符俊惠
- 作品数：2 被引量：0H指数：0
- 供职机构：温州医学院附属第一医院更多>>
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- 5-氮杂胞苷对SMMC-7721细胞增殖与侵袭的影响及作用机制
- 2013年
- 目的观察5-氮杂胞苷(5-Aza-CdR)对人肝癌细胞株SMMC-7721细胞增殖及侵袭的影响,并探讨其可能的机制。方法常规方法培养SMMC-7721细胞,加入不同浓度的5-氮杂胞苷,以CCK-8法测定终浓度为0、5、10、25、50 umol/L的5-氮杂胞苷对SMMC-7721细胞作用24、48、72 h后增殖的影响,并计算细胞生长抑制率;Transwell小室侵袭实验检测各不同浓度5-氮杂胞苷处理SMMC-7721细胞后24 h后的细胞侵袭能力特点;Western blotting法检测Caspase-3、MMP-2的表达。结果 5-氮杂胞苷能显著抑制人肝癌细胞株SMMC-7721细胞增殖,并呈时间浓度依赖性(P<0.05);与对照组相比,随5-氮杂胞苷浓度增加Caspase-3明显增加,MMP-2蛋白表达量明显增加。结论 5-氮杂胞苷对人肝癌细胞株SMMC-7721细胞增殖有明显抑制作用,且表现为时间浓度依赖性,其机制可能与上调Caspase-3蛋白表达量,诱导细胞凋亡,及对细胞的直接毒性作用有关。5-氮杂胞苷能增强人肝癌细胞株SMMC-7721细胞的侵袭能力,其机制可能与上调MMP-2蛋白表达量有关。
- 段建文吴晓叶海林符俊惠吴志伟张启瑜
- 关键词：5-氮杂胞苷肝细胞半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3基质金属蛋白酶-2
- 人EGFR基因真核表达质粒的构建及其在293细胞中的表达
- 2012年
- 目的 :构建人表皮生长因子(EGFR)基因真核表达系统,拟为EGFR靶向腺病毒准备包装细胞。方法:用RT-PCR法,从人A431细胞中逆转录出EGFR基因cDNA,插入到pcDNA3.1(+)质粒中,拟构建EGFR真核表达载体,经测序证实。用脂质体将重组质粒转染293细胞,经G418筛选获得稳定表达EGFR重组克隆,用Western blot鉴定转染细胞中EGFR基因的表达。结果:经限制性内切酶酶切及测序结果分析证实EGFR基因已插入重组质粒。Western blot方法证实转基因293细胞中存在人EGFR基因的表达。结论:成功构建的人EGFR/pcDNA3.1(+)真核表达系统能够在293细胞稳定表达。
- 曾丽华季世强王金华符俊惠张启瑜
- 关键词：表皮生长因子克隆真核表达
