许晶
- 作品数：4 被引量：0H指数：0
- 供职机构：辽宁医学院畜牧兽医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学航空宇航科学技术更多>>
- 利用免疫共沉淀验证肌纤维形成相关蛋白CFL2与MEF2C的相互作用
- 2015年
- 利用免疫共沉淀技术验证丝切蛋白(CFL2)和肌细胞增强因子-2(MEF2C)之间的相互作用关系。构建带绿色荧光蛋白(GFP)的p EGFP-N1-CFL2和p Lenti6.3_MCS_IRES2-EGFP-his-MEF2C重组载体,经双酶切鉴定正确后,分别将上述重组载体共转染至人宫颈癌细胞(Hela),利用免疫共沉淀方法验证CFL2和MEF2C之间的相互作用关系。结果表明,p EGFP-N1-CFL2和p Lenti6.3_MCS_IRES2-EGFPhis-MEF2C重组载体共转染Hela细胞,分别用抗CFL2和抗MEF2C抗体沉淀蛋白复合物,用MEF2C和CFL2抗体进行Western blot检测,检测到p Lenti6.3_MCS_IRES2-EGFP-his-MEF2C和p EGFP-N1-CFL2的表达。本试验成功构建p EGFP-N1-CFL2和p Lenti6.3_MCS_IRES2-EGFP-his-MEF2C真核表达重组载体,在Hela细胞中表达后利用免疫共沉淀的方法证实了CFL2和MEF2C之间存在相互作用。
- 许晶朱弘焱田玉民苏玉虹
- 关键词：相互作用免疫共沉淀
- 鼠skMLCK多肽抗体的制备与鉴定
- 备鼠骨骼肌肌球蛋白轻链激酶(Skeletal muscle myosin light chain kinase,skMLCK)多肽抗体,本研究根据NCBI GenBank中报道的skMLCK的一级结构信息,利用TMHMM...
- 许晶朱弘焱田玉民苏玉虹
- 关键词：多肽抗体效价测定
- 鼠skMLCK多肽抗体的制备与鉴定
- 2015年
- 为制备鼠骨骼肌肌球蛋白轻链激酶(sk MLCK)多肽抗体,根据NCBI Gen Bank中报道的sk MLCK的一级结构信息,利用TMHMM2.0和DNA Star软件分析此蛋白的跨膜结构域、二级结构、亲水性、疏水性等,以及综合分析考虑抗体设计的其他相关因素,设计出一段14个氨基酸的多肽。将合成后的多肽同牛血清白蛋白(BSA)进行偶联,将BSA偶联后的sk MLCK多肽免疫新西兰大白兔,3个月后采集血清,亲和纯化抗sk MLCK多肽抗体。ELISA法检测效价,Western blot和免疫荧光法检测抗体特异性。结果得到了高效价和高特异性的鼠sk MLCK多肽抗体,ELISA法测定其效价可达到1∶128 000,并可用于免疫荧光和Western blot的研究,为后续研究sk MLCK基因提供物质基础。
- 许晶朱弘焱田玉民苏玉虹
- 关键词：多肽抗体特异性
- 利用免疫共沉淀验证CFL2与MEF2C的相互作用
- 免疫共沉淀技术验证CFL2(丝切蛋白)和MEF2C(肌细胞增强因子-2)之间的相互作用关系.构建带绿色荧光蛋白的pEGFP-N1-CFL2和pLenti6.3_MCS_IRES2-EGFP-his-MEF2C重组载体,经...
- 许晶朱弘焱田玉民苏玉虹
- 关键词：丝切蛋白分子间相互作用免疫共沉淀
