王琦
- 作品数：1 被引量：3H指数：1
- 供职机构：中南民族大学生命科学学院生物技术国家民委重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 枝状枝孢霉MD2的Unigene A09801克隆与原核表达分析被引量：3
- 2016年
- 真菌紫杉醇合成酶类基因的功能研究是构建紫杉醇高产工程菌株的前提。首次从产紫杉醇真菌——枝状枝孢霉MD2中克隆了Unigene A09801的DNA和c DNA全长序列(1674 bp),该基因不含有内含子,其编码产物含557个氨基酸,与GMC(glucose-methanol-choline)oxidoreductase一致性为56%,蛋白分子质量为61 291.8 u,等电点为5.47,不存在跨膜结构和信号肽。Unigene A09801以单拷贝方式存在于基因组中,其表达量受茉莉酸甲酯诱导表现出先降低后升高再降低的趋势,最高表达量出现在24 h。构建了Unigene A09801的原核表达载体,并初步优化其表达条件为:诱导温度32℃,IPTG浓度1.2 mmol/L,诱导时间4 h。结果为体外(in vitro)分析该基因编码蛋白的催化功能奠定了基础。
- 席晓圆张鹏宋发军于鹏飞王琦孟艳艳
- 关键词：紫杉醇合成酶原核表达
