胡耀明
- 作品数：11 被引量：6H指数：1
- 供职机构：中山大学公共卫生学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家教育部博士点基金广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生环境科学与工程生物学更多>>
- 小白菊内酯对不同环氧合酶-2表达的鼻咽癌细胞株中干性侧群细胞转归的影响被引量：1
- 2012年
- 目的:探讨倍半萜烯内酯(sesquiterpene Iactones,SLs)类化合物对不同环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)表达水平的人鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)细胞中癌干细胞(cancer stem cells,CSCs)转归的影响。方法:分别采用实时定量PCR(qRT-PCR)和Western blot检测人鼻咽癌高分化CNE1L和低分化CNE2L细胞株中COX-2 mRNA和蛋白本底表达水平。给予不同剂量SLs活性成分小白菊内酯(parthenolide,PN)处理2种细胞株后,再分别采用噻唑蓝(MTT)法测定细胞增殖活性;qRT-PCR检测细胞中干性相关基因COX-2、ABCG2、BMI1、OCT4 mRNA水平;流式细胞术分析干性侧群(side population,SP)细胞的相对含量;平板克隆集落形成实验检测干性细胞的自我更新和分化增殖能力。结果:CNE1L和CNE2L细胞中COX-2 mRNA和蛋白本底水平显著不同,在CNE1L细胞中明显高于CNE2L细胞(P<0.05);与对照组比较,PN处理后,细胞增殖抑制率随PN浓度(10～100μmol/L)增加呈剂量依赖性增高(P<0.05),细胞中COX-2 mRNA在CNE1L中升高、在CNE2L中降低,干性相关基因ABCG2、BMI1 mRNA在CNE1L细胞中升高、而OCT4 mRNA在两株细胞中均降低(P均<0.05);SP细胞抑制率亦随PN浓度(2.5～40μmol/L作用24 h)增加呈剂量依赖性增高(P<0.05);而细胞的集落形成能力随PN浓度(0.25～1.5μmol/L作用72 h)增加显著降低(P<0.05);上述结果在CNE1L和CNE2L细胞株间差异均有统计学意义(P<0.05),在CNE1L细胞中变化作用更强。结论:PN对不同NPC细胞株中的干性细胞功能具有抑制作用且存在明显差别,可能与不同细胞间COX-2表达的差异性有关。
- 李晓杰林丽娜麦剑荣陈慧峰胡耀明廖昆黄奕俊林忠宁林育纯
- 关键词：环氧合酶-2鼻咽肿瘤小白菊内酯
- PP2A-B56γ高表达抑制镉诱导的人肝L02细胞DNA损伤被引量：3
- 2012年
- 目的:探讨人正常肝细胞内蛋白磷酸酶2A-B56γ亚基(PP2A-B56γ,由PPP2R5C基因编码)高表达对镉诱导相关基因转录水平和DNA损伤效应的影响,并探讨其作用机制。方法:构建PP2A-B56γ高表达L02-2R5Cc和空白载体对照L02-pBabe细胞模型;两种细胞分别给予CdCl_2(Cd)、TNFα单独处理及联合处理后,实时荧光定量-PCR(QRT-PCR)检测不同处理组PPP2R5C和金属硫蛋白1B(MTIB)mRNA转录水平;彗星试验(SCGE)检测细胞DNA断裂损伤情况;并按照3×2的析因设计分析不同处理之间是否存在联合作用及作用类型。结果:与L02-pBabe细胞相比较,L02-2R5Cc细胞中PPP2R5C、外源性PPP2R5C-FLAG mRNA显著高表达(P<0.05),细胞株构建成功。3种因素单独处理时,与阴性对照组相比,Cd降低PPP2R5C、升高MT1B mRNA表达,PPP2R5C基因高表达诱导的效应与Cd处理相反,TNFα降低PPP2R5C和MT1B mRNA表达(均P<0.05);析因分析表明,在PPP2R5C和PPP2R5C-FLAG mRNA检测中,PPP2R5C高表达与Cd、与TNFα之间均存在协同性交互效应(P<0.05);在MT1B mRNA检测中,PPP2R5C高表达与cd和TNFα之间均表现为拮抗作用,PPP2R5C高表达与TNFα为协同抑制作用(均P<0.05)。SCGE检测表明,与阴性对照相比.Cd诱导彗星尾长、尾矩、尾部DNA含量和拖尾细胞阳性率显著增高(P<0.05),TNFα、PPP2R5C高表达单独作用均不引起DNA损伤(P>0.05),但两两联合作用的析因分析结果表明,TNFα预处理与Cd处理对DNA损伤具有协同作用,PPP2R5C高表达与Cd处理存在拮抗作用,交互作用均具有统计学意义(P<0.05)。结论:Cd抑制肝细胞PPP2A-B56γ编码基因的转录并显著诱导DNA损伤,PP2A-B56γ高表达抑制镉诱导的DNA损伤,而炎症因子可增强镉对细胞DNA的损伤。
- 林丽娜林育纯陈慧峰罗洁李晓杰胡耀明李文张树江陈雯林忠宁
- 关键词：镉肝细胞毒性基因转录调控
- 镉对PP2A-B56γ高表达的人肝L02细胞中基因转录和细胞毒性的影响
- 目的探讨人正常肝细胞内蛋白磷酸酶2A(PP2A)-B56γ亚基(PPP2R5C)高表达对镉诱导相关基因转录水平和细胞毒性的影响,及其去磷酸化的作用机制。材料和方法构建B56γ高表达L02-2R5Cc细胞株和空白载体L02...
- 罗洁林育纯陈慧峰李文李晓杰张树江林丽娜胡耀明陈雯林忠宁
- 关键词：镉肝细胞毒性基因转录调控
- 文献传递
- 锌影响镉对人未成熟树突状细胞毒性作用被引量：1
- 2011年
- 目的探讨锌对镉诱导的人未成熟树突状细胞(iDC)毒性的影响。方法分离人周围血单核细胞(PBMC)并诱导为iDC后,分组给予生理氯化钠溶液(对照组)、氯化镉(CdCl2组)、硫酸锌(ZnSO4组)、锌预处理后加氯化镉(Zn+Cd组)、锌离子特异性螯合剂(TPEN)预处理后加氯化镉(TPEN+Cd组)处理。噻唑蓝(MTT)颜色反应法检测细胞活力;单细胞凝胶电泳(SCGE)检测DNA链断裂损伤;吖啶橙(AO)与碘化丙啶(PI)核双染观察细胞凋亡并通过流式细胞仪检测凋亡细胞中染色体断裂的亚二倍体(SubG1)。结果 CdCl2组iDC活力抑制率随CdCl2呈剂量依赖性显著增高(P<0.05);与ZnSO4组或CdCl2组相比,Zn+Cd组和TPEN+Cd组细胞活力抑制率明显升高(P<0.05);相同CdCl2剂量(20μmol/L)时,Zn+Cd组和TPEN+Cd组细胞的彗星尾长和尾矩明显增大(P<0.05);各处理组出现凋亡细胞核染色和SubG1阳性细胞比例明显增加。结论镉化合物暴露导致iDC活力降低,其诱导的细胞毒性明显高于锌;细胞内锌稳态干预可增加镉介导的iDC内DNA损伤相关的毒作用敏感性。
- 李文林育纯陈慧峰罗洁李晓杰林丽娜胡耀明张树江陈雯林忠宁
- 关键词：未成熟树突状细胞镉锌免疫毒性DNA损伤
- PP2A-B56亚基基因(PPP2R5C)5'侧翼区多态性的分析
- 目的：蛋白磷酸酶(PPs)介导的去磷酸化作用与放射敏感性的关系受到关注.为探讨PP2A不同亚基基因启动子区的遗传多态性与人群辐射损伤易感性的关系，对广东正常人群中PP2A-B56亚基基因(PPP2R5C)5'侧翼...
- 林育纯胡耀明陈雯林忠宁陈慧峰陈宇曦林丽娜万建新罗洁李文张树江李晓杰
- 关键词：蛋白磷酸酶2A多态性
- DEHP对人肝L02细胞毒性作用及其核因子-κB机制研究
- 1.引言邻苯二甲酸酯类(PAEs)化合物是一类包含有多种成分的持久性环境污染物;其中邻苯二甲酸二-(2-乙基)乙酯(DEHP)是使用最广泛的PAEs增塑剂。研究表明DEHP可导致多种有害效应,包括肝、肾毒性,睾丸毒性,但...
- 胡耀明陈宇曦李晓杰陈慧峰麦剑荣夏斌张玉静廖昆林育纯林忠宁
- 镉对PP2A-B56γ高表达的人肝L02细胞中基因转录和细胞毒性的影响
- 目的:为探讨重金属镉对肝细胞的毒性损伤及其去磷酸化作用机制,观察肝细胞内蛋白磷酸酶2A（PP2A）-B56γ亚基高表达对镉诱导细胞毒性和相关基因转录水平的影响。材料和方法:采用PPP2R5C基因稳定转染永生化人正常肝L0...
- 罗洁林育纯陈慧峰李文李晓杰张树江林丽娜胡耀明郝元涛陈雯凌文华林忠宁
- 文献传递
- PPP2R1A基因启动子区高甲基化对其不同单体型转录功能活性影响
- 目的:为探讨蛋白磷酸酶2A（PP2A）核心酶中Aα亚基基因（PPP2R1A）启动子区高甲基化对不同单体型报告基因重组质粒转录活性功能的影响。方法:PCR获得和测序确定正常人群PPP2R1A基因5’-侧翼端（PPP2R1A...
- 陈慧峰林育纯张树江李晓杰罗洁林丽娜李文胡耀明陈雯林忠宁
- 文献传递
- DEHP对人肝L02细胞毒性作用及其核因子-κB机制研究
- ＜正＞1.引言邻苯二甲酸酯类（PAEs）化合物是一类包含有多种成分的持久性环境污染物;其中邻苯二甲酸二-（2-乙基）乙酯（DEHP）是使用最广泛的PAEs增塑剂。研究表明DEHP可导致多种有害效应,包括肝、肾毒性,睾丸毒...
- 胡耀明陈宇曦李晓杰陈慧峰麦剑荣夏斌张玉静廖昆林育纯林忠宁
- 镉对蛋白磷酸酶2A-B55δ高表达L02细胞周期和核因子-κB活化影响被引量：1
- 2012年
- 目的探讨镉对蛋白磷酸酶2A(PP2A)的B55δ亚基高表达和不同多态性单体型调控高表达的肝细胞周期的影响及其与核因子-kappaB(NF-κB)活化的关系。方法选择永生化人正常肝L02细胞,采用B55δ编码基因PPP2R2D序列构建高表达的L02-2R2Dc细胞、与不同启动子区单体型调控高表达的L02-2R2D-PC1和L02-2R2D-PC3细胞株,以导入空载体的L02-pBabe为对照细胞。各细胞给予5～80μmol/L的氯化镉(CdCl2)处理建立细胞模型。噻唑蓝法检测各细胞生长的抑制作用;流式细胞术检测细胞周期;蛋白免疫印迹(Western blotting)检测细胞核内NF-κBp65蛋白的活化情况;荧光定量聚合酶链反应(QRT-PCR)检测环氧合酶-2(COX-2)基因mRNA水平的改变。结果与对照组比较,CdCl2组各细胞的增殖抑制率随镉水平增高呈剂量依赖性增高(Pearson’s r均P<0.05);与CdCl2组比较,冈田酸+CdCl2组各细胞的增殖抑制率明显增加(P<0.05);与对照组比较,CdCl2组细胞G1期比例下降、S期比例增加(P<0.05);胞核p65蛋白水平增高,COX-2 mRNA水平上调;这种效应在不同细胞株之间比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论镉可引起PP2A-B55δ高表达的人肝L02细胞增殖功能抑制并导致细胞周期S期阻滞,这种效应与NF-κB信号通路的活化有关。
- 胡耀明陈慧峰罗洁李晓杰陈宇曦林丽娜麦剑荣陈雯林忠宁林育纯
- 关键词：蛋白磷酸酶2A细胞周期核因子-ΚBL02细胞
