辛永平
- 作品数：1 被引量：5H指数：1
- 供职机构：山东大学生命科学学院微生物技术国家重点实验室更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- Paenibacillus sp.K1 α-半乳糖苷酶酶学性质被引量：5
- 2015年
- 利用CODEHOP PCR和Anchor-ligated PCR方法从类芽孢杆菌Paenibacillus sp.K1中克隆得到一个α-半乳糖苷酶基因aga P1,大小为2 190 bp,同源性分析显示,该基因与其他α-半乳糖苷酶基因的序列相似低,是一个新的α-半乳糖苷酶基因。将aga P1在大肠杆菌Origami B（DE3）中表达并纯化获得Aga P1,酶学性质分析显示：以p NPG为底物时,Aga P1最适反应温度为40℃,最适p H 6.5-10,Km值为0.75 mmol/L,最大反应速率Vmax为1.96μmol·min^-1·mg^-1。同时Fe^2＋、Mg^2＋、Ca^2＋、K^＋和甘油能使α-半乳糖苷酶酶活提高1-3倍,而Cu^2＋、Zn^2＋、Fe3＋和还原型谷胱甘肽则抑制该酶的活性。SDS-PAGE检测Aga P1蛋白大小约为80 ku,与理论预测值基本一致;Native-PAGE分析表明正常条件下Aga P1蛋白以二聚体或六聚体形式存在。以上结果显示,Paenibacillus sp.K1产生的α-半乳糖苷酶为一个新的低温α-半乳糖苷酶。
- 辛永平孔文涛陆文伟孔健
- 关键词：类芽孢杆菌Α-半乳糖苷酶酶学性质
