韩福平
- 作品数：3 被引量：6H指数：2
- 供职机构：华南理工大学生物科学与工程学院更多>>
- 发文基金：广东省科技计划工业攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 改良的乳鼠心肌细胞分离与培养新方法被引量：4
- 2015年
- 目的探讨一种简单有效的SD大鼠乳鼠心肌细胞分离与培养方法。方法取出生24 h以内的大鼠心室,0.08%的胰蛋白酶反复消化多次,离心收集心肌细胞,差速培养后5-溴脱氧尿嘧啶核苷纯化心肌细胞。用全细胞膜片钳方法,记录心肌细胞动作电位,并用激光共聚焦显微镜观察钙瞬变、线粒体膜电位。结果心肌细胞存活率大于93%,心肌细胞纯度大于96%,细胞形态良好,出现节律性搏动,钙瞬变波形稳定、规律,动作电位和线粒体膜电位均正常。结论本研究方法分离心肌细胞存活率高、活性好,是一种简单、高效的心肌细胞原代培养方法,可广泛应用于各种研究。
- 黄礼杰陈耀旭杨莹莹殷春霞陈睿韩福平唐羽欣谭文
- 关键词：新生大鼠心肌细胞原代培养钙瞬变线粒体膜电位动作电位
- 改良的成年SD大鼠心室肌细胞分离与培养方法
- 2015年
- 目的建立稳定高效的成年大鼠心室肌细胞分离与培养方法。方法成年SD大鼠麻醉后,迅速开胸取心,将主动脉连接于Langendorff装置上进行逆向灌流,用0.8 mg/m LⅡ型胶原酶和0.1 mg/m L蛋白酶双酶灌注消化分离心肌细胞,采用自然沉降法纯化心室肌细胞,一部分细胞用改良的M199培养基进行细胞培养,另一部分使用台盼蓝染色进行细胞活性检测并计数,同时使用激光共聚焦显微镜观察细胞收缩及钙瞬变。结果本方法可获得(81.9±2.2)%具有活性的成年大鼠心室肌细胞,每只SD大鼠心脏的细胞产量可达(2.0±0.1)×107个,电刺激时细胞同步稳定收缩。结论该分离和培养方法高效、稳定,分离出的细胞活性高,产量高,可用于原代培养。
- 韩福平陈耀旭苏浩吕南英殷春霞黄礼杰谭文
- 关键词：成年大鼠心室肌细胞原代培养
- 豚鼠窦房结细胞的分离与鉴定被引量：2
- 2015年
- 目的探讨豚鼠窦房结（SAN）细胞的分离方法和鉴定。方法通过打结定位法确定窦房结的＂中心区域＂,双酶解法分离窦房结细胞,观察SAN细胞形态,并利用全细胞膜片钳技术记录SAN细胞动作电位,鉴定窦房结细胞。结果 SAN细胞呈两头狭小中间稍微膨出的梭形,呈蚯蚓状,无清晰横纹,在正常Tyrode液中恢复规律的跳动。典型SAN细胞占细胞总数的3%~5%。利用全细胞膜片钳记录到去极化速度慢,无平台期,4期呈现自动除极的典型SAN细胞动作电位。结论采用打结定位法和双酶解法可获得典型的SAN细胞,此法分离的细胞活性良好,存活率较高,是一种简单高效的窦房结细胞分离方法,可广泛用于各种研究。
- 殷春霞韩福平文婷陈耀旭尚瑾玲谭文
- 关键词：窦房结动作电位
