- 载脂蛋白A5基因多态性与冠心病和糖尿病的关联研究
- 丁妍
- 关键词：载脂蛋白A5冠心病糖尿病甘油三脂单核苷酸多态性
- 自噬对宫颈癌细胞增殖和迁移能力的影响被引量：5
- 2016年
- 目的观察自噬对宫颈癌细胞增殖迁移能力的影响,并探讨其可能机制。方法采用不同浓度雷帕霉素诱导人宫颈癌HeLa细胞,吖啶橙染色观察自噬小体的形成,Western blot检测自噬相关基因LC3B以及PI3K/Akt/mTOR通路蛋白的表达情况,采用RTCA仪器实时检测细胞的增殖能力,Transwell小室检测细胞的迁移能力。应用自噬抑制剂3-methyladenine(3-MA)阻断宫颈癌细胞自噬后,采用RTCA仪器实时检测细胞的增殖能力,Transwell小室检测细胞的迁移能力。构建带有绿色荧光蛋白的LC3B质粒,转入HeLa细胞,通过G418药物筛选转染阳性细胞,荧光显微镜观察LC3B的细胞定位,Western blot检测LC3B表达。RTCA仪器实时检测野生型和LC3B过表达HeLa细胞的增殖能力,Western blot检测PI3K/Akt/mTOR通路蛋白的表达。结果雷帕霉素诱导后,宫颈癌HeLa丑细胞自噬水平增高,增殖和迁移能力有所下降;PI3K/Akt/rnTOR通路蛋白表达改变(P<0.05)。自噬抑制剂3-MA诱导HeLa细胞增殖和迁移水平下降(P<0.05)。荧光显微镜和Westem blot结果显示构建的LC3质粒成功转入Hela细胞中并且能够抑制宫颈癌细胞的增殖(P<0.05)。结论在一定范围内,随着自噬水平的升高,HeLa细胞增殖和迁移能力降低,可能是通过PI3K/Akt/mTOR信号通路发挥作用。通过基因靶向扰乱自噬关键基因(如LC3等)而改变宫颈癌细胞自噬水平可能为宫颈癌的治疗带来新策略。
- 杨毅丁妍于爱清严世荣
- 关键词：自噬宫颈癌细胞雷帕霉素LC3
