商鹏飞
- 作品数：2 被引量：15H指数：2
- 供职机构：河南农业大学牧医工程学院河南省家禽种质资源创新工程研究中心更多>>
- 发文基金：河南省科技攻关计划长江学者和创新团队发展计划教育部科学技术研究重点项目更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 鸡Visfatin蛋白的原核表达、纯化及其活性研究被引量：2
- 2016年
- 本试验旨在通过克隆Visfatin基因,将其在原核表达系统中表达并纯化,通过3T3-L1细胞的分化验证其活性,成功获得鸡重组Visfatin蛋白。以AA肉仔鸡肝组织总RNA为模板,qRT-PCR扩增Visfatin基因,转化进入pGEM？-T载体,再与原核表达载体pET-30a连接转化,获取含pET-30a-Visfatin重组质粒的E.coli BL21（DE3）表达菌株。以IPTG诱导重组菌株,优化表达条件,SDS-PAGE鉴定表达情况。采用镍离子亲和层析对Visfatin蛋白进行纯化,Western blot鉴定表达蛋白,并通过3T3-L1细胞的分化情况鉴定表达蛋白Visfatin的活性。结果,通过NcoⅠ、XhoⅠ酶切获得的结果与预期目的条带大小相符,成功构建pET-30a-Visfatin表达载体。SDSPAGE检测结果表明,在培养基pH为8.0,IPTG终浓度为0.4mmol·L-1,30℃条件下,诱导10～12h时可溶性蛋白表达量最大。通过镍离子层析纯化Visfatin蛋白,在SDS-PAGE的60ku处可见一条与预期一致的蛋白条带。Western blot证明纯化蛋白可与6＊His标签特异性结合。油红O染色结果表明,与对照组相比Visfatin诱导的3T3-L1细胞有更多的脂滴形成。qRT-PCR结果显示,在3T3-L1细胞分化过程中,Visfatin作用下标志基因PPARγ、aP2、FAS和C/EBPα的表达量显著增加（P〈0.05）。本研究成功建立了一套标准化的鸡Visfatin重组蛋白表达程序,获得了具有生物活性的鸡Visfatin,为其在家禽领域的进一步研究奠定了基础。
- 张盼盼商鹏飞田方圆韩瑞丽蒋瑞瑞孙桂荣康相涛刘小军田亚东
- 关键词：克隆原核表达3T3-L1
- 淅川乌骨鸡生长和产蛋曲线的数学模型分析被引量：13
- 2014年
- 随机选取浙川乌骨鸡健康母雏600只，测定0～18周龄体重和21～66周龄产蛋率，用Gompertz，Logistic，Bertalanffy3种生长曲线模型和伍德、杨宁、分室3种产蛋曲线模型分别拟合浙川乌骨鸡的生长曲线和产蛋曲线，并对拟合结果加以比较分析，结果表明，Gompertz模型能更好地拟合淅川乌骨鸡的生长曲线（R2=1.000），而杨宁模型最适合应用于淅川乌骨鸡的产蛋曲线拟合（R2=0.986）。
- 田亚东商鹏飞焦显芹康相涛
- 关键词：数学模型产蛋曲线
