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亲和双水相胶束系统的相行为及其应用: 2018年; 在疏水改性聚氧乙烯(HM-EO)形成的一元双水相胶束系统(ATPMS)中引入带亲和配基的小分子表面活性剂Triton X-114-IDA-Cu(Ⅱ),构成亲和作用主导的二元ATPMS.考察了温度、pH、盐浓度及种类对新系统液液相平衡的影响,并将该系统用于模型蛋白3',5'-二磷酸核苷酸酶(YND)的萃取.结果表明:Triton X-114-IDA-Cu(Ⅱ)与HM-EO形成的混合胶束簇集体在较低温度(4℃)下即可自发分相;温度升高可以增大系统两相区域;降低体系pH有利于系统分相;添加无机盐促使混合胶束网络的形成及相分离更加容易,阳离子影响次序为:K^+>Na^+,阴离子为:SO_4^(2-)>Cl^->Br^->I^-.最后,通过对YND的萃取分离,YND被成功萃取进入胶束富集相,证明了亲和ATPMS在富组氨酸蛋白分离中的可行性,为该体系在分离工艺中的应用提供相应的基础依据.; 刘耀周鑫鑫邓刚; 关键词：相平衡

新型亲和双水相成相剂Triton X-100-IDA-Cu(Ⅱ)的制备被引量：1: 2015年; 以小分子表面活性剂Triton X-100为载体,采用环氧氯丙烷(ECH)活化法偶联亚氨基二乙酸(IDA),通过配位反应螯合Cu(Ⅱ),合成了一种新型亲和双水相成相剂Triton X-100-IDA-Cu(Ⅱ),并对其合成条件进行了优化.结果表明:最佳活化工艺为n(ECH)∶n(Triton X-100)=2∶1,n(BF_3)∶n(Triton X-100)=1∶25,冰浴反应22 h,按n(NaOH)∶n(Triton X-100)=1∶1加入Na OH,环氧化反应3 h,环氧产物得率达到72.4%;最佳偶联工艺为pH 13条件下,加入等摩尔的IDA,55℃反应21 h,IDA的偶联率为76.3%;最佳螯合工艺为在0.05 mol/L醋酸钠溶液中,n(CuSO+4)∶n(Triton X-100-IDA)=1∶1,室温反应6 h,Cu(Ⅱ)的螯合率可达80.5%.通过测定Triton X-100-IDA-Cu(Ⅱ)与阳离子型疏水改性聚氧乙烯(HM-EO)所构成的双水相系统的相图,知两者可形成带亲和配基的稳定双水相系统.; 彭帅邓刚刘耀王怡梅; 关键词：TRITONX-100 双水相系统

3',5'-二磷酸核苷酸酶在亲和双水相胶束系统中分配行为研究: 2017年; 以高分子表面活性剂HM-EO为主成相剂,金属螯合表面活性剂Triton X-114-IDA-Cu(Ⅱ)(TX-Cu(Ⅱ))为辅成相剂,构建新型亲和双水相胶束系统(ATPMS)以提高目标产物的萃取选择性,并考察重组蛋白3',5'-二磷酸核苷酸酶(YND)在系统中分配行为。结果表明,系统中不含亲和配基时YND主要分配于胶束缺失相;随着亲和配基含量的增加,YND与TX-Cu(Ⅱ)亲和结合而逐渐分配到胶束富集相并且在系统中显示出优异的稳定性;调节溶液p H能够影响YND亲和分配,最适萃取条件为pH 9.0;增大无机盐浓度,导致更多杂蛋白分配到胶束缺失相,然而对YND分配影响较小。在2.5%HM-EO、0.125%TX-Cu(Ⅱ)、p H 9.0、50 mmol/L Na Cl条件下,实验获得65.8%的酶活回收率。因此亲和ATPMS可以有效用于对富组氨酸蛋白YND的分离纯化,为该体系在重组蛋白的分离纯化试验提供相应的基础依据。; 刘耀周鑫鑫邓刚

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刘耀