张东方
- 作品数：3 被引量：30H指数：2
- 供职机构：中国农业大学食品科学与营养工程学院更多>>
- 发文基金：国家质检总局科技计划项目国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 免疫磁捕获-实时荧光PCR快速检测鸡肉中沙门氏菌被引量：19
- 2011年
- 对免疫磁捕获-实时荧光PCR检测鸡肉中沙门氏菌进行了初步研究。主要包括免疫磁珠制备条件的选择及优化,通过实验最终确定了以6 mg/mL EDC和5 mg/mL NHS活化直径为700 nm的羧基聚苯乙烯磁性微球,与浓度为100μg/mL的沙门氏菌抗体在37℃振荡孵育1.5 h,制备得到抗沙门氏菌免疫磁珠,与市售沙门氏菌免疫磁珠试剂盒(Dynal产品)捕获效率相当。免疫磁捕获-实时荧光PCR检测方法检测限为104 CFU/mL左右,能在16 h内检测出鸡肉中104 CFU/mL的沙门氏菌,可用于食品中沙门氏菌的快速检测。
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- 关键词：沙门氏菌实时荧光PCR
- 沙门菌分子分型方法研究进展被引量：10
- 2012年
- 沙门菌引起的食源性疾病是危害人类健康的重大隐患，被列为首选控制的食源性致病菌。沙门菌属型别复杂，传统的分型方法大多是通过表型鉴定，如依据菌体表面脂多糖、鞭毛抗原分别携带的O、H抗原等，包括生化反应、耐药性、血清学、噬菌体分型等方法，直接体现了菌株的不同来源、不同致病性或表观特征差异，但是这些分型方法存在分型率低、重复性差、操作繁琐，以及分辨能力不强等缺点，存在较大的局限性。
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- 关键词：沙门菌分子分型方法
- 沙门菌PCR-dHPLC基因分型方法建立被引量：1
- 2012年
- 目的建立沙门菌聚合酶链反应-变性高效液相色谱(PCR-dHPLC)基因分型方法。方法采用16S～23S rRNA内转录间隔(ITS)作为沙门菌分型目的基因,确定特异性扩增引物,进行PCR扩增,扩增产物经dHPLC分离,根据dHPLC图谱峰型差异进行分型,并与血清学和生化分型结果比较。结果 89株沙门菌共分为12个dHPLC型(D型);所有沙门菌均有1个相同色谱峰,克隆测序结果表明,其片断大小为600 bp,其他8种食源性致病菌对照株无此色谱峰,应为沙门菌16S～23S rRNA基因序列的特征性条带,分型结果与血清学差异较大,与生化分型结果有一定一致性。结论所建立的沙门菌PCR-dHPLC基因分型方法具快速、操作方便、重复性好、成本低廉、高通量和自动化的特点。
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- 关键词：沙门菌分子分型
