马振华
- 作品数：2 被引量：4H指数：1
- 供职机构：山西农业大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金博士科研启动基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 氟砷暴露致家兔主动脉损伤及系统性炎症反应被引量：1
- 2018年
- 目的探讨砷氟单独及联合暴露对家兔动脉组织的损伤作用及其机制。方法 32只新西兰白兔,分为4组,分别给予ddH_2O,50 mg/L氟化钠和(或)13 mg/L三氧化二砷6个月建立中毒模型。采用石蜡切片HE染色进行动脉组织病理学分析;采用ELISA方法检测血清炎症标志物MCP-1和IL-6水平。结果加氟组骨氟浓度显著升高;加砷组血砷、肝脏砷及心脏砷浓度显著升高;联合暴露组同时表现为氟中毒及砷中毒。主动脉病理学结果显示加氟组可见中层弹性膜排列不整齐,疏松;加砷组可见内膜层增厚,内皮下间隙增宽,中层弹性膜排列紊乱、不规则;联合组可见内膜显著增厚,细胞外基质增多,中层弹性膜排列紊乱。氟砷单独及联合暴露组血清MCP-1和IL-6水平升高。结论氟砷单独及联合染毒可引起家兔不同程度的动脉损伤,系统性炎症在氟砷血管毒性的发生中发挥了重要的作用。
- 马艳琴马振华尹淑琴
- 关键词：氟砷ELISA炎症标志物
- 人脐静脉内皮细胞分离培养方法的建立及优化被引量：3
- 2015年
- 为优化人脐静脉内皮细胞(HUVEC)原代及传代的培养方法,建立一种简便且能够获得数量较多及活力良好的HUVEC培养体系。分离脐静脉并插管,用0.1%的II型胶原酶灌注消化分离内皮细胞。M199完全培养基悬浮并接种于细胞培养瓶,37℃,5%CO2培养。待细胞铺满80%时,0.25%胰酶-EDTA消化传代培养。倒置显微镜观察内皮细胞生长情况,姬姆萨染色法鉴定内皮细胞的形态,vWF因子相关抗原免疫荧光法鉴定内皮细胞。比较不同胶原酶消化时间、不同接种密度、不同胰酶消化时间、不同培养基组分对细胞得率、形态和纯度的影响。结果表明,原代培养时,II型胶原酶最佳消化时间为15min,最佳接种密度为1×106 mL-1;传代培养时,胰酶最佳消化时间为2min。倒置显微镜下观察和姬姆萨染色结果显示,贴壁内皮细胞呈长梭形,且呈单层铺路石状排列。免疫荧光检测结果表明,细胞胞浆呈绿色荧光,为vWF因子阳性细胞,DAPI衬染细胞核呈蓝色,显示内皮细胞纯度接近100%。本实验成功建立了HUVEC原代分离培养的优化体系,纯度高、活力好,为后续研究做好了准备。
- 马振华张连杰马艳琴
- 关键词：人脐静脉血管内皮细胞胶原酶消化法免疫荧光技术
