闫恕
- 作品数：4 被引量：1H指数：1
- 供职机构：吉林农业大学动物科学技术学院更多>>
- 发文基金：吉林省世行贷款农产品质量安全项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 家蝇几丁质结合蛋白(Md-CBPⅠ)的表达纯化及活性分析
- 2016年
- 为了研究家蝇几丁质结合蛋白(Md-CBPⅠ)在家蝇防御体系中的相关活性,采用PCR技术,对从鸡源沙门氏菌诱导家蝇幼虫构建的抑制性消减文库(SSH)中筛选到的家蝇幼虫几丁质结合蛋白Ⅰ基因(Musca domestica chitin binding proteinⅠ,Md-CBPⅠ)进行扩增,并成功构建了重组表达质粒p ET-32a-Md-CBPⅠ,于大肠杆菌BL21(DE3)中得以高效表达,纯化并获得了MdCBPⅠ融合蛋白。进一步对该蛋白的亲和活性进行了研究,发现Md-CBPⅠ融合蛋白对几丁质以及纤维素均有一定的结合作用,且其对几丁质的结合作用相对较好。试验为家蝇几丁质结合蛋白生物学活性和免疫学活性的研究奠定了基础。
- 袁野闫恕张丹丹孔令聪裴志花刘树明马红霞
- 关键词：家蝇原核表达
- 家蝇幼虫抗菌蛋白基因AS566在毕赤酵母中的表达及产物抑菌活性检测
- 2016年
- 为采用巴斯德毕赤酵母系统表达家蝇幼虫抗菌蛋白AS566基因,并对其抑菌活性进行初步确证。以分子克隆法构建重组表达质粒pGAPZαA-AS566,将其线性化后电击转化至毕赤酵母GS115感受态细胞,在GAP启动子调控下,于30℃诱导表达,SDS-PAGE检测结果显示表达产物的分子质量约为43.5 ku,与预期结果一致。采用管碟法对表达产物的抑菌活性进行检测,结果显示该表达产物对鸡源沙门菌和猪源金黄色葡萄球菌的生长具有抑制作用。本研究为进一步研究家蝇幼虫抗菌蛋白的抑菌机制奠定了基础。
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- 关键词：毕赤酵母真核表达抑菌活性
- 家蝇AS61、AS566和DefensinⅠ基因的表达及产物抑菌活性分析
- 近年来,抗生素在临床诊治上的不合理使用导致细菌的耐药性问题越发严峻,严重影响了人类以及动物的健康,因此,研发不易使致病菌产生耐药性并且可代替抗生素的新型药剂是目前急需解决的问题。家蝇（Musca domestica）通常...
- 闫恕
- 关键词：抗菌肽分泌表达抑菌活性
- 文献传递
- 一种新型家蝇幼虫抗菌肽基因(MDAP-2)的真核表达及抑菌活性检测被引量：1
- 2015年
- 利用毕赤酵母表达系统表达新型家蝇抗菌肽MDAP-2基因(Musca domestica antimicrobial peptide,MDAP-2),为其作为新型抗菌物质应用于临床提供实验依据。根据已有的MDAP-2的氨基酸序列,采用PCR技术扩增获得MDAP-2基因,构建真核重组表达质粒pPIC9K-MDAP-2,将线性化的重组质粒电击转入毕赤酵母(P.pastoris)感受态GS115细胞内,将PCR鉴定为阳性的重组酵母菌进行甲醇诱导表达,并采用Tricine-SDS-PGAE检测表达产物的大小,经镍柱亲和层析纯化获得纯度较高的重组蛋白,采用管碟法检测重组蛋白的生物学活性。结果显示,重组质粒pPIC9K-MDAP-2获得高效表达,蛋白分子量为7.8 kD,管碟法检测重组蛋白对大肠杆菌与沙门氏菌均具有体外抑菌活性。MDAP-2基因的成功表达为进一步研究表达产物的生物学及免疫学活性奠定基础。
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- 关键词：分泌表达
