胡良鹤
- 作品数:4 被引量:15H指数:2
- 供职机构:铜陵市人民医院更多>>
- 发文基金:安徽省高校省级自然科学研究项目博士科研启动基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 人乙酰肝素酶基因启动子驱动的真核细胞表达载体构建、鉴定及功能分析被引量:2
- 2010年
- 目的构建人乙酰肝素酶(HPSE)基因启动子驱动的肿瘤细胞特异性表达载体,并分析其活性。方法PCR扩增人类基因组DNA HPSE启动子核心片段,并测序鉴定和分析转录因子结合位点(TFBS)。双酶切插入pEGFP-1的多克隆位点,构建肿瘤细胞表达载体pEGFP-Hp。将经酶切和测序鉴定的重组质粒pEGFP-Hp及质粒pEGFP-1(阴性对照)和pEGFP-N1(阳性对照)分别转染正常人脐静脉内皮细胞(ECV)和不同的肿瘤细胞(肝癌细胞HepG2、喉癌上皮细胞Hep2和慢性白血病K562细胞)。荧光显微镜观察和流式细胞术分析其促转录活性。结果扩增的HPSE启动子核心片段长度为561 bp,序列分析与GenBank收录一致,含有3个SP1、4个Ets相关元件、2个早期生长反应基因-1及E47、N-myc和NGFI-p300等TFBS各1个。重组质粒pEGFP-Hp经酶切和测序鉴定与预期结果一致。荧光显微镜观察显示,转染pEGFP-1细胞中均无荧光表达;转染pEGFP-N1细胞均有强荧光表达;转染pEGFP-Hp质粒的ECV几乎无荧光表达,HepG2和Hep2细胞有较强荧光,K562细胞仅有较弱荧光。流式细胞术检测表明,pEGFP-Hp在ECV、HepG2、Hep2和K562细胞的平均转染率分别为3.9%、21.3%、10.8%和6.5%,pEGFP-N1转染率分别为17.1%、24.0%、14.0%和11.0%,二者比值均小于1。结论成功构建了由HPSE核心启动子驱动的真核细胞表达载体,该载体可在肿瘤细胞特异性表达,但其活性需进一步加强。
- 陈晓鹏胡良鹤王永
- 关键词:乙酰肝素酶启动子基因治疗
- 左侧后入路腹腔镜下胃癌根治术治疗老年胃癌的疗效被引量:10
- 2021年
- 目的分析左侧后入路腹腔镜下胃癌根治术治疗老年胃癌的疗效及其对患者生存的影响。方法回顾分析2017年1月至2019年12月完成左侧后入路腹腔镜下胃癌根治术治疗和随访的60例老年胃癌患者临床资料为观察组,同期完成开放手术和随访的45例老年胃癌患者临床资料为对照组。比较两组手术相关指标和疗效性指标,术后完成2年随访,统计两组生存率与生存时间,比较两组并发症发生情况。结果观察组手术时间长于对照组,切口长度短于对照组,术中出血量少于对照组,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01);两组淋巴结清扫数目差异无统计学意义(P>0.05);观察组术后肛门排气时间、进食时间短于对照组,差异有统计学意义(P<0.01);随访结束,两组生存率、生存时间差异无统计学意义(P>0.05);观察组并发症发生率低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论左侧后入路腹腔镜下胃癌根治术治疗老年胃癌是可行的,在不减少患者淋巴结清扫数目、生存率、生存时间的前提下,可缩短切口长度,减少术中出血量与术后并发症发生,加快术后恢复。
- 胡良鹤束宽山王贵和
- 关键词:胃癌
- 腹腔镜下成人腹股沟疝修补术的近期疗效分析被引量:3
- 2015年
- 目的:探讨成人腹腔镜疝修补术的短期效果。方法:回顾分析126例在我院手术治疗的腹股沟疝病人,一组行腹腔镜疝修补术,另一组行无张力疝修补术,比较两组病人在手术时间、术中出血、术后疼痛持续时间、术后并发症、住院时间及住院费用等方面的差异。结果:腹腔镜疝修补术组在手术时间、术后疼痛持续时间等方面与无张力疝修补术组有明显差异,术中出血及住院时间方面上无明显差异,两组病人无严重的并发症。结论:采用腹腔镜疝修补术治疗成人腹股沟疝,手术效果确切,具有微创、住院时间较短、美观等优点,但费用高,需根据病人情况选择手术方式。
- 胡良鹤郑明王贵和陈晓鹏
- 关键词:无张力疝修补术疗效
- 人乙酰肝素酶核心启动子的扩增及序列分析被引量:2
- 2009年
- 目的:扩增乙酰肝素酶(heparanase,HPSE)基因启动子核心片段,并进行序列分析。方法:提取人类基因组DNA,PCR扩增HPSE基因启动子,T-A克隆、酶切鉴定,然后进行测序比对,分析其中转录因子结合位点。结果:从人类基因组DNA中扩增出HPSE基因启动子片段,酶切鉴定与预期结果吻合,长度为561bp,该启动子碱基序列与数据库GenBank完全一致,并含有3个Sp1、4个ERE和2个ERG1转录因子结合位点。结论:成功克隆了HPSE核心启动子,并含有维持HPSE转录活性的转录因子结合位点,为后续研究奠定了基础。
- 胡良鹤陈晓鹏
- 关键词:乙酰肝素酶启动子转录因子结合位点