赵鹤
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
- 供职机构：中国药科大学生命科学与技术学院微基因药物实验室更多>>
- 发文基金：江苏高校优势学科建设工程资助项目国家基础科学人才培养基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- hVEGF121与βhCG融合蛋白的表达载体构建与初步表达
- 为了构建一种新型抗肿瘤融合蛋白疫苗,包含hVEGF121和βhCG抗原表位,并探索融合蛋白的纯化条件和方法.采用PCR方法,克隆VEGF和βhCG基因,并通过限制性内切酶NcoⅠ、EcoR Ⅰ和HindⅢ将两个基因逐个插...
- 曹荣月宦晓军孙翁李盼郑梅赵鹤肖芳杨梦琪龙军
- 关键词：ΒHCG克隆融合蛋白
- hVEGF_(121)与βhCG融合蛋白的克隆、分离纯化与初步鉴定被引量：2
- 2014年
- 构建一种新型抗肿瘤融合蛋白疫苗,包含hVEGF121和βhCG抗原表位,并探索融合蛋白的纯化条件和方法。采用PCR方法,克隆VEGF和βhCG基因,并通过限制性内切酶NcoⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ将两个基因逐个插入pET-28a(+)质粒中,利用质粒自带的卡那霉素抗性筛选出阳性克隆,获得重组基因的表达载体。对重组菌进行乳糖诱导表达后,通过超声破碎,硫酸铵分级沉淀,阴离子交换层析等方法进行融合蛋白的分离纯化,Western-blot鉴定。测序结果表明成功构建重组载体pET-28a-VEGF-M2-X10-βhCG-CTP37,重组基因长993 bp,编码331个氨基酸残基。SDS-PAGE显示,经乳糖诱导,Escherichia coli BL21(DE3)重组菌表达hVEGF121-M2-X10-βhCG-CTP37多肽,约占菌体总蛋白量的35%。融合蛋白经分离纯化后纯度可达到电泳纯,约占蛋白冻干粉的80%。结论:克隆、测定了融合蛋白基因,并在Escherichia coli BL21(DE3)中诱导表达hVEGF121-M2-X10-βhCG多肽,同时成功分离纯化此多肽。
- 曹荣月宦晓军孙翁李盼郑梅赵鹤杨梦琪龙军张晓红
- 关键词：ΒHCG克隆分离纯化融合蛋白
