陆伟
- 作品数：1 被引量：1H指数：1
- 供职机构：中国农业科学院特产研究所更多>>
- 发文基金：吉林市科技发展计划项目吉林省科技发展计划基金国家科技攻关计划更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 坏死梭杆菌白细胞毒素基因SH片段的克隆与表达被引量：1
- 2009年
- 坏死梭杆菌白细胞毒素是坏死杆菌病的主要致病因子,白细胞毒素基因(lkt)是其编码基因。以分离到的国内牛源坏死梭杆菌FN(A)菌株F4基因组DNA为模板,应用PCR方法扩增白细胞毒素基因SH片段,克隆至pMD18-T载体上,以BamHⅠ和HindⅢ酶切的目的片段SH与相应酶切的pET32a载体连接构建pET32a-SH重组表达质粒,经转化E coli BL21(DE3)后用IPTG进行蛋白诱导,SDS-PAGE检测重组蛋白表达情况。结果表明:扩增基因序列大小为1800bp,SDS-PAGE检测重组蛋白有效表达,表达得到大小为80.2kDa的目的蛋白,采用镍柱亲和层析方法纯化SH重组蛋白,获得了纯度达95%的重组蛋白;经West-ern-blot证实,该蛋白对抗坏死杆菌阳性血清具有反应活性。
- 赵利芳陈立志张秀华冯书章王克坚刘晓颖陆伟冯凯王秀东姚志利
- 关键词：坏死梭杆菌克隆
