梁丽
- 作品数：1 被引量：2H指数：1
- 供职机构：天津科技大学食品工程与生物技术学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- Lactobacillus kefiranofaciens乳糖酶基因克隆及在毕赤酵母中表达被引量：2
- 2016年
- 以马乳酒样乳杆菌ZW3基因组为模板,PCR扩增得到乳糖酶中Lac L、Lac M两个大小亚基片段,经Eco RI和Sna BI双酶切后,分别连接p PIC9K质粒,转化大肠杆菌感受态细胞DH5α,并验证其核苷酸序列正确。将重组质粒p PIC9K-Lac L、p PIC9K-Lac M分别电转化毕赤酵母GS115,构建p PIC9K-Lac L-GS115重组子和p PIC9K-Lac M-GS115重组子,通过筛选得到抗G418浓度达到3.0 mg/m L,具有多拷贝基因的重组子。经反转录PCR验证,c DNA上存在Lac L片段,并可检测到乳糖酶酶活达到1.17 U/m L;p PIC9K-Lac M-GS115重组子诱导表达72 h后的发酵液上清经SDS蛋白电泳检测到目的条带。
- 邢竹青王彦宁刘兆贤邬亚男梁丽王艳萍
- 关键词：乳糖酶毕赤酵母克隆
