王成龙
- 作品数：7 被引量：60H指数：6
- 供职机构：西南民族大学生命科学与技术学院更多>>
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- 羊呼吸道主要支原体和细菌病原的多重PCR检测方法的建立及应用被引量：9
- 2018年
- 为建立一种能够同时检测绵羊肺炎支原体、丝状支原体簇成员、多杀性巴氏杆菌和溶血性曼氏杆菌4种羊呼吸道主要病原的多重PCR方法,本研究采用各病原的特异性引物,经优化反应条件,建立了一种可以同时检测以上4种病原的多重PCR方法,并对128份临床样品进行了检测。结果显示,该方法对其它细菌和支原体扩增结果均为阴性,特异性强;该方法对以上4种病原基因组DNA的检测下限分别为2.2×10~3拷贝、2.1×10~3拷贝、1.1×10~3拷贝和8.3×10~2拷贝。该方法特异性强、敏感性高,为上述4种病原的快速检测和鉴定,以及临床羊呼吸道疾病的诊断提供了一种方便、快捷和准确的工具。
- 胡玉婷刀筱芳王成龙丁可莉宋明彤杨发龙
- 关键词：绵羊肺炎支原体多杀性巴氏杆菌多重PCR
- 绵羊肺炎支原体和多杀性巴氏杆菌双重PCR检测方法的建立及应用被引量：11
- 2013年
- 根据绵羊肺炎支原体hsp70基因和多杀性巴氏杆菌sp6基因分别设计引物,建立了绵羊肺炎支原体和多杀性巴氏杆菌的双重PCR检测方法,优化条件后进行特异性和敏感性评价,并对160份临床样本进行了检测。结果显示,绵羊肺炎支原体和多杀性巴氏杆菌引物的最佳终浓度分别为30pmol/L和10pmol/L。该方法的特异性较好,对其他无关病原不检出。对绵羊肺炎支原体和多杀性巴氏杆菌的检测下限分别为4.4pg和22pg,与独立PCR的敏感性相同。临床样本的检测结果显示,该方法对绵羊肺炎支原体和多杀性巴氏杆菌的检出率分别为50.6%和47.5%。结果表明,本研究建立的双重PCR方法具有特异性好、敏感性高等特点,为临床上绵羊肺炎支原体和多杀性巴氏杆菌混合感染的快速检测、鉴定以及流行病学调查提供了有用的工具。
- 冯旭飞刘霜张贤宇王成龙匡学谦杨发龙汤承王永
- 关键词：绵羊肺炎支原体多杀性巴氏杆菌双重PCR
- 白花蛇舌草多糖对小鼠免疫功能和生长发育的影响被引量：11
- 2013年
- 为探讨白花蛇舌草多糖对小鼠免疫功能和生长发育的影响,本研究将60只雌性昆明小鼠随机等分为4组,1～3组分别以50、100和150mg/kg体重的白花蛇舌草多糖粗提物灌胃小鼠,连续给药7d,第4组以等量的生理盐水灌胃,作为空白对照组。最后一次给药12h后,各组小鼠用鸡新城疫弱毒疫苗接种,2头份/只,分别于给药结束后的7、14和21d采小鼠外周血并分离淋巴细胞和血清。用淋巴细胞转化试验(CCK-8法)测定外周血淋巴细胞增殖能力;微量血凝抑制试验评价血清中新城疫抗体水平;测定各组小鼠体重;21d测定小鼠腹腔巨噬细胞吞噬能力,并测定脾脏指数。统计学分析结果显示,白花蛇舌草多糖组小鼠的外周血淋巴细胞增殖能力、免疫抗体水平、腹腔巨噬细胞吞噬能力、脾脏指数和体重均显著高于对照组(P<0.05),且具有量效关系。结果表明,白花蛇舌草多糖能显著提高机体的特异性免疫和非特异性免疫功能,促进机体的生长发育。本试验结果为利用白花蛇舌草多糖开发保健产品提供了参考。
- 王洪鸽汤承王航王成龙
- 关键词：白花蛇舌草多糖小鼠免疫调节生长发育
- 金荞麦超微粉对小鼠免疫功能的影响被引量：15
- 2013年
- 本试验旨在研究金荞麦超微粉对小鼠免疫功能和生长发育的影响。将60只昆明小鼠随机等分为4组,高、中、低剂量组分别灌胃1.75、1.25、0.75 g/kg体重金荞麦超微粉悬液,连续给药7 d;空白对照组灌胃等量的生理盐水。最后一次给药后间隔12 h,各组小鼠用鸡新城疫弱毒疫苗接种,随后在给药结束后的第7、14和21天取小鼠外周血用于分离淋巴细胞和血清,用CCK-8法测定外周血淋巴细胞增殖能力,微量血凝抑制试验评价血清中新城疫抗体水平,同时称量各组小鼠体重;给药结束后21 d测定小鼠腹腔巨噬细胞吞噬能力及脾脏指数。统计学分析结果显示,与对照组相比,中剂量金荞麦超微粉可极显著提高小鼠外周血淋巴细胞增殖能力、免疫抗体水平和体重(P<0.01),同时极显著提高腹腔巨噬细胞的吞噬能力和脾脏指数(P<0.01)。试验结果表明,金荞麦超微粉能显著提高机体的特异性免疫和非特异性免疫功能,促进机体的生长发育,为开发金荞麦超微粉成为新型天然植物药、饲料添加剂提供依据。
- 王航汤承岳华王洪鸽王成龙
- 关键词：金荞麦超微粉小鼠免疫功能生长发育
- 绵羊肺炎支原体P113蛋白N端原核表达及其抗原性分析被引量：10
- 2013年
- 绵羊肺炎支原体可感染绵羊及山羊,并导致非典型肺炎的发生。P113蛋白是绵羊肺炎支原体推测的粘附素,为进一步研究P113蛋白的功能,本试验对其N端1～231位氨基酸的片段进行了原核表达,并采用Western blot方法对P113蛋白免疫原性进行了分析。结果显示,重组蛋白以包涵体的形式在Rosetta(DE3)工程菌中成功获得表达;经纯化的重组蛋白与抗绵羊肺炎支原体全菌血清发生特异性结合反应,表明P113蛋白是良好的免疫原。
- 张贤宇杨发龙冯旭飞王成龙
- 关键词：绵羊肺炎支原体原核表达抗原性
- 基于p113基因的绵羊肺炎支原体PCR检测方法的建立及应用被引量：7
- 2013年
- 为建立一种特异、敏感的绵羊肺炎支原体PCR检测技术,根据绵羊肺炎支原体p113基因设计引物,并对其特异性进行了评价,同时,对所建立的PCR方法的敏感性和临床样本中绵羊肺炎支原体的检出率进行了分析,并与现有的基于16SrRNA的PCR方法进行了比较。结果显示,该方法能特异性扩增绵羊肺炎支原体参考菌株Y-98及临床分离株,对其他羊的致病性支原体和无关病原不检出;检测灵敏性为44fg,为现有的基于16SrRNA基因的PCR技术的1 000倍;对临床采集的肺组织样本和鼻腔拭子中绵羊肺炎支原体的检出率明显高于基于16SrRNA的PCR方法。研究结果表明,所建立的基于p113基因的PCR技术具有特异、敏感等特点,为绵羊肺炎支原体的检测、鉴定以及流行病学调查提供了有用的工具。
- 冯旭飞张贤宇王成龙杨发龙
- 关键词：绵羊肺炎支原体聚合酶链反应
- 丝状支原体簇和多杀性巴氏杆菌双重PCR方法的建立及应用
- 2014年
- 本研究旨在建立丝状支原体簇和多杀性巴氏杆菌的双重PCR检测方法,从而为临床上同时检测这2类病原的感染提供一种更方便、快捷、准确的工具。本研究采用2对特异性检测丝状支原体簇和多杀性巴氏杆菌的引物,对PCR反应体系和反应条件进行了优化,并对双重PCR的特异性及敏感性进行了评价,随后采用该方法对52份临床样本进行了检测。结果显示,所建立的双重PCR方法能同时扩增丝状支原体簇成员和多杀性巴氏杆菌的DNA,而对来源于其他常见病原的DNA均无扩增;对丝状支原体簇和多杀性巴氏杆菌的最低检测限分别为24.8和28.9pg;能成功地从临床样本中检测丝状支原体簇成员和多杀性巴氏杆菌。结果表明,本研究所建立的双重PCR方法具有很好的特异性和敏感性,为临床丝状支原体簇和多杀性巴氏杆菌感染的快速诊断、病原鉴定及流行病学调查提供了有效的方法。
- 王成龙吴禹熹冯旭飞杨发龙
- 关键词：多杀性巴氏杆菌双重PCR
