胡明亮
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- 系统性红斑狼疮患者CD4和CD19细胞miRNA表达差异及对细胞功能的影响
- 2015年
- 目的探讨系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)患者外周血CD4细胞和CD19细胞中微小RNA(miRNA)的表达情况,及外周血CD4细胞和CD19细胞中miRNA异常表达对它们功能的影响。方法密度梯度离心法分离获取健康人及SLE患者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC),磁珠分选获取CD4细胞和CD19细胞;试剂盒提取miRNA,将每组单个样本miRNA混合成总miRNA,进行人miRNA微阵列分析各个miRNA表达情况;实时荧光定量PCR(real time PCR)验证上述结果;电穿孔法转染miRNA抑制剂或模拟物至外周血CD4细胞和CD19细胞,验证miRNA对CD4细胞和CD19细胞功能的影响。结果 miRNA微阵列分析显示,与健康对照组相比,SLE患者外周血CD4细胞中5种miRNA表达升高(P<0.01),5种miRNA表达降低(P<0.01);CD19细胞中5种miRNA表达升高(P<0.01),9种miRNA表达降低(P<0.01)。Real time PCR验证结果显示,与健康对照组相比,SLE患者外周血CD4细胞中miR-126表达升高(P<0.01),miR-142-3p表达降低(P<0.01);CD19细胞中miR-200b表达升高(P<0.01),miR-17、miR-103和miR-1246表达降低(P<0.01)。进一步功能实验显示,这些异常表达的miRNA与CD4细胞及CD19细胞分泌IL-4、IL-10和IL-21及Ig G相关(P<0.01)。结论 SLE患者外周血CD4细胞和CD19细胞中存在着miRNA的异常表达,且这些miRNA可能参与SLE的发病。
- 钟馨李朝晖胡明亮缪蕙何桂芳沈明静刘芳曾惠芬叶素惠孙冬尼陈红珍
- 关键词：系统性红斑狼疮CD4CD19微小RNA
