剂联用id免疫家兔2次,ELISA检测家兔血清中抗多糖抗体。2PCP-Ⅰ或PCP-Ⅱ单独im免疫小鼠2次,ELISA检测小鼠血清中抗多糖抗体。3PCP-Ⅰ或PCP-Ⅱ为佐剂分别配伍重组乙肝病毒表面抗原(HBs Ag)和猪繁殖与呼吸综合征病毒灭活疫苗(PRRSV)im或sc免疫小鼠2次,ELISA检测小鼠血清中抗多糖抗体。结果1KLH-PCP-Ⅰ或KLH-PCP-Ⅱ与弗氏佐剂联用免疫2次,可产生抗KLH和抗多糖抗体。2PCP-Ⅰ或PCP-Ⅱ单独im免疫小鼠2次,检测出低水平Ig M抗体,未检测出IgG抗体。3HBs Ag或PRRSV抗原联用PCP-Ⅰ或PCP-Ⅱ免疫小鼠2次,未检出抗多糖IgG抗体。结论 PCP-Ⅰ和PCP-Ⅱ本身免疫原性较弱,作为疫苗佐剂可能具有良好的安全性。
- 李海霞刘坤璐李文斐贾培媛于卫立武军华胡涛王玉霞单俊杰孙国辉
- 关键词：茯苓多糖佐剂
- 板蓝根多糖IIP-A-1和IIP-2作为疫苗佐剂的免疫原性被引量：4
- 2019年
- 目的研究板蓝根中均一多糖IIP-A-1和IIP-2作为疫苗佐剂的免疫原性。方法 (1)分别用钥孔血蓝蛋白(KLH)和牛血清白蛋白(BSA)为载体蛋白,与IIP-A-1和IIP-2分别偶联,制备免疫抗原KLH-IIP-A-1和KLH-IIP-2及检测抗原BSA-IIP-A-1和BSA-IIP-2。KLH-IIP-A-1和KLH-IIP-2(每只家兔300μg)分别与弗氏佐剂(每只0.65 mL)联用,皮内注射免疫家兔2次,间隔28 d;第2次免疫后14 d,分别用KLH,BSA和BSA-IIP-A-1或BSA-IIP-2 5 mg·L^(-1)包被酶联反应板,ELISA检测家兔血清中抗IIP-A-1和IIP-2抗体。(2)IIP-A-1和IIP-2(每只500μg)分别im免疫小鼠3次,每次间隔28 d;每次免疫后14 d,用BSA-IIP-A-1或BSA-IIP-2 5 mg·L^(-1)包被酶联反应板,ELISA检测小鼠血清中抗IIP-A-1或IIP-2抗体。(3)IIP-A-1和IIP-2为佐剂(每只200μg),分别配伍口蹄疫病毒灭活疫苗(Aftosa,每只2μg)im免疫小鼠2次;IIP-2(每只200μg)配伍H1N1病毒裂解疫苗(每只3μg)im免疫3次,配伍乙肝病毒重组亚单位蛋白乙肝病毒表面抗原(HBsAg,每只2μg)im免疫小鼠2次;每次间隔28 d。末次免疫后14 d,用KLH-IIP-A-1或KLH-IIP-2 2 mg·L^(-1)包被酶联反应板,ELISA检测小鼠血清中抗IIP-A-1或IIP-2抗体。结果 (1)KLH-IIP-A-1和KLH-IIP-2分别与弗氏佐剂联用免疫家兔2次,可产生抗KLH,IIP-A-1或IIP-2抗体,抗KLH滴度≥1∶50 000,抗IIP-A-1抗体滴度≥1∶20 000,抗IIP-2抗体滴度≥1∶100 000。(2)IIP-A-1和IIP-2分别单独肌注免疫小鼠3次,仅检测出抗IIP-2 IgG_1抗体,滴度为1∶1000。(3)IIP-A-1作为佐剂配伍Aftosa疫苗免疫小鼠后,未检测出抗IIP-A-1 IgG_1抗体。IIP-2作为佐剂分别配伍H1N1和Aftosa疫苗免疫小鼠后,均可检测出抗IIP-2 IgG_1抗体,滴度均为1∶400;配伍HBsAg抗原免疫小鼠后,检测出低水平的抗IIP-2 IgG_1抗体,滴度为1∶100。结论作为半抗原,板蓝根多糖IIP-A-1和IIP-2连接KLH后,可刺激家兔产生高滴度的抗IIP-A-1和IIP-2抗体。作为佐剂,IIP-A-1无免疫原性;IIP-2具有一定的免疫原性,分别与Aftos
- 李海霞李海霞贾培媛贾培媛于卫立胡涛胡涛王玉霞单俊杰
- 关键词：板蓝根多糖佐剂
- 板蓝根阿拉伯半乳聚糖的理化性质及疫苗佐剂活性研究
- 目的：板蓝根(Isatis indigotica)是我国重要的传统中药材之一,其水煎液具有显著的抗病毒功效.前期研究发现板蓝根总多糖(ⅡP)能显著提高OVA抗原免疫小鼠的特异性抗体滴度.总多糖采用DEAE-纤维素柱层析分...
- 王玉霞朱婷李倩麻浩李海霞巫亚俊单俊杰
- 关键词：板蓝根阿拉伯半乳聚糖疫苗佐剂
- 双夹心酶联免疫法检测生物样品中的人源化抗体MIL50被引量：1
- 2013年
- 目的建立酶联免疫吸附分析方法(ELISA)检测待测样品中的人源化抗体MIL50。方法用原核表达的重组蓖麻毒素(ricin)A链(RTA)突变体(RiVax)为包被抗原,与辣根过氧化物酶(HRP)标记的羊抗人IgG建立的夹心ELISA,检测生物样品中的人源化抗体MIL50。结果以蓖麻毒素和RiVax包被抗原,ELISA检测MIL50的结果显示,RiVax可与MIL50特异性结合,结合能力不低于全毒素蛋白,可以用于MIL50的定量分析。RiVax的包被浓度为3 mg/L,对于溶解于含有吐温20(Tween 20)磷酸缓冲液(PBST)中的MIL50的检测灵敏度可达0.030 mg/L;与PBST样品相比较,含有同样浓度MIL50的大鼠血清ELISA的阳性结果明显减弱,不同的大鼠组织匀浆对于MIL50的检测有不同程度的干扰。结论夹心ELISA能够有效地用于人源化蓖麻毒素抗体MIL50的检测分析。
- 邬一凡贾培媛武军华周建平李海霞吕明
- 关键词：蓖麻毒素人源化抗体酶联免疫吸附分析
- 怀牛膝果寡糖对H1N1流感疫苗佐剂活性及免疫细胞功能的影响被引量：5
- 2016年
- 目的研究牛膝果寡糖ABP-50-FOS对H1N1流感疫苗的佐剂活性及免疫细胞功能的影响。方法采用凝胶渗透色谱、毛细管电泳、红外光谱和核磁共振等方法研究ABP-50-FOS的理化性质;BALB/c小鼠肌肉注射H1N1流感疫苗3μg和ABP-50-FOS 200μg初次免疫,28 d后加强免疫。分别于初次和再次免疫后14 d用ELISA法检测小鼠血清特异性Ig G,Ig G1,Ig G2a,Ig G2b,Ig G3和Ig M抗体水平;流式细胞仪测定脾细胞中CD3+,CD19+,CD4+和CD8+淋巴细胞亚群百分率;MTT法测定小鼠脾细胞增殖活性;ELISA法测定脾细胞培养上清干扰素γ(IFN-γ)、胸腺细胞培养上清白细胞介素4(IL-4)、腹腔巨噬细胞培养上清肿瘤坏死因子α(TNF-α)和一氧化氮及小鼠骨髓细胞和DC2.4树突状细胞培养上清IL-12p70含量。结果ABP-50-FOS是一种果寡糖,峰高分子质量为1885 u,骨架结构为1,2-连接和1,6-连接的果糖。该寡糖能明显升高H1N1流感疫苗免疫小鼠血清特异性Ig G,Ig G2a和Ig M抗体水平(P<0.01),提高免疫小鼠脾CD3+,CD4+和CD8+T淋巴细胞亚群的百分率。体外实验表明,ABP-50-FOS能促进小鼠脾细胞增殖反应和IFN-γ分泌(P<0.01),促进胸腺细胞IL-4分泌(P<0.01),刺激腹腔巨噬细胞分泌TNF-α(P<0.01)和DC2.4树突状细胞分泌IL-12p70(P<0.01),对巨噬细胞一氧化氮的分泌有抑制作用。结论牛膝果寡糖ABP-50-FOS对H1N1流感疫苗具有良好的佐剂活性,体外对小鼠免疫细胞功能具有促进作用。
- 汪艳艳李海霞巫亚俊赵修南麻浩刘坤璐武军华单俊杰王玉霞王海南
- 关键词：牛膝多糖果寡糖佐剂
- 5株抗蓖麻毒素单抗的抗毒活性(英文)被引量：1
- 2018年
- 目的比较5株新制备抗蓖麻毒素单抗(8-1-1-8,13-2-4,13-4,S11和AB6)的体内外抗毒效应。方法分别采用2 mg·L^(-1)蓖麻毒素A链(RTA)重组蛋白,蓖麻毒素B链(RTB)重组蛋白以及蓖麻毒素全毒素(holotoxin)包被酶联免疫吸附测定(ELISA)反应板,检测5株单抗与蓖麻毒素的结合位点;体外采用兔网织无细胞系统评价5株单抗对蓖麻毒素的中和活性;采用MDCK细胞评价5株单抗对细胞的保护活性,分为7组:正常对照组,蓖麻毒素中毒组,蓖麻毒素+不同单抗实验组。蓖麻毒素分别与5株单抗或DMEM 37℃孵育1 h后,加入96孔板对数生长期的MDCK细胞,再分别使用CCK-8试剂盒和RTCA细胞实时检测系统检测细胞存活率。体内实验选用48只雌性ICR小鼠,随机分为4组,每组12只。除对照组外,其他3组ip蓖麻毒素25μg·kg^(-1),并于2 h后分别iv生理盐水、单抗AB6或S11 400μg·kg^(-1),每天记录小鼠存活数以及存活小鼠体质量。结果 ELISA结果显示,单抗13-2-4和8-1-1-8 0.25 mg·L^(-1)以及13-4 1 mg·L^(-1)与蓖麻毒素或RTB有较高A450 nm值;单抗S11 0.5 mg·L^(-1)与蓖麻毒素或RTA包被孔有较高的A450 nm值;单抗AB6仅与蓖麻毒素包被孔有较高的A450 nm值。兔网织无细胞系统检测结果显示,与正常对照组相比,蓖麻毒素处理组的荧光值下降至1000(P<0.01);与蓖麻毒素组相比,仅单抗S11处理组荧光度值显著增加(P<0.01)。CCK-8实验结果显示,与蓖麻毒素组相比,单抗S11和AB6处理后,细胞存活率在24或48 h内均提高(P<0.01)。RTCA系统检测结果显示,单抗S11和AB6组的细胞指数与正常对照组接近;单抗蓖麻毒素细胞毒作用与剂量结果表明,单抗S11和AB6的EC50分别为26.79和11.19μg·L^(-1)。体内实验结果表明,单抗S11处理小鼠存活率为100%(12/12),单抗AB6处理小鼠存活率为75%(9/12),蓖麻毒素中毒小鼠的存活时间延长至14 d;S11和AB6处理组存活鼠体质量下降1周后恢复正常。结论单抗S11和AB6对蓖麻毒
- 李海霞刘坤璐王玉霞贾培媛武军华魏文青李桦苏瑞斌苏瑞斌
- 关键词：蓖麻毒素单克隆抗体
- 牛膝粗多糖、多糖组分和均一多糖、其制备方法及其用途
- 本发明属于医药技术领域，具体地，涉及疫苗和免疫领域。具体地，本发明涉及从牛膝中提取的牛膝粗多糖、牛膝多糖组分以及牛膝均一多糖。其中，所述牛膝粗多糖选自：牛膝粗多糖1：主要由果糖组成；分子量为1000－3000Da；优选地...
- 单俊杰王玉霞汪艳艳麻浩李帅李海霞巫亚俊武军华刘坤璐陈志宏刘圆圆
- 茯苓多糖PCP-Ⅰ对乙肝疫苗抗原的佐剂活性被引量：10
- 2016年
- 目的研究茯苓多糖（PCP）-Ⅰ对乙肝疫苗抗原免疫小鼠免疫反应的影响。方法采用60℃水提、醇沉、透析和冷冻干燥获得茯苓粗多糖PCP。PCP再经过DEAE-纤维素和Sephadex G-100柱色谱分离,获得相对分子质量均一多糖PCP-Ⅰ。凝胶过滤色谱法测定其峰高相对分子质量,毛细管电泳法测定其单糖组成。乙肝疫苗抗原（HBs Ag,2μg/小鼠）分别与2个剂量PCP-Ⅰ（200μg/小鼠和50μg/小鼠）联用,肌内注射途径免疫小鼠2次,分别于初次免疫后14 d和第2次免疫后14、30、45、60和90 d,采用ELISA法测定小鼠血清特异性抗体Ig G、Ig M、Ig A及Ig G亚类抗体滴度水平。结果 PCP-Ⅰ为相对分子质量均一多糖,峰高相对分子质量约为3.0×104,单糖摩尔比为岩藻糖∶甘露糖∶葡萄糖∶半乳糖=1.00∶1.81∶0.27∶7.27。佐剂活性结果表明,在第2次免疫后14~90 d期间,与单独抗原组相比,联用50或200μg PCP-I均能显著提高受免小鼠血清特异性抗体滴度水平。单独抗原免疫产生的抗体类型主要为Ig G1和Ig M,而联用PCP-I则还产生高滴度的Ig G2a、Ig G2b和Ig G3。PCP-I对乙肝抗原佐剂效果明显优于铝佐剂,而且随着时间的延长,抗体水平变化不明显。PCP-I还能促进免疫小鼠脾T细胞和B细胞增殖,升高CD3＋/CD19＋的比值,降低CD4＋/CD8＋的比值。结论茯苓多糖PCP-I能显著提高乙肝抗原免疫小鼠体液免疫和细胞免疫能力,效果优于铝佐剂。
- 巫亚俊李帅李海霞麻浩赵修南刘坤路武军华刘园园单俊杰王玉霞
- 关键词：茯苓多糖乙肝疫苗佐剂
