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产气荚膜梭菌α毒素单抗阻断ELISA检测方法的建立: 赵蕾张艳郑晓星黄小丹李广兴

胆固醇对鸡传染性支气管炎病毒感染的影响: 染性支气管样病毒(IBV)感染可引起鸡的急性、高度接触性传染病,并引发鸡呼吸道、肾脏、输卵管、肠道及腺胃等多组织器官病变,对全球养禽业具有重大经济影响.胆固醇是维持细胞膜脂筏稳定结构的重要组分,对于某些包膜病毒,其感染过...; 赵蕾李广兴黄小丹陈慧杰郎跃深刘鹏王洪微; 关键词：胆固醇致病机制

胆固醇对鸡传染性支气管炎病毒感染鸡胚肾细胞的影响: 2017年; 胆固醇是维持细胞膜脂筏稳定结构重要组分。一些囊膜病毒感染过程依赖胆固醇。研究利用Real Time PCR和病毒滴度试验,分析细胞膜和病毒囊膜胆固醇是否影响鸡传染性支气管炎病毒(IBV)感染鸡胚肾(CEK)细胞。结果表明,胆固醇萃取剂甲基-β-环糊精去除细胞膜胆固醇后,可抑制IBV感染CEK细胞并呈剂量依赖性,补充外源性胆固醇后,IBV感染力部分恢复,说明IBV感染依赖细胞膜胆固醇;去除细胞膜胆固醇可影响IBV感染侵入和释放过程。去除病毒囊膜胆固醇对IBV感染力无显著影响。IBV感染CEK细胞时依赖细胞膜胆固醇,而非病毒囊膜胆固醇。; 李广兴赵蕾陈慧杰郎跃深刘鹏黄小丹王洪微任玉东张瑞莉; 关键词：胆固醇细胞膜传染性支气管炎

胆固醇对鸡传染性支气管炎病毒感染的影响: ＜正＞【研究目的】鸡传染性支气管样病毒（IBV）感染可引起鸡的急性、高度接触性传染病,并引发鸡呼吸道、肾脏、输卵管、肠道及腺胃等多组织器官病变,对全球养禽业具有重大经济影响。胆固醇是维持细胞膜脂筏稳定结构的重要组分,对于...; 赵蕾李广兴黄小丹陈慧杰郎跃深刘鹏王洪微

鸡传染性支气管炎病毒HH06株囊膜蛋白多克隆抗体制备及生物学功能检测被引量：3: 2016年; 采用RT-PCR方法扩增鸡传染性支气管炎病毒（infectious bronchitis virus,IBV）HH06株E基因全长,经抗原性和亲水性分析,将E基因部分序列（193~327bp）亚克隆于pET-32a（＋）和PVAX1载体中。将阳性重组质粒pET-32a-E1转化E.coli Rosetta（DE3）感受态细胞,诱导表达获得大小约为23ku的重组截短E1蛋白,Western blotting检测重组蛋白与IBV全病毒多克隆抗体能特异性反应。以纯化后的E1蛋白免疫新西兰白兔制备多克隆抗体,ELISA检测抗体效价达到220;Western blotting分析表明,E1多克隆抗体与重组表达蛋白具有良好的反应性;间接免疫荧光试验显示,多克隆抗体可检测到PVAX-E1转染Hela细胞表达的E1蛋白和感染鸡胚肾细胞（CEK）中的HH06株IBV,抗E蛋白多克隆抗体的制备为E蛋白功能的深入研究奠定了基础。; 白妍赵蕾杜威威潘龙黄小丹杨贵君李广兴; 关键词：囊膜蛋白多克隆抗体免疫印迹试验间接免疫荧光试验

产气荚膜梭菌α毒素单抗阻断ELISA检测方法的建立: <正>研究目的利用鼠抗产气荚膜梭菌(Clostridium perfringens,C.perfringens)plc蛋白单抗A10E5为阻断抗体,建立检测C.perfringensα毒素的阻断ELISA方法。材料方法以...; 赵蕾张艳郑晓星黄小丹李广兴; 文献传递

产气荚膜梭菌重组NetB毒素细胞毒性作用研究被引量：3: 2016年; 坏死性肠炎B样毒素(NetB)是新近发现的由产气荚膜梭菌产生与鸡坏死性肠炎发生密切相关的成孔毒素。本研究通过观察NetB毒素对HeLa细胞以及小鼠肠道的毒性损伤作用,进一步阐明该毒素在鸡坏死性肠炎发病过程中的作用。采用PCR方法扩增NetB毒素基因片段,构建重组表达质粒pGEX-NetB并转化E.coli BL21(DE3),经IPTG诱导表达获得重组NetB蛋白,纯化鉴定后用复性的蛋白质进行HeLa细胞毒性试验。结果如下:光镜观察可见,NetB蛋白作用2h后,部分细胞出现肿胀变圆,少数细胞破裂,细胞质外溢;12h后,细胞已无正常形态,细胞圆缩,细胞因坏死脱落溶解空隙增大,偶见病变细胞聚集成团;48h后,细胞坏死明显,只残存细胞溶解后的碎片。HE染色后观察可见病变细胞染色不均,细胞膜碎裂而不完整,细胞质外溢。电镜观察可见,病变细胞缺少完整的细胞膜结构,细胞质外溢,细胞核形状不规则,核膜膨出,核仁边集,亚细胞器也出现不同程度的病变,其中线粒体病变最为明显。通过对小鼠病理模型观察可见,接种NetB毒素小鼠发病迅速,腹部膨大,肠道臌气明显;组织学观察表明接种小鼠内脏器官出现不同程度的病理变化,以小肠最为明显,表现为肠黏膜损伤,绒毛断裂、脱落等。NetB毒素可引起HeLa细胞细胞膜损伤而呈现细胞毒性;小鼠体内试验NetB毒素可复制出NE典型病变,表明NetB毒素与NE的发病密切相关。; 王莹莹乔艺然赵蕾刘鹏任玉东李广兴黄小丹张瑞莉杨贵君; 关键词：产气荚膜梭菌细胞毒性试验

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赵蕾

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