宋南
- 作品数:3 被引量:2H指数:1
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- 一种重组融合抗菌肽ClavE-HD5的原核表达被引量:1
- 2015年
- 根据海鞘Clavanins抗菌肽(ClavE)氨基酸序列和人HD5氨基酸序列,设计了一个融合的新抗菌肽ClavEHD5,通过PCR方法以大肠杆菌偏好密码子合成该融合重组肽的编码DNA,将该DNA克隆到大肠杆菌表达载体pET30α中,构建了ClavE-HD5的融合表达质粒。测序结果表明,克隆分子序列正确,可以表达1个12kDa的带标签融合蛋白。经转化大肠杆菌表达菌株E.coli Rosetta(DE3)后,以IPTG诱导并经Tricine-SDS-PAGE检测发现,凝胶中出现预期大小的多肽带,表明成功表达出重组的ClavE-HD5的融合抗菌肽。
- 许琪瑶李骞宋南陈金军张学文
- 关键词:CLAVE原核表达
- 人α防御素5在酿酒酵母中的分泌表达及其活性分析被引量:1
- 2017年
- 人α-防御素5(humanα-defensin 5,HD5)是人防御素α家族中发现的抑菌活性最高的多肽。为了探究HD5在酿酒酵母中分泌表达的可行性,首先利用PCR扩增获得酵母菌偏好的HD5核酸序列,构建酿酒酵母表达载体pVT102U/α-HD5,并将该重组质粒转入酿酒酵母S78中,通过营养缺陷筛选获得阳性转化菌株。然后,对重组菌进行发酵培养,取上清液纯化后通过tricine-SDS-PAGE和质谱检测表达产物。最后,利用琼脂扩散法检测表达的HD5的抑菌活性以及其对温度的耐受性,同时通过二倍稀释法检测表达的HD5对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌以及沙门氏杆菌的最小完全抑制浓度。结果显示:表达的HD5对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌以及沙门氏杆菌均具有明显的抑菌活性。发酵上清冻干粉对金黄色葡萄球菌完全抑制的最小浓度为10 mg/mL,对大肠杆菌和沙门氏杆菌完全抑制的最小浓度为40 mg/mL;且在不同温度处理下,表达的HD5对3种细菌仍具有一定的抑菌作用。上述结果表明具有高抑菌活性的HD5防御素在该重组系统中成功表达。
- 宋南邵婕刘子昊徐子龙许琪瑶张学文陈金军
- 关键词:防御素酿酒酵母表达纯化
- 罂粟科植物防御素的预测及生物信息学分析
- 2014年
- 在对博落回防御素研究的基础上,于NCBI数据库中系统搜索罂粟科所有已登录的EST序列文库,推测出31条新颖的罂粟科植物防御素。分析了这些防御素的相对分子质量、p I值、净电荷、疏水性平均值、蛋白结合能力、信号肽、亚细胞定位及其三级结构。
- 李骞许琪瑶宋南龙可人张学文陈金军
- 关键词:罂粟科防御素生物信息学分析