王鲁北 作品数:7 被引量:18 H指数:4 供职机构: 中国科学院植物研究所 更多>> 发文基金: 江苏省科技基础设施建设计划项目 江苏省农业科技自主创新基金 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 更多>>
黑莓‘Kiowa’叶柄离体直接再生体系的建立 被引量:1 2012年 以黑莓品种‘Kiowa’无菌苗叶柄为外植体,研究了培养基类型、暗培养时间、着生位置、激素种类配比和生根条件等对叶柄不定芽诱导的影响,建立了叶柄直接再生体系。结果表明,把‘Kiowa’试管苗继代培养30~40 d后,取自上而下第1~2叶位的叶柄为外植体,接种在MS或1/2MS上,暗培养14 d或21 d叶柄的再生效果较好。‘Kiowa’叶柄不定芽再生的适宜培养基为MS+CPPU 1.0 mg/L+IAA 0.5 mg/L,不定芽再生率达87.46%,平均叶柄再生芽数目达4.42。芽增殖以MS+6-BA 0.5 mg/L+IAA 0.1 mg/L效果最好,增殖系数达5.19;再生植株生根以1/2MS+NAA 0.03 mg/L最佳,生根率达91.67%,平均生根条数为4.00。 张春红 王鲁北 王小敏 吴文龙 李维林关键词:黑莓 叶柄 分化 不定芽 悬钩子属植物肌动蛋白基因片段的克隆与表达 被引量:5 2011年 目的:克隆悬钩子属植物肌动蛋白基因(actin),为研究该物种中其他基因的表达和调控提供内标基因。方法:利用一对特异性引物从黑莓、悬钩子杂种和树莓品种中克隆actin cDNA片段,对其进行序列分析和半定量RT-PCR表达分析。结果:从3个品种中均获得一条783 bp actin cDNA片段,编码260个氨基酸,3条actin片段与其他植物核苷酸序列的同源性都在82%以上,与其他植物氨基酸序列同源性也均在95%以上;树莓和悬钩子杂种品种的actin核苷酸和氨基酸序列同源性均达99%,系统进化分析也发现两者亲缘关系较近些;表达分析发现actin基因在各品种不同组织中均有一定的表达量。结论:首次克隆了悬钩子属植物肌动蛋白基因actin,将来自黑莓和树莓品种的序列登录在GenBank,登录号分别为HQ439556和HQ439557。 张春红 王小敏 王鲁北 吴文龙 李维林关键词:悬钩子 肌动蛋白 克隆 半定量RT-PCR 植物抗旱和耐盐相关基因研究进展 水资源短缺以及土壤盐渍化是目前制约农业生产的一个全球性问题。培育抗旱、耐盐作物品种是利用干旱和盐碱地,治理荒漠化的一条经济而有效地途径。本文章综述了影响植物抗旱、耐盐性的各相关基因的研究进展及其在运用基因工程技术改良植物... 王鲁北 张春红 王小敏 李维林 吴文龙关键词:抗旱 耐盐 基因 植物 利用简并引物克隆黑莓、树莓肌动蛋白基因片段及表达分析 被引量:4 2011年 采用同源克隆法,利用设计的一对肌动蛋白(actin)基因简并引物,从黑莓、树莓和悬钩子杂种3个悬钩子植物品种均得到一条743 bp的actin cDNA片段,推测编码247个氨基酸。序列比对发现,克隆的actin基因推导的氨基酸序列和其他植物的肌动蛋白氨基酸序列具有高度保守性,经数据库搜索后将来自黑莓和树莓品种的actin cDNA片段在GenBank中登录,登录号分别为HQ439558和HQ439559。不同来源的植物actin蛋白系统进化树的聚类结果表明,树莓和悬钩子杂种亲缘关系较为密切。actin基因在3个悬钩子植物品种不同组织中的RT-PCR分析结果表明,其在检测的不同组织中均有一定程度的表达量,可能都属于组成型表达的肌动蛋白基因。研究结果为利用actin基因作为内参进一步研究黑莓和树莓其他基因的丰度奠定基础。 张春红 王小敏 王鲁北 吴文龙 李维林关键词:悬钩子 肌动蛋白基因 半定量RT-PCR 黑莓品种‘Arapaho’离体叶片不定芽诱导影响因素分析及再生体系建立 被引量:6 2012年 以黑莓(Rubus spp.)品种‘Arapaho’无菌苗叶片为外植体,通过正交和单因素实验分别研究了基本培养基类型、6-BA和IBA质量浓度以及暗培养时间、外植体的叶位和接种方式对不定芽诱导的影响,并研究了IBA质量浓度对不定芽生根的影响;在此基础上,初步建立了黑莓品种‘Arapaho’离体叶片的再生体系。正交实验结果表明:基本培养基类型对叶片不定芽诱导率及平均不定芽数的影响最大,而IBA质量浓度对叶片不定芽诱导率及6-BA质量浓度对平均不定芽数的影响较小;适宜‘Arapaho’叶片不定芽诱导的最佳培养基为含有2.0 mg.L-1 6-BA和1.0 mg.L-1 IBA的MS培养基。单因素实验结果表明:暗培养时间、外植体的叶位及接种方式对不定芽诱导率有显著影响;最适宜的暗培养时间为21 d;植株中、上部叶片的再生能力较强,其中第3和第4位叶的不定芽诱导效果最佳;叶面朝上接种更有利于不定芽的诱导。在含0.2 mg.L-1IBA的MS培养基中,不定芽生根率达100.0%,且根数多、长势良好。黑莓品种‘Arapaho’离体叶片的再生体系为:以无菌苗的第3和第4位叶为外植体,经过适当修剪后叶面朝上接种于含有2.0 mg.L-16-BA和1.0 mg.L-1 IBA的MS培养基上,暗培养21 d后置于光照条件下培养30 d;将不定芽转接到含有0.5 mg.L-16-BA和0.3 mg.L-1 NAA的MS培养基上进行继代培养;当不定芽高约2 cm时转接到含有0.2 mg.L-1IBA的MS培养基上进行生根培养,最终获得完整植株。 王鲁北 张春红 王小敏 吴文龙 李维林关键词:黑莓 离体叶片 不定芽诱导 黑莓愈伤组织的悬浮培养研究展望 本文主要介绍了植物细胞悬浮培养技术的基本原理、步骤、优点、研究进展,进而介绍了这项技术的应用现状.黑莓(Rubus spp.)是蔷薇科悬钩子属实心莓亚属的一种灌木,具有良好的开发应用前景.植物细胞悬浮培养技术可以作为开发... 汤飞云 方亮 王小敏 王鲁北 胡淑英 李维林 吴文龙关键词:黑莓 愈伤组织 “Arapaho”黑莓叶片与叶柄愈伤组织的诱导 被引量:6 2011年 以黑莓品种"Arapaho"无菌苗的叶片、叶柄为外植体,研究了植物生长调节剂、基本培养基和光照条件对愈伤组织诱导的影响。结果表明,在MS培养基中单加NAA、2,4-D、6-BA或者TDZ,都可以使黑莓"Arapaho"的叶片、叶柄产生愈伤组织,但是植物生长调节剂及其浓度不同,使出愈时间、愈伤组织诱导率以及愈伤组织大小和形态等有差异;基本培养基类型和光照时间长短对黑莓叶片、叶柄愈伤诱导无明显影响。 王鲁北 张春红 王小敏 胡淑英 李维林 吴文龙关键词:黑莓 叶片 叶柄 愈伤组织