周畅
- 作品数：8 被引量：7H指数：2
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 一种SARS-CoV-2S蛋白IgM的间接ELISA检测方法
- 一种SARS‑CoV‑2S蛋白IgM的间接ELISA检测方法，包括下列步骤：将采用ELISA包被液稀释的新冠病毒刺突蛋白加入酶标板，每孔100μL，4℃过夜，PBST缓冲液清洗；加250μL 5%的脱脂奶粉溶液进行封闭，...
- 柳燕任翠平周畅瞿明胜
- 文献传递
- 一种SARS-CoV-2N蛋白IgA的间接ELISA检测方法
- 一种SARS‑CoV‑2 N蛋白IgA的间接ELISA检测方法，包括（1）包板、（2）封闭、（3）一抗孵育、（4）二抗孵育、（5）弃去酶标二抗，TMB单组分显色液100μl/孔，37℃避光显色5 min，每孔加入ELIS...
- 柳燕任翠平周畅瞿明胜
- 文献传递
- 肺炎支原体P116基因FP2片段的免疫优势和细胞黏附活性被引量：2
- 2021年
- 目的通过对肺炎支原体P116基因FP2段的453 bp片段进行了克隆表达,探讨肺炎支原体P116蛋白对A549细胞的黏附性。方法肺炎支原体感染者血清和肺炎支原体抗体用Western blot和ELISA检测纯化的P116蛋白片段的免疫原性及效价。P116-FP2多克隆抗体和A549细胞黏附试验用免疫荧光评价肺炎支原体的黏附、黏附抑制。结果 P116-FP2蛋白具有免疫原性,用该蛋白构建的ELISA方法具有较高的敏感性和特异性。制备的P116-FP2抗体可阻断肺炎支原体黏附A549细胞。随着多克隆抗体效价的增加,肺炎支原体对A549细胞的黏附率明显降低。结论初步证明P116-FP2蛋白具有免疫反应性。P116-FP2多克隆抗体能够抑制肺炎支原体对A549细胞的黏附。
- 林康文志周畅李文丽吴焕武刘丹艳朱玉林王林定
- 关键词：肺炎支原体A549细胞多克隆抗体
- 一种SARS-CoV-2S蛋白IgG的间接ELISA检测方法
- 一种SARS‑CoV‑2S蛋白IgG的间接ELISA检测方法，包括下列步骤：将采用ELISA包被液稀释的新冠病毒刺突蛋白加入酶标板，每孔100μL，4℃过夜，PBST缓冲液清洗；加250μL 5%的脱脂奶粉溶液进行封闭，...
- 柳燕任翠平周畅瞿明胜
- 文献传递
- 甘肃省敦煌地区普通人群卡波肉瘤相关疱疹病毒感染的血清学分析被引量：5
- 2017年
- 目的研究卡波肉瘤相关疱疹病毒(KSHV)在甘肃敦煌地区普通人群中的血清阳性率,并分析KSHV感染的危险因素。方法随机收集1 000例敦煌地区普通人群血清,以KSHV 3个基因片段orf65、orf73、orf k8.1编码蛋白为抗原,间接ELISA检测样本中KSHV抗体,SPSS软件分析危险因素。结果 1 000份血清中,KSHV抗体总阳性率为19%,男性阳性率(22.9%)高于女性(16.6%)(P=0.016);KSHV感染与梅毒螺旋体(P=0.004)和丙肝病毒(P=0.027)感染间有相关性,而与年龄、乙肝五项无关。多因素Logistic回归分析显示梅毒螺旋体感染的OR(95%CI)为10.142(1.920~53.577)。结论甘肃敦煌地区普通人群中KSHV的感染率较高,且与性别有关;梅毒螺旋体感染是该地区KSHV感染最重要的独立危险因素。
- 方圆许常青周畅陈伟王林定
- 关键词：血清阳性率
- KSHV K15P对内皮细胞与平滑肌细胞增殖和迁移的影响及其SOCE的研究
- 目的研究卡波氏肉瘤相关疱疹病毒(KSHV)K15P蛋白对参与血管组成的内皮细胞、平滑肌细胞增殖迁移的作用，以及这些作用同钙库操控钙内流(SOCE)之间的相互关系。进一步深入了解K15P蛋白促进细胞增殖和迁移的分子机制。 ...
- 周畅
- 关键词：内皮细胞平滑肌细胞
- 安徽北部地区恶性肿瘤人群卡波氏肉瘤相关疱疹病毒血清学分析
- 2021年
- 卡波氏肉瘤相关疱疹病毒是一种新发现的γ疱疹病毒(Kaposi’s sarcoma-associated herpesvirus,KSHV)。在中国新疆,KSHV感染率比较高,KSHV在免疫缺陷患者和静脉吸毒者中感染率也比在普通人群中高。为了进一步研究KSHV在安徽北部地区恶性肿瘤人群中的感染率和高风险因素,初步探讨KSHV与肿瘤的发生之间相关性,研究KSHV的高发人群特点,本研究选用KSHV病毒重组蛋白ORF65、ORF 73和K8.1为抗原,利用酶联免疫吸附实验(ELISA)对500份恶性肿瘤患者血清样本及200份健康体检人群血清样本进行KSHV抗体检测,分析KSHV的感染率及危险因素。结果显示500例肿瘤患者KSHV阳性总数170例,总阳性率为34%,200份健康人群KSHV阳性总数22例,总阳性率为11%,肿瘤人群KSHV阳性率明显高于健康人群(P<0.001)。其中肺癌、肝癌、结肠癌、宫颈癌、乳腺癌样本KSHV阳性率分别为36.4%,34.1%,41.7%,28.6%,30.3%,此5组肿瘤组KSHV阳性率也分别高于健康人群,都具有统计学意义(P<0.001)。但5组肿瘤样本之间KSHV阳性率无明显差异(P>0.05),且各组肿瘤样本分别与性别、乙肝五项、丙肝之间无统计学意义(P>0.05)。本研究结果提示安徽北部地区恶性肿瘤患者KSHV抗体阳性率显著高于中国普通人群总体KSHV抗体阳性率,证明KSHV在恶性肿瘤人群中呈现较高比例的分布。
- 张莹方圆文志林康李文丽周畅柳燕王林定
- 关键词：血清阳性率恶性肿瘤
- KSHV K15P及其突变体的慢病毒包装与稳定细胞株的筛选及其对内皮细胞增殖迁移的影响被引量：1
- 2019年
- 目的包装包含卡波肉瘤相关疱疹病毒(KSHV)K15P及其突变体K15P(YF)基因的慢病毒颗粒,并对此基因在EA.hy926细胞内稳定表达进行研究。方法通过PCR方法扩增获得KSHV K15P、K15P(YF)基因片段,使用限制性内切酶Not I与BamH I酶切和TA克隆法构建T载体与慢病毒表达载体pHAGE-CMV-MCS-K15P-Puro、pHAGE-CMV-MCS-K15P(YF)-Puro,通过lip2000将构建好的慢病毒表达载体与两种辅助包装质粒PSPAX2和pMD2.g共转染HEK 293T细胞,48 h后收集慢病毒。慢病毒感染EA.hy926细胞并通过嘌呤霉素筛选稳定表达株,Western blot检测K15P与K15P(YF)蛋白的表达。Transwell与CCK8实验检测K15P对内皮细胞的增殖迁移影响。结果成功构建慢病毒表达载体,筛选出稳定表达K15P、K15P(YF)蛋白的EA.hy926细胞。在EA.hy926细胞Transwell迁移实验中,与空载体组和K15P突变体组(0.98±0.23)比较,K15P组(2.25±0.15)的EA.hy926细胞的迁移能力明显增强(P<0.01),三组细胞迁移量差异有统计学意义(F=113.5,P<0.01);CCK8增殖活性实验中,与空载体组和K15P(YF)组(109.23±12.58)比较,K15P组(138.69±7.47)的EA.hy926细胞的增殖能力明显增强(P<0.01),三组细胞增殖活性差异有统计学意义(F=40.78,P<0.01)。结论K15P蛋白增强了内皮细胞的增殖与迁移,而K15P(YF)突变体的促进细胞增殖迁移能力减弱,提示K15P蛋白可能在KS的发生发展中参与重要作用。
- 周畅许常青许方玮方圆陈伟文志林康王林定
- 关键词：慢病毒
