张悦
- 作品数：13 被引量：30H指数：3
- 供职机构：黑龙江中医药大学药学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金黑龙江省教育厅科学技术研究项目黑龙江省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 黄芩素对Aβ25-35损伤PC12细胞谷氨酸受体相关蛋白表达的影响
- 2022年
- 目的研究黄芩素对Aβ25-35损伤PC12细胞中谷氨酸受体相关蛋白表达的影响。方法将PC12细胞按随机数字表法分为对照组、模型组、雌二醇组及不同浓度的黄芩素组,采用噻唑蓝(MTT)法检测各组PC12细胞存活情况。将PC12细胞按随机数字表法分为对照组、模型组、雌二醇组、黄芩素组。对照组、模型组加入DMEM培养液培养,雌二醇组加入1×10-3μmol/L雌二醇DMEM培养液,黄芩素组加入1μmol/L的黄芩素的DMEM培养液,干预2 h后,模型组、雌二醇组、黄芩素组加入20μmol/L Aβ25-35诱导PC12细胞损伤。干预22 h后,采用流式细胞术检测细胞凋亡情况,Western blot检测雌激素受体β(ERβ)、磷酸化的c-jun氨基末端激酶(p-JNK/JNK)和谷氨酸受体中离子型受体N-甲基-D-天冬氨酸受体1(NMDAR1)、谷氨酸受体2(GluR2)和钙/钙调素依赖蛋白激酶-Ⅱ(CaMKⅡ)表达。结果与模型组比较,1μmol/L黄芩素组细胞增殖率[(95.80±2.47)%比(64.34±3.84)%]提高(P<0.01),黄芩素组细胞凋亡率[(7.83±0.67)%比(12.84±0.91)%]明显降低(P<0.01),NMDAR1蛋白[(0.582±0.012)比(0.352±0.012)]、GluR2蛋白[(0.538±0.017)比(0.355±0.006)]、ERβ蛋白[(0.362±0.015)比(0.262±0.018)]表达明显升高(P<0.01),p-JNK/JNK蛋白[(0.476±0.013)比(0.752±0.014)]、CaMKⅡ蛋白[(0.499±0.019)比(0.670±0.016)]表达显著降低(P<0.01)。结论黄芩素对Aβ25-35损伤PC12细胞具有保护作用,其作用机制可能与激活ERβ、抑制p-JNK/JNK活性、调节谷氨酸受体相关蛋白表达有关。
- 关雨佳刘爽于修芳张悦雷霞刘国良张宁徐红丹
- 关键词：黄芩素雌激素受体ΒPC12细胞
- 毛蕊花糖苷对皮质酮损伤HT22细胞保护作用研究
- 2023年
- 目的 探讨毛蕊花糖苷对皮质酮诱导小鼠海马神经元细胞株HT22损伤的保护作用及其机制。方法 用皮质酮构建慢性应激损伤HT22神经元细胞的体外模型。将HT22细胞分为空白组、模型组、雌二醇(E2)组和毛蕊花糖苷组。空白组与模型组以DMEM培养24 h;雌二醇组加入DMEM和0.3μmol·L^(-1)E2溶液;毛蕊花糖苷组加入DMEM和10μmol·L^(-1)毛蕊花糖苷溶液,培养2 h后,除空白组外,其余各组加入400μmol·L^(-1)的皮质酮储备液,继续培养22 h。采用流式细胞术检测各组细胞凋亡率;以蛋白质印迹法检测脑源性神经营养因子(BDNF)、原肌球蛋白受体激酶B(TrkB)、雌激素受体(ERβ)蛋白表达。结果 正常组、模型组、雌二醇组和毛蕊花糖苷组的细胞凋亡率分别为(3.31±0.35)%、(20.82±0.73)%、(9.35±0.87)%和(7.73±0.62)%,BDNF蛋白表达水平分别为1.16±0.02、0.17±0.02、0.70±0.02和0.43±0.03,TrkB蛋白表达水平分别为1.18±2.00×10^(-3)、0.35±3.00×10^(-3)、0.72±0.01和0.52±4.00×10^(-3),ERβ蛋白表达水平分别为1.22±2.00×10^(-3)、0.58±4.00×10^(-3)、0.80±0.01和0.64±4.00×10^(-3)。上述指标,模型组与正常组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05);雌二醇组和毛蕊花糖苷组与模型组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论 毛蕊花糖苷可促进皮质酮损伤的HT22细胞增殖,抑制细胞凋亡,具有一定的细胞保护作用,其机制与E2/ERβ/BDNF/TrkB信号通路有关。
- 芦芳张悦邱琦乔月薛慧胡晶徐红丹雷霞赵继会张宁
- 关键词：毛蕊花糖苷抑郁应激雌激素受体Β脑源性神经营养因子
- 柚皮素对Aβ_(25-35)损伤PC12细胞丝裂原激活蛋白激酶/细胞外信号调节蛋白激酶通路的调控效应研究被引量：4
- 2021年
- 目的探讨柚皮素对体外培养的Aβ_(25-35)损伤PC12细胞的保护作用及相关信号通路的调控机制。方法将生长至对数期的PC12细胞接种于培养瓶培养24 h,弃掉旧培养液后,随机分为空白组(培养液)、模型组(150μmol·L-1 Aβ_(25-35))、实验组-1(4×10-1 μmol·L-1柚皮素+150μmol·L-1 Aβ_(25-35))和实验组-2(10μmol·L-1 U0126+4×10-1 μmol·L-1柚皮素+150μmol·L-1 Aβ_(25-35)),使每组细胞浓度为20μmol·L-1(除空白组),给药24 h后,流式细胞术检测各组细胞凋亡率,蛋白免疫印迹法检测各组细胞B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关蛋白(Bax)、半胱氨酸天冬氨酸-3(Caspase-3)和磷酸化细胞外信号调节蛋白激酶(p-ERK1/2)的蛋白表达量。结果空白组、模型组、实验组-1、实验组-2的细胞总凋亡率分别为(4.13±0.55)%,(34.70±1.66)%,(11.26±0.77)%,(23.52±0.80)%;Bax蛋白表达量分别是0.24±0.06,0.76±0.03,0.21±0.02,0.68±0.04;Bcl-2蛋白表达量0.61±0.04,0.20±0.04,0.55±0.03,0.34±0.02;Caspase-3蛋白表达量0.13±0.03,0.40±0.03,0.21±0.04,0.31±0.02;p-ERK1/2蛋白表达量0.86±0.03,0.48±0.06,0.78±0.04,0.50±0.07。模型组与空白组、实验组与模型组和实验组-2与实验组-1比较,上述指标差异均有统计学意义(P<0.01)。结论柚皮素可通过丝裂原激活蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase, MAPK)/细胞外信号调节蛋白激酶(extracellular-signal regulated protein kinase, ERK)信号通路改变Bax、Caspase-3、Bcl-2和p-ERK1/2蛋白表达量,抑制细胞凋亡,对Aβ_(25-35)损伤的PC12细胞有保护作用。
- 刘爽张智博关雨佳张悦徐红丹刘国良雷霞雷霞
- 关键词：AΒ柚皮素PC12细胞凋亡因子
- 引火汤改善围绝经期抑郁症大鼠抑郁样行为的网络药理学研究
- 2023年
- 目的 基于入血成分分析联合网络药理学探讨引火汤(YHD)对围绝经期抑郁症(PMD)大鼠抑郁样行为的改善作用及机制。方法 用双侧卵巢摘除(OVX)联合慢性不可预知性温和刺激(CUMS)方法复制PMD模型。实验分为假手术组、模型组和YHD组。假手术组和模型组均灌胃给予等量0.9%NaCl,qd;YHD组灌胃给予4.05 g·kg^(-1 )YHD,qd。3组大鼠均连续给药3周。用强迫游泳实验观察YHD对PMD大鼠抑郁行为的影响,用苏木精-伊红染色和高尔基染色法观察YHD对PMD大鼠的神经保护作用。用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间串联质谱技术分析YHD入血成分,用基因名片数据库和网络可视化软件Cytoscape3.7.1对核心靶基因进行生物功能分析和京都基因与基因组百科全书通路富集分析,并用分子对接技术验证预测结果。结果 假手术组、模型组和YHD组的不动时间分别为(94.34±15.68)、(158.00±16.44)和(100.34±5.00)s。与假手术组比较,模型组的强迫游泳不动时间明显增加(P<0.01),海马神经元排列松散无序,有核固缩现象,树突棘密度减少;与模型组比较,YHD组的强迫游泳不动时间明显降低(P<0.01),海马神经元排列较为紧密,数量较多,形态正常,树突棘密度有明显增加。YHD含药血清成分分析共鉴定出12种原型入血成分,分子对接结果显示麦冬二氢高异黄酮E、甲基麦冬高异黄酮A、去氢土莫酸与主要靶点白蛋白、蛋白激酶B(Akt)1、胱天蛋白酶3能够最佳结合。结论 YHD可改善OVX+CUMS大鼠抑郁样行为,恢复海马神经元形态,增加树突棘密度,其机制可能是通过调控磷脂酰肌醇-3激酶-Akt信号通路和促分裂原活化蛋白激酶信号通路实现的。
- 吴东雪张悦张莉莉李月徐红丹刘国良薛慧赵继会胡晶张宁
- 关键词：引火汤入血成分
- 基于GC-MS的2型糖尿病血浆代谢组学研究被引量：1
- 2020年
- 目的应用代谢组学技术对2型糖尿病(T2DM)患者和健康人群进行对比研究,探讨T2DM的致病机制。方法采用气相色谱-质谱联用(GC-MS)结合多种多元统计分析方法对2018年6—7月黑龙江省佳木斯市中心医院肾内科收集的健康组(60名)、T2DM组(100例)的血浆样品进行分析。结果建立了基于GC-MS的T2DM血浆代谢组学分析方法,确定了血浆中L-丙氨酸、乳酸、L-缬氨酸等10种差异代谢物。结论基于代谢组学的GC-MS检测分析得出T2DM患者与健康组代谢模式有明显差异,与糖脂代谢、氨基酸代谢等代谢途径相关。
- 王佳娜薛傲张悦王岩姚远张宁刘斌
- 关键词：2型糖尿病血浆气相色谱-质谱联用代谢组学
- UPLC-MS/MS法研究柚皮苷在不同年龄大鼠体内的组织分布被引量：2
- 2021年
- 目的研究青年组和老年组SD大鼠灌胃柚皮苷后在体内组织分布的差异。方法 SD大鼠按100 mg/kg灌胃柚皮苷后分别于0、0.25、0.5、1.0、2.0、4.0、8.0、12.0、24.0 h收集大鼠心、肝、脾、肺、肾、脑、胃、子宫、卵巢和小肠组织,预处理后,采用超高效液相色谱质谱联用(UPLC-MS/MS)法测定各组织中柚皮苷的含量。结果青年组和老年组大鼠口服柚皮苷后,在所有组织中都有分布。在0.25 h时,与青年组比较,老年组柚皮苷在心、肝、脾、肺、肾、胃、卵巢、小肠组织中浓度显著低于其在青年组组织中浓度(P<0.05),其它时间点也存在差异。结论柚皮苷在不同年龄大鼠的组织分布不同,老年组组织分布发生了一定的变化,为柚皮苷的深度研究与利用提供实验依据。
- 张悦董蕊伊金月邢怀玉孙慧峰张宁雷霞
- 关键词：柚皮苷灌胃给药UPLC-MS/MS
- 柚皮苷对Aβ_(25-35)诱导PC12细胞保护作用的代谢组学研究被引量：2
- 2021年
- 目的基于气质联用代谢组学方法研究柚皮苷对Aβ_(25-35)诱导损伤的PC12细胞的保护作用机制。方法以Aβ_(25-35)干预PC12细胞,建立损伤模型。采用MTT法检测细胞增殖率,同时利用GC-MS技术检测空白组、模型组和给药组细胞内源性代谢物的差异,并分析其内在生物学意义。结果柚皮苷能够增加Aβ_(25-35)诱导的PC12细胞的增殖率。各组细胞内源性代谢物均发生了变化,包括甘氨酸、谷氨酸、α-酮戊二酸和胆固醇等27种代谢物(VIP>1,P<0.05),柚皮苷对其有调节作用。结论柚皮苷对Aβ_(25-35)诱导PC12细胞损伤有保护作用,可能是通过平衡氨基酸、能量、碳水化合物等物质的代谢来发挥。
- 张悦徐占玲孙慧峰雷霞刘国良姚远张宁刘斌
- 关键词：柚皮苷PC12细胞气质联用代谢组学
- 正交设计联用星点设计-效应面法优化染料木素胶束制备工艺被引量：11
- 2011年
- 目的:优化改良的自乳化溶剂挥发法制备染料木素MePEG-PLGA共聚物胶束的制备工艺。方法:先采用正交设计进行处方的初步筛选,确定主要影响因素。再采用星点设计-效应面法进一步优化处方,以染料木素在有机相中浓度、MePEG-PLGA在有机相中浓度、水相和油相体积比为考察因素,以包封率、载药量和平均粒径为考察指标,对结果进行多元线性回归及二项式拟合,经效应面法预测较佳工艺条件。结果:正交设计和星点设计-效应面法联用后得到的优化处方制备的样品包封率为84.43%,载药量为2.63%,平均粒径为63.7 nm。结论:正交设计联用星点设计-效应面法可以准确快速的优化染料木素MePEG-PLGA共聚物胶束的制备工艺,所建立的数学模型具有较好的预测能力。
- 何礼韩瑞伟唐晓飞张悦王丽丽郭欣阎雪莹
- 关键词：染料木素胶束正交设计星点设计-效应面法
- 补骨脂改善APP/PS1小鼠学习记忆能力的尿液代谢组学研究
- 2024年
- 运用尿液非靶代谢组学探究补骨脂改善APP/PS1小鼠学习记忆能力的作用机制。所有动物实验均经过黑龙江中医药大学动物伦理委员会批准(批准号:2020092502)。将16只3月龄雄性APP/PS1小鼠随机分为模型组和补骨脂组(0.5 g·kg^(-1)),另取8只同背景C57BL/6J小鼠作为空白组,以避暗实验和新物体识别实验为评价指标,通过超高效液相色谱-四级杆-飞行时间串联质谱(UPLC-Q-TOF-MS)测定各组小鼠尿液中内源性代谢物的变化,筛选差异代谢物,并进行代谢通路富集分析。实验结果显示,与模型组相比,补骨脂可明显减少APP/PS1小鼠的避暗潜伏期及错误次数(P<0.01),显著提高APP/PS1小鼠的新物体识别指数(P<0.01)。代谢组学分析鉴定出15个差异代谢物,补骨脂能显著回调9个差异代谢物。代谢通路分析显示,组氨酸代谢、柠檬酸循环、牛磺酸和次牛磺酸代谢和糖代谢途径是补骨脂发挥改善学习记忆能力作用的主要代谢途径。研究提示,补骨脂改善APP/PS1小鼠的学习记忆能力的机制可能与改善线粒体功能障碍、降低外周组胺水平、调节能量代谢紊乱及抗氧化水平等相关。
- 乔月薛傲张悦徐红丹李光赵继会胡晶张宁
- 关键词：补骨脂阿尔茨海默病代谢组学能量代谢
- 新北美圣草苷对Aβ_(25-35)诱导PC12细胞损伤的保护作用及机制研究被引量：3
- 2021年
- 目的研究新北美圣草苷对淀粉样β蛋白片段25-35(Aβ_(25-35))诱导PC12细胞损伤的保护作用,探讨其防治AD的作用机制。方法采用MTT法检测新北美圣草苷对正常PC12细胞及Aβ_(25-35)损伤PC12细胞增殖的影响,筛选新北美圣草苷溶液的干预浓度。将PC12细胞按随机数字表法分为空白组、模型组、雌二醇组和新北美圣草苷组。空白组与模型组以DMEM培养24 h;雌二醇组加入DMEM和1×10^(-3)μmol/L雌二醇溶液;北美圣草苷组加入DMEM和6×10^(4)μmol/L新北美圣草苷溶液,培养2 h后,除空白组外,其余各组加入20μmol/L的Aβ_(25-35)储备液,继续培养22 h。采用AnnexinV-FITC/PI双标记检测凋亡率,Western blot法检测雌激素受体β(estrogen receptorβ,ERβ)及p-P38/P38蛋白表达,检测PC12细胞上清中乙酰胆碱(acetylcholine,ACh)含量及胆碱乙酰转移酶(Choline acetyl transferase,ChAT)、乙酰胆碱酯酶(Acetylcholin esterase,AChE)活性。结果与模型组比较,新北美圣草苷组细胞凋亡率[(8.080±0.578)%比(18.500±0.870)%]降低(P<0.01),ERβ蛋白[(0.348±0.042)比(0.273±0.006)]表达升高(P<0.01),p-P38/P38蛋白[(0.372±0.058)比(0.571±0.063)]表达降低(P<0.01),ACh[(14.319±1.039)μg/mg比(9.157±1.605)μg/mg]水平及ChAT[(0.715±0.053)U/mg比(0.280±0.093)U/mg]活性增高(P<0.01),AChE[(2.607±2.048)U/mg比(6.038±1.867)U/mg]活性降低(P<0.01)。结论新北美圣草苷可促进Aβ_(25-35)损伤的PC12细胞增殖,抑制细胞凋亡,具有一定的细胞保护作用,其作用机制可能与调节ERβ表达,抑制P38蛋白磷酸化,提高胆碱能系统功能有关。
- 王岩顾婷刘国良李庆伟张悦张宁雷霞
- 关键词：乙酰胆碱雌激素受体ΒPC12细胞
