王月丽
- 作品数：3 被引量：18H指数：1
- 供职机构：大连大学附属中山医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人鼻咽鳞癌细胞CNE1/R PECAM-1真核表达载体的构建
- 2013年
- 通过TA克隆技术及二步克隆的方法构建人鼻咽鳞癌细胞CNE1/R PECAM-1的真核表达载体。将已克隆至Pmd19-T Simple载体的PECAM-1基因片段使用Not/HindⅢ酶切,亚克隆至pcDNA3.1/myc-His(-)A载体并双酶切及测序鉴定。成功构建了人鼻咽鳞癌细胞CNE1/R PECAM-1的真核表达载体,为下一步建立人鼻咽鳞癌PECAM1基因过表达细胞系奠定了基础。
- 王月丽魏继楼伦永志王若雨
- 关键词：鼻咽癌真核表达
- PECAM-1 siRNA对人鼻咽癌辐射致耐药CNE1/R细胞增殖与凋亡的影响
- 2013年
- 目的:探讨血小板内皮细胞黏附因子-1(platelet-endothelial cell adhesion molecule-1,PECAM-1)基因小分子RNA干扰(small interfering RNA,siRNA)对人鼻咽癌辐射致耐药CNE1/R细胞增殖及凋亡的影响。方法:设计干扰RNA编码DNA特异性序列,合成siRNA片段,转染CNE1/R细胞,G418筛选出稳定转染细胞株。蛋白质印迹法检测PECAM-1 siRNA干扰后,细胞中PECAM-1蛋白表达情况;MTT法检测细胞增殖及流式细胞术检测细胞凋亡。结果:筛选出稳定转染细胞株,实验组PECAM-1蛋白表达较阴性组下调3.4倍,证实干扰有效。与阴性组及空白组相比,实验组细胞增殖能力下降,凋亡率升高。结论:PECAM-1基因siRNA可抑制CNE1/R细胞增殖,促进其凋亡。PECAM-1可能在鼻咽癌细胞辐射后生长凋亡中起作用。
- 魏继楼刘芳蒋中秀程红蕾罗素梅王月丽王若雨
- 关键词：RNA干扰鼻咽癌
- 外源基因转染细胞技术的研究进展被引量：18
- 2014年
- 细胞转染技术是分析细胞内基因及基因产物功能的重要工具。它不仅是基因功能研究、基因免疫的理论和技术基础,也是研究基因表达调控、突变分析等的常规工具。同时也是体内应用的重要过程,比如基因治疗、疫苗接种、药物开发等。在过去的40年里,已开发了多种外源基因转染细胞的方法。主要包括以病毒介导的外源基因转染细胞方法和非病毒介导的细胞转染方法。其具体可细分为三类:即生物学方法、化学方法、物理方法。这些方法的提出使外源分子如DNA、RNA等导入特定细胞并表达目的基因及产生特定功能的蛋白质分子得以实现。理想的细胞转染方法应该具有较好的生物降解性、稳定性、靶向性强、有助于基因的表达并能应用于基因方面疾病的治疗。但每种方法都有自己的优势和不足,应根据具体实验的设计和目的来选择最佳细胞转染方法.
- 王月丽魏继楼程红蕾刘芳罗素梅王若雨
- 关键词：细胞基因
