聂旭东
- 作品数：2 被引量：13H指数：2
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- 超声预处理对麦胚蛋白结构的影响被引量：6
- 2017年
- 采用超声波对麦胚蛋白进行不同时间的预处理,并利用荧光、拉曼光谱分析溶液中蛋白的结构,红外光谱分析冻干后蛋白结构。结果显示,超声预处理会影响酶解法制备降血糖肽的活性,30min时活性最高。荧光光谱分析提示超声预处理能够引起麦胚蛋白中色氨酸残基由疏水区向亲水区转移,但蛋白结构未发生重大破坏。拉曼光谱分析超声预处理30min时对蛋白结构的影响最大,β-折叠含量降低最多。红外光谱分析显示蛋白结构随时间变化,在35 min时变化最大,α-螺旋含量显著降低,无规则卷曲含量显著升高。拉曼和红外光谱提供的信息比荧光丰富,拉曼光谱能够提供更准确的水溶液酶催化体系中的底物结构,对于蛋白的酶解反应更有指导意义。
- 颜辉张琦聂旭东朱胜虎余永建熊孟江明珠
- 关键词：超声预处理麦胚蛋白荧光光谱
- 麦胚降血糖肽的分离纯化及鉴定被引量：9
- 2018年
- 建立麦胚降血糖肽的分离纯化方法及鉴定活性多肽的结构组成。采用胰蛋白酶酶解麦胚蛋白,得到降血糖多肽,并进行降血糖动物实验。超滤获得高活性组分,离子交换吸附实验选择最佳的树脂,并对麦胚降血糖肽进行离子交换吸附分离,SephadexG-25和SephadexG-15分离,再经过反相高效液相色谱(reverse phase-high performance liquid chromatography,RP-HPLC)分离高活性成分。最后采用高效液相色谱-电喷雾-质谱(HPLC-electrospray ionization-massspectrometry,HPLC-ESI-MS)鉴定活性多肽的结构组成。结果显示酶解麦胚蛋白对α-葡萄糖苷酶的抑制性IC_(50)为10.98 mg/mL,能够缓解糖尿病小鼠的症状。超滤获得分子质量小于5 kDa的高活性组分,IC50为1.60 mg/mL。732型阳离子交换树脂的分离效果最好,2.5%氨水的洗脱率为98.13%,通过动态离子交换吸附分离后,活性显著提高,IC_(50)为0.30 mg/mL。通过SephadexG-25和SephadexG-15分离得到高活性组分,经RP-HPLC分离得到8个组分(峰),其中1号峰的活性和含量都最高,IC_(50)为0.098 mg/mL。HPLC-ESI-MS结果显示m/z 274.45的丰度比较高,经离子碎片拼接,共有7种多肽,其中二肽有1种,三肽有6种。本研究对于开发具有降血糖功效的新型功能性食品有一定的作用。
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- 关键词：麦胚Α-葡萄糖苷酶分离纯化动物实验
