王强
- 作品数：18 被引量：22H指数：2
- 供职机构：四川农业大学农学院更多>>
- 发文基金：四川省杰出青年科技基金国家自然科学基金中央级公益性科研院所基本科研业务费专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- HPLC法测定泽泻中3种成分的含量被引量：6
- 2015年
- 目的:建立HPLC法同时测定泽泻中环氧泽泻烯、24-乙酰泽泻醇A和23-乙酰泽泻醇B的含量。方法:色谱条件采用Diamonsil C18(2)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);以0.1%磷酸水溶液(A)和乙腈(B)为流动相进行梯度洗脱;检测波长210 nm;柱温30℃;流速1.0 m L/min;进样量20μL。结果:3种成分分离度良好。方法学考察结果表明该方法稳定性和重现性好,加样回收率均大于99%。结论:该方法操作简便、重复性好、分离效果好,可以作为泽泻的质量控制方法。
- 李丽霞王书林王强付羽萍
- 关键词：泽泻HPLC23-乙酰泽泻醇B
- 泽泻种质资源ISSR遗传多样性研究
- 2014年
- 目的建立泽泻ISSR分子标记的方法,对23份不同产地泽泻的遗传多样性和亲缘关系进行分析。方法采用ISSR分子标记技术和非加权平均距离法(UPGMA)对23份泽泻样品进行遗传多样性和聚类分析。结果从100条ISSR引物中筛选出35条多态性稳定、清晰的引物,在23份泽泻样品中扩增出172个稳定的扩增点,其中122个有多态性,多态位点百分率为70.5%。Nei's基因多样性(He)为0.4196,Shannon's信息指数为0.6081。结论 23个不同产地泽泻品种间多态性较高,但没有呈现明显的地域性差异。
- 李丽霞王书林傅竞也谌琴琴王强
- 关键词：泽泻ISSR
- 玉米细胞色素P450 99C体外生物转化紫杉醇的研究
- <正>紫杉醇及其衍生物多西紫杉醇是来源于天然产物的抗癌药物的代表,也是目前临床治疗非小细胞肺癌、卵巢癌、乳腺癌等的一线用药。人细胞色素P450是人体内代谢紫杉醇类药物的重要功能酶,可将紫杉醇转化为多种氧化产物。由于体内研...
- 田超王强高峰
- 文献传递
- 川泽泻鲨烯合酶基因的原核表达研究被引量：2
- 2016年
- 目的:构建川泽泻鲨烯合酶(squalene synthase,SS)基因的原核表达载体。方法:在建泽泻SS基因序列的基础上,采用RT-PCR技术,从川泽泻新鲜叶片中克隆得到SS基因,并在BL21(DE3)细胞中分别用不同的表达载体、IPTG浓度、温度诱导该蛋白表达。结果:该基因在大肠杆菌中表达,但为包涵体,将其克隆到带有GST标签的pGEX-6t-1载体中进行原核表达并未改善蛋白溶解性;30℃诱导蛋白表达最佳;不同IPTG浓度对蛋白表达影响不大。结论:川泽泻的原核表达为后续对该基因的生物学功能及川泽泻品质改良奠定了基础。
- 李丽霞付羽萍谌琴琴王强
- 关键词：原核表达泽泻醇
- 病毒诱导基因沉默鉴定穿心莲内酯生物合成关键酶ApCPS功能被引量：2
- 2016年
- 该研究采用病毒诱导基因沉默技术(VIGS),以生长到第8片真叶期的穿心莲植株为实验材料,沉默参与穿心莲内酯生物合成的ent-柯巴基焦磷酸合酶基因(ApCPS),用半定量和荧光定量PCR检测病毒诱导沉默后ApCPS及其上游基因的表达,用HPLC法检测ApCPS沉默后穿心莲内酯的积累变化,同时检测茉莉酸甲酯(MeJA)处理后ApCPS及上游基因的表达,以全面分析穿心莲内酯代谢以及ApCPS在穿心莲内酯生物合成中的作用机制,验证其在植物体内的功能。结果显示:(1)ApCPS基因被成功沉默,基因表达显著下调,进而引起上游牻牛儿基牻牛儿基焦磷酸合成酶基因(GGPS)的表达下调,而3-羟-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶基因(HMGR)和1-脱氧木酮糖-5-磷酸合成酶基因(DXS)的表达未受影响。(2)ApCPS基因沉默15d后穿心莲内酯积累量显著下降,表明ApCPS是穿心莲内酯生物合成关键酶基因,且能够负反馈影响上游基因表达。(3)茉莉酸甲酯(MeJA)显著诱导ApCPS及上游基因HMGR、DXS和GGPS的表达,表明穿心莲内酯生物合成基因受到MeJA的广泛调控。该研究首次使用VIGS证明ApCPS参与到穿心莲内酯生物合成,为利用该技术鉴定穿心莲内酯生物合成途径中其他基因功能奠定了基础。
- 谌琴琴刘琴李聪聪付羽萍王强
- 关键词：VIGS穿心莲内酯生物合成
- 马铃薯蔗糖磷酸合成酶StSPS1的原核表达及抗体制备
- 2023年
- 为了对马铃薯蔗糖磷酸合成酶(SPS)编码蛋白StSPS1进行原核表达及多克隆抗体制备。从四倍体马铃薯品种川芋10号的块茎中克隆出了StSPS1基因,该基因编码区全长为3165 bp,编码蛋白的长度为1055 aa。随后基于构建的His标签融合表达载体PET30a-StSPS1,进行了StSPS1蛋白的诱导、变性、纯化、复性及兔免疫试验。结果发现,StSPS1蛋白分子量约为119.62 ku,在可溶性上清中的表达极少,主要在不溶的沉淀中表达,最佳的诱导条件为37℃下用0.5或1.0 mmol/L的IPTG诱导4 h。由于StSPS1为包涵体蛋白,故对其进行包涵体变性处理,并利用His标签纯化出了与目的条带大小相符的蛋白,同时通过His抗体进行了蛋白质免疫印迹(WB)试验,发现在119.62 ku处检测到目标条带,说明StSPS1包涵体蛋白纯化成功。最后,通过将透析复性后的StSPS1蛋白注射进兔子皮下组织中,成功免疫出2个StSPS1的抗体,经过WB鉴定发现2个抗体均能在抗原和川芋10号叶片的总蛋白中杂出目标条带。综上,对马铃薯StSPS1蛋白进行了诱导及纯化,并成功制备了StSPS1蛋白的兔多克隆抗体。
- 蔡诚诚蔡诚诚温和刘石锋王强李立芹王强
- 关键词：马铃薯蔗糖磷酸合成酶原核表达多克隆抗体制备
- 玉米转录因子ZmNAC59调控植物抗盐性
- 2024年
- 【目的】NAC转录因子家族是植物中研究较多的一类转录因子,在调控植物生长发育和响应非生物胁迫过程中起重要作用。玉米是三大粮食作物之一,其生长过程常会面临各种逆境胁迫,盐害被认为是限制作物生长和生产的主要环境因素之一。因此鉴定玉米抗盐基因,解析其抗盐机制对培育玉米抗逆品种具有重要意义。【方法】研究克隆了玉米转录因子ZmNAC59,并用生物信息学手段分析其保守结构域和系统进化关系,用实时荧光定量PCR方法分析该基因在NaCl和MeJA处理下的表达模式,并用稳定转基因体系将该基因异源表达拟南芥观察表型,同时还用病毒诱导沉默技术将该基因在玉米中沉默后进行盐处理表型观察,并进行酶活性检测。【结果】ZmNAC59能够被NaCl和MeJA诱导上调。病毒诱导沉默ZmNAC59后进行盐胁迫,沉默株系对盐胁迫更敏感,ROS积累更多;而ZmNAC59过表达拟南芥后,过表达株系在盐胁迫处理下存活率更高,活性氧积累更少,Na^(+)/K^(+)比率低,表明ZmNAC59作为盐胁迫中的正调控因子可以通过调节离子流动提高植物抗盐性。实时荧光定量PCR结果表明拟南芥过表达株系中Na^(+)、K^(+)转运相关的基因显著上调;在玉米原生质体中瞬时过表达ZmNAC59后进行盐处理发现ZmSOS1、ZmNHX1和ZmNHX7的表达显著上调,Dual-LUC实验表明ZmSOS1是Zm-NAC59的靶基因。【结论】研究表明ZmNAC59通过激活ZmSOS1启动子的活性调控其表达而促进盐胁迫下的离子转运,从而提高植物抗盐性,为玉米抗逆基因资源的筛选和品种培育提供了科学理论依据。
- 张宇涵李星霖刘丽君傅竞也王强
- 关键词：玉米转录因子盐胁迫离子转运
- 不同海拔灰兜巴药材中挥发油成分的研究
- 2017年
- 目的比较分析不同海拔灰兜巴中挥发油的化学成分。方法用正己烷萃取法提取挥发油,采用气相色谱-质谱联用法(GC-MS)和NIST分析挥发油中的成分,并采用峰面积归一化法计算各成分的相对百分含量。结果从高海拔样品的挥发油中鉴定出了133个化合物,占挥发油总量的88.6%;低海拔样品的挥发油中鉴定出了103个化合物,占挥发油总量的87.3%;两种样品中含有40种共同的化学成分。结论灰兜巴挥发油中鉴定出烃类、醇类、醛类、酮类、酸类、酯类、含氮化合物等成分;不同海拔灰兜巴样品的挥发油构成有一定的差异。
- 李丽霞付婷婷王强殷中琼
- 关键词：灰兜巴GC-MSNIST海拔挥发油
- 玉米萜类植保素代谢关键基因对小斑病侵染的防御响应分析被引量：6
- 2015年
- 该研究选用小斑病差异抗性的玉米自交系Mo17(较抗)、‘郑58’(中抗)和‘吉419’(感),分别于接种小斑病病原菌玉蜀黍平脐孺胞(Cochliobolus heterostrophus)0、6、12、24、36和48h时采集接种叶片为材料,采用半定量和实时荧光定量PCR技术,检测倍半萜植保素Zealexin生物合成关键基因(TPS6、TPS11)、二萜植保素Kauralexin代谢关键基因An2以及茉莉酸合成关键基因AOC的表达模式,为阐明不同抗性品种对玉米小斑病的差异防御机制提供理论依据。结果显示:接种小斑病病原菌后,抗病自交系Mo17中TPS6、TPS11基因表达诱导不显著,An2基因表达迅速增加,AOC基因于接种12h后表达明显上调。‘郑58’中TPS6、TPS11基因被快速诱导,在接种24h时表达量达到最大,An2基因表达逐渐增加但差异不显著,AOC基因表达量于接种6h后显著增加;感病自交系‘吉419’中TPS6、TPS11、An2基因在接种24h后才显著上调,明显比抗性自交系缓慢,AOC基因表达先呈现递减的趋势然后上升,在24h表达量最高并持续到48h。研究表明,两类植保素代谢在玉米小斑病防御中具有不同的时间应答模式,但都受到茉莉酸介导。感病自交系中植保素代谢防御响应较慢,而抗病自交系中响应较快,符合其抗性差异。
- 李珂马良杜鹏飞王强
- 关键词：玉米关键基因小斑病
- 四川马铃薯产业关键技术创新与推广——四川农业大学马铃薯研究团队成果简介
- 2022年
- 四川是我国马铃薯种植大省,全省马铃薯种植面积与总产量均居全国前列.四川地形地貌复杂多样,有成都平原,盆周丘陵、山区,也有凉山、甘孜、阿坝三州高寒牧区,在不同季风环流的交替影响下,四川形成了独特的立体气候.优越的自然条件使四川一年四季均可种植马铃薯,经过多年的发展,四川目前已经形成了盆周山区春作兼用型马铃薯、川西南春作加工型马铃薯和平丘地区秋冬作菜用型马铃薯三大各具特色和优势的集中产区[1].
- 王强严奉君余丽萍李立芹郑顺林王西瑶
- 关键词：立体气候马铃薯种植高寒牧区兼用型川西南成都平原
