刘存刚
- 作品数：3 被引量：13H指数：2
- 供职机构：南京军区南京总医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- HPLC梯度洗脱法测定血浆中柳氮磺吡啶及其代谢物被引量：7
- 2008年
- 目的：建立人血浆中柳氮磺吡啶（SASP）及其代谢物磺胺吡啶（SP）、乙酰磺胺吡啶（AcSP）浓度的高效液相色谱（HPLC）测定方法。方法：液相分离采用Hedera ODS-2分析柱,柱温：30℃,以甲醇0.05 mol/L乙酸铵溶液（含0.1%三乙胺）溶剂系统梯度洗脱,流速为1.0 ml/min,进样量20μl;检测波长243 nm。以苯巴比妥（PB）为内标,血浆样品用甲醇沉淀蛋白质后取上清液进样分析。结果：血浆中其他组分均不干扰样品的测定;在0.5-100mg/L范围内SP、AcSP和SASP均呈良好的线性关系,相关系数r均〉0.999 2;提取回收率（n=5）分别为97.1%-101.3%、97.7%-103.3%、94.9%-102.3%;日内相对标准偏差（RSD）分别为1.44%-3.04%、1.76%-3.85%、2.12%-3.22%,日间RSD分别为2.01%-3.69%、2.11%-3.99%、2.56%-3.56%。结论：本方法操作简便、选择性好、准确、灵敏,可用于柳氮磺吡啶的药代动力学研究。
- 李金恒刘存刚姚旋曹晓梅倪立马晶晶贺阳红
- 关键词：柳氮磺吡啶磺胺吡啶梯度洗脱
- 三维凝胶NAT2基因分型芯片的制备与优化被引量：6
- 2008年
- 目的研制N-乙酰化酶2（NAT2）基因分型芯片，以快速、准确检测患者的NAT2单核苷酸基因多态性。方法设计并合成中国人中常见的NAT2酶基因5个突变位点的探针对和包含5个突变位点的两对引物；样本经PCR扩增后，采用丙烯酰胺点样液制备芯片，并与TEMED反应固化芯片；分别用探针与芯片杂交，采用博奥晶芯LUXSCAN10K微阵列芯片扫描仪分析结果。结果优化了PCR扩增条件，使两组PCR在相同条件下扩增；优化了芯片制备及杂交条件，双链DNA采用碱变性，清除非特异键合采用电泳方法；建立了NAT2酶基因分型标准：信号强度Cy3：Cy5≥5为野生型，Cy3：Cy5为0．6～1．5时为杂合子，Cy3：Cy5≤0．2为突变型；对20例标本的基因分型结果采用直接测序法进行验证，结果均一致。结论三维凝胶NAT2基因点突变分型芯片法是一种特异性强、高通量的NAT2基因分型方法，适用于临床快速基因分型，指导相关药物合理使用。
- 刘存刚李金恒孙胜利曹晓梅
- 关键词：NAT2单核苷酸多态性基因芯片基因分型
- 三维凝胶NAT2基因分型芯片的制备与优化
- 目的研制 N-乙酰转移酶(NAT2)基因分型芯片,快速、准确地检测人 NAT2单核苷酸基因多态性,以预测人体 NAT2酶的活性及对相关药物与化合物的代谢能力。方法设计并合成我国人口中常见的 NAT2酶基因5个突变位点的探...
- 李金恒刘存刚孙胜利曹晓梅
- 关键词：NAT2单核苷酸多态性基因芯片基因分型
- 文献传递
