王筱萌
- 作品数：1 被引量：1H指数：1
- 供职机构：中国药科大学生命科学与技术学院分子生物学教研室更多>>
- 发文基金：中央高校基本科研业务费专项资金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 叶酸受体α真核表达载体的构建及在HEK293细胞中表达的鉴定被引量：1
- 2013年
- 从高表达叶酸受体α的卵巢癌细胞株SKOV3中提取总RNA,RT-PCR扩增FRα基因片段,使用HindⅢ和EcoRⅠ双酶切后克隆到真核细胞表达载体pcDNA3.1中,对其进行酶切及测序鉴定;用脂质体介导法将重组质粒转染入人胚肾细胞HEK293中,并利用RT-PCR、Western blot及细胞免疫荧光染色检测细胞内FRα基因的表达情况。通过RT-PCR扩增得到750 bp左右的FRα基因片段,并构建了真核表达重组质粒,经酶切、测序鉴定正确。转染HEK293细胞后,RT-PCR检测到细胞中FRαmRNA的存在,Western blot、细胞免疫荧光证明FRα蛋白在细胞中的表达。成功构建了FRα基因的真核表达重组质粒,该质粒可在真核细胞中表达FRα蛋白,这些实验结果为卵巢癌基因疫苗的研究奠定了基础。
- 刘欣欣邱郑王筱萌邢黎军张娟张芳王旻
- 关键词：卵巢癌叶酸受体Α真核载体DNA疫苗
