刘国刚
- 作品数：3 被引量：1H指数：1
- 供职机构：山西农业大学动物科技学院更多>>
- 发文基金：山西省科技攻关计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 一例肉鸡大肠杆菌病的诊治报告被引量：1
- 2008年
- 2008年3月下旬,天津市东丽区中营某养殖场发生一起疑似肉鸡大肠杆菌病,经送检、临床诊断和实验室检验诊断为肉鸡大肠杆菌病。对分离纯化的大肠杆菌进行阿米卡星、头孢氨苄、新霉素等药物的敏感性试验,用筛选出的阿米卡星和庆大霉素两种高敏药物给鸡群服药,经5d治疗后鸡群恢复正常。
- 刘国刚郭立力宁官保
- 关键词：肉鸡大肠杆菌药物敏感性试验
- 致猪水肿病大肠杆菌标准菌株F107/86 fedA基因的克隆与原核表达
- 2012年
- 以致猪水肿病大肠杆菌标准菌株F107/86的基因组DNA为模板,对去掉信号肽的456bp的fe-dA基因进行了PCR扩增,将其克隆到原核表达载体pGEX-6P-1的BamHⅠ与EcoRⅠ位点之间,经酶切鉴定与测序,在大肠杆菌中以IPTG诱导表达,并对表达产物用SDS-PAGE和Western-blot分析进行验证。结果表明,筛选出的阳性质粒pGEX-fedA-2(pfedA)经测序并与GenBank中收录的M61713序列进行比较,证明插入序列及读码框正确;表达产物GST-FedA经SDS-PAGE分析大小约42.4ku,Western-blot分析证实其具有良好的反应原性。所构建的原核表达载体可大量表达抗原蛋白,为进一步研究猪水肿病亚单位疫苗奠定了基础。
- 宁官保田文霞刘国刚李宏全马海利高荣琨
- 关键词：水肿病克隆原核表达
- 致猪水肿病大肠杆菌标准菌株F107/86SLT-ⅡeA基因的克隆与表达
- 2012年
- 为了克隆与表达致猪水肿病大肠杆菌标准菌株F107/86类志贺毒素Ⅱ型变异体A亚单位(SLT-ⅡeA)基因,试验以F107/86为模板,PCR扩增去掉信号肽的935 bp的SLT-ⅡeA亚单位基因,将其克隆到原核表达载体pGEX-6p-1的EcoRⅠ与SalⅠ位点之间并测序,在大肠杆菌中经IPTG诱导表达,并对表达产物进行SDS-PAGE和Western-blot分析。结果表明:对筛选出的阳性重组质粒pGEX-SLT-ⅡeA-4测序并与GenBank登录的M36727序列比较,证明插入序列及读码框正确;表达产物GST-SLT-ⅡeA经SDS-PAGE分析其大小为58.3 ku;Western-blot检测证实表达产物具有良好的免疫原性。说明试验所构建的原核表达载体可大量表达抗原蛋白。
- 宁官保田文霞刘国刚李宏全马海利高荣琨
- 关键词：猪水肿病克隆原核表达
