程旻
- 作品数：2 被引量：1H指数：1
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- PCR-SSCP检测白血病患者C/EBPζ基因突变方法学建立被引量：1
- 2012年
- 目的建立一种快速、批量筛查白血病患者骨髓C/EBPζ基因外显子突变的多聚酶链反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)分析方法。方法用Bio-Rad iCycler梯度PCR仪对25μL PCR反应体系中的Mg++、Taq酶等浓度及反应条件进行优化,并用2%琼脂糖电泳检验产物质量。在此基础上,再对中性聚丙烯酰胺凝胶浓度、上样缓冲液种类、上样量、上样次数及相隔时间、PCR产物稀释倍数、电压、电泳温度等因素进行探讨。同时比较80个健康体检者外周血与20个胸外科良恶性肿瘤患者肋骨骨髓DNA的PCR-SSCP图谱。结果 25μL PCR反应体系中的Mg++、Taq酶浓度分别为1.5～2.0mM和1.0～1.5U,退火温度为54℃～57℃时PCR扩增效率高;应用8%～10%非变性聚丙烯酰胺凝胶,低离子强度(LIS)上样缓冲液,PCR产物稀释4～5倍,上样量为5～10μL,同一块凝胶相隔0.5～1.0小时可上样2次产物,电压为320V挂冰,室温或4℃电泳5～7小时,SSCP分析可得到较为满意的图谱。80例健康体检者外周血与20例正常肋骨骨髓DNA的C/EBPζ基因图谱相同。结论可以用正常体检者外周血DNA代替正常肋骨骨髓DNA行SSCP分析,作为C/EBPζ基因突变检测的对照图谱,两次上样的PCR-SSCP方法节约了试剂、时间、人力,可用于快速大量筛查白血病患者C/EBPζ基因突变。
- 程旻陶洋丁金国顾红兵
- 关键词：SSCP白血病
- 脑损伤患者脑脊液和外周血中TNF-α、IL-6测定的意义
- 2010年
- 目的探讨脑损伤患者脑脊液和血液中肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)表达水平的变化及其临床意义。方法采用双抗体夹心ELISA方法测定脑损伤患者急性期内TNF-α、IL-6在脑脊液和血液中相对含量。结果 TNF-α、IL-6在脑损伤急性期有较高表达,与对照组相比有统计学意义,且脑脊液中的表达明显强于外周血液。结论受外伤应激,神经细胞和神经胶质细胞迅速动员机体免疫系统作出反应,产生大量保护性细胞因子,参与损伤局部组织的免疫反应。
- 丁金国顾红兵赵红飞程旻
- 关键词：脑损伤脑脊液
