王翔
- 作品数：3 被引量：18H指数：2
- 供职机构：安徽农业大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：安徽省高校省级自然科学研究项目国家级大学生创新创业训练计划安徽省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 铁皮石斛1-羟基-2-甲基-2-(E)-丁烯基-4-焦磷酸还原酶基因的克隆与表达分析被引量：9
- 2015年
- 目的从铁皮石斛Dendrobium officinale中克隆1-羟基-2-甲基-2-(E)-丁烯基-4-焦磷酸还原酶[1-hydroxy-2-methyl-2-(E)-butenyl-4-diphosphatereductase,HDR]基因,并分析其在铁皮石斛不同组织中的表达差异以及不同信号分子诱导下的表达模式。方法采用RT-PCR和RACE等方法获得铁皮石斛HDR基因(Do HDR)全长,利用DNAMAN和MEGA6.0对其他物种的HDR基因编码的氨基酸序列进行同源性分析和进化关系分析,使用实时荧光定量分析HDR基因的表达模式。结果成功获得Do HDR基因,Gen Bank登录号为KC344827,全长1 658 bp,编码460个氨基酸,与其他科属植物的同源性达到80%以上。Do HDR基因在铁皮石斛叶片中表达量最高,从高到低依次是根、茎、原球茎;且受到脱落酸(abscisic acid,ABA)、水杨酸(salicylic acid,SA)信号分子的诱导。结论从铁皮石斛中获得Do HDR基因,为进一步阐明铁皮石斛萜类化合物合成途径中该基因的重要作用奠定了理论基础。
- 吴秋菊武梅娟王翔林毅蔡永萍樊洪泓
- 关键词：铁皮石斛
- N-琥珀酰壳聚糖固定化中性蛋白酶的制备及性质研究被引量：1
- 2009年
- 以N-琥珀酰壳聚糖为载体固定中性蛋白酶，研究了固定化酶的适宜温度、pH、热稳定性和酸碱稳定性等酶学性质，同时对固定化酶和游离酶的红外光谱图作了分析比较。结果表明：中性蛋白酶经固定化后，最适酶反应pH由7升至8，最适温度没有改变，仍为50℃，所得固定化酶具有较宽的酸碱稳定性范围，在pH7～9都保持较高活力，并且固定化酶的热稳定性比游离酶有较大的提高。红外光谱分析表明，酶固定化前后的红外光谱图的部分特征峰有较大的差异。
- 张琛李春如王翔崔松松张玲樊美珍
- 关键词：中性蛋白酶固定化酶学性质
- 铁皮石斛HDS基因的克隆与初步表达分析被引量：10
- 2016年
- 目的从铁皮石斛Dendrobium officinale中克隆4-羟基-3-甲基-2-E-丁烯基-1-焦磷酸合成酶(4-hydroxy-3-methylbut-2-en-1-yl diphosphate synthase,HDS)基因,在大肠杆菌中诱导融合蛋白,并探究该基因在铁皮石斛不同组织中的表达规律。方法采用RT-PCR和RACE等方法获取铁皮石斛HDS(Do HDS)的c DNA全长,利用相关软件和在线网站进行生物信息学分析,使用Real-Time PCR分析Do HDS在不同组织的表达特征,构建原核表达载体p ET-28a(+)-Do HDS,转化大肠杆菌BL21(DE3)进行诱导表达。结果成功获得Do HDS的c DNA全长序列,Gen Bank登录号为KJ161312,全长2 666 bp,ORF为2 238 bp,编码745个氨基酸。Do HDS在各组织中均有表达,在茎中表达量最高,为原球茎的5倍;SDS-PAGE结果显示诱导产物为1个相对分子质量(82 700)与理论值相符的融合蛋白。结论克隆了Do HDS的c DNA全长序列,探究其在不同组织中的表达模式,建立了原核表达体系,为后续研究Do HDS的功能提供了一定的理论基础。
- 王翔吴林松吴秋菊林毅蔡永萍樊洪泓
- 关键词：铁皮石斛
