目的:探讨生精上皮不同生精细胞在热激中凋亡的敏感性及其相关机制。方法:36只60d龄雄性Wistar大鼠随机分为睾丸22℃水浴的正常组和43℃水浴10min后0.5h、2h、6h、24h、48h组。HE染色观察形态变化、TUNEL检测观察生精细胞凋亡变化;运用Real time PCR定量热休克蛋白70(Hsp70)、Hsp90、Bax、Bcl-2m RNA变化。结果 :HE染色发现,随着热激后时间延长,曲细精管管腔松散,细胞间隙扩大,精母细胞和圆形精子细胞逐渐缺失。TUNEL检测表明,精母细胞和圆形精子细胞先后凋亡。热激后Hsp70 m RNA和Hsp 105m RNA的表达趋势一致,迅速上调,在2h时达到最高,与正常组差异显著(P<0.05),随后恢复正常;Hsp90m RNA表达下调,与正常组相比,热激后各时间组均有显著性差异(P<0.05)。Bcl-2/Bax降低,正常组与热激后各时间组之间均有显著性差异(均P<0.05)。结论:43℃热激睾丸10min不能导致曲细精管发生明显形态改变。精母细胞和圆形精子细胞对热激最敏感,热激后首先出现凋亡。其机制可能与Hsp70、Hsp105 m RNA上调,Hsp90 m RNA下调,最终促使Bcl-2/Bax m RNA下调有关。
目的:观察和分析大鼠睾丸局部短暂热应激对HSP70、HSP90、HSP105 mRNA表达的影响。方法:Wistar雄性大鼠随机分为5组:正常对照(N)组、热应激0天(H0)组、热应激5天(H5)组、热应激10天(H10)组、热应激15天(H15)组。N组睾丸局部22℃水浴20 min,其余各组均睾丸局部43℃水浴20 min。采用HE染色观察组织形态学变化,采用Real Time PCR的方法检测HSP70、HSP90、HSP105 mRNA的表达量。结果:HE染色镜下观察结果显示:与N组相比,H5组部分曲细精管萎缩,生精细胞明显消失,H10组、H15组大部分曲细精管萎缩,生精细胞大量消失。HE染色形态计量结果显示:与N组相比,H5组、H10组、H15组睾丸实质体积比明显减小(p<0.05),睾丸间质体积比明显增加(P<0.05)。RT-PCR结果显示:与N组相比,H0组HSP70 m RNA的表达H0组明显增高(p<0.05),H5组、H10组、H15组HSP90 m RNA的表达明显降低(P<0.05),H5组HSP105 m RNA的表达明显降低(P<0.05)。结论:HSP70、HSP90、HSP105 m RNA的表达在热应激后都会发生变化,变化的具体情况不尽相同,推测它们热应激后在生殖细胞凋亡过程中发挥不同的作用有关,并且和组织的损伤有密切的联系。
