李有为
- 作品数：4 被引量：0H指数：0
- 供职机构：东北农业大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：黑龙江省自然科学基金国家自然科学基金哈尔滨市科技创新人才研究专项资金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- VPA对牛胎儿成纤维细胞体外培养的影响
- 2015年
- 为了研究组蛋白去乙酰化酶抑制剂(HDACIs)丙戊酸(VPA)处理对牛胎儿成纤维细胞体外培养的影响,试验采用培养到第3代的牛胎儿成纤维细胞经VPA处理后,进行细胞生长曲线绘制及形态、活力、细胞周期的检测,并通过Real-time PCR检测Oct4和Cdx2的表达情况,经梯度浓度的VPA处理牛胎儿成纤维细胞,于24 h后观察细胞形态。结果表明:当VPA浓度高于0.5 mmol/L时,细胞开始出现异常形态,死细胞数目增多。0.5 mmol/L VPA处理牛成纤维细胞24 h可以显著抑制细胞活力,可将60%以上细胞的周期阻滞在G0/G1期;但处理48 h将导致细胞染色体整倍率显著下降。与对照组相比,VPA处理后,Oct4的表达量显著升高,而Cdx2基因的表达量则显著降低。说明用HDACIs VPA处理过的牛成纤维细胞作为体细胞核移植的供体细胞,可能更有利于克隆胚胎重编程及发育。
- 岳顺利于思淼周英李有为孙铭菊张利张春龙张朔周佳勃
- 关键词：体外培养
- TSA对牛成纤维细胞体外培养的影响
- 2015年
- 以培养到第三代的牛成纤维细胞为研究对象,经TSA处理后,进行细胞生长曲线绘制及形态、活力、周期的检测,并通过Real-Time PCR检测Oct4和Cdx2的表达情况。当TSA浓度高于50 nmol·L-1时,细胞出现异常形态,死细胞数目增多。MTT法证明浓度为50 nmol·L-1的TSA处理牛成纤维细胞24 h显著抑制细胞活力,但对细胞染色体整倍性形象差异不显著。与对照组相比,当TSA处理牛成纤维细胞48 h时,细胞染色体整倍率显著下降。50 nmol·L-1的TSA处理牛成纤维细胞24 h,60%以上细胞细胞周期阻滞在G0/G1期。Real-Time PCR结果表明与对照组相比TSA处理后,Oct4的表达量显著升高,而Cdx2基因的表达量则显著降低。结论,TSA处理后的牛成纤维细胞作为供体细胞,可能利于克隆胚胎表观重编程及发育。
- 岳顺利周佳勃周英于思淼李有为孙铭菊张利夏平
- 关键词：组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古霉素体外培养
- 不同物种成熟精子Fas蛋白的表达研究
- 2015年
- 使用免疫荧光标记和激光共聚焦显微镜方法,对不同物种成熟精子Fas蛋白进行观测。明确细胞凋亡蛋白Fas在不同物种成熟精子表面的分布规律,并对Fas蛋白进行定位。结果显示Cy3红色荧光标记的Fas蛋白主要分布在啮齿类动物(大鼠、小鼠),反刍动物(山羊、绵羊、牛)的精子头部和中段线粒体鞘上,而在猪和人的成熟精子上未检测到Fas蛋白。说明使用激光共聚焦显微镜技术可以精确定位标记后的Fas蛋白,不同物种成熟精子Fas蛋白的表达存在差异。
- 周佳勃李有为孙铭菊朱江焦光忠董海波谭景和
- 关键词：成熟精子FAS免疫荧光激光共聚焦显微镜
- 冷冻液中添加硫代甘油对小鼠冷冻解冻精子体外受精的影响
- 2014年
- 为了研究在冷冻液中添加硫代甘油(MTG)对小鼠冷冻精液解冻后受精能力的影响,试验采用在精液冷冻液中添加不同浓度MTG(160,320,480,640μmol/L)的方法冷冻C57BL/6小鼠和昆明白小鼠的精子,然后用解冻的精液进行体外受精,检测受精率和2-细胞发育率,还检测了添加480μmol/L组的C57BL/6小鼠体外受精胚胎移植后的出生率。结果表明:在冷冻液中添加MTG后C57BL/6小鼠和昆明白小鼠冷冻解冻精液的受精率和2-细胞发育率均显著升高(P<0.05),说明在冷冻液中添加MTG能够支持体外受精后正常的胚胎发育。通过添加MTG能显著提高这2个品系小鼠冷冻解冻后精子的体外受精能力。
- 周佳勃于思淼张利张春龙张朔李有为岳顺利
- 关键词：小鼠精子冷冻保存体外受精
