刘芳
- 作品数：4 被引量：7H指数：2
- 供职机构：延边大学医学院更多>>
- 发文基金：吉林省教育厅科学技术研究项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 刺五加皂苷对淀粉样前体蛋白APP酶解通路的影响被引量：6
- 2017年
- 目的研究刺五加皂苷对APP(Amyloid Precursor Protein,APP)酶解通路的影响。方法 (2015.9-2016.5)用12.5mg/L、25mg/L、50mg/L刺五加皂苷处理胚鼠皮层神经元细胞,采用酶联免疫吸附测定法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测γ-分泌酶活性;另用脂质体2000转染构建APP695高表达CHO细胞系,用G418(500mg/L)进行筛选获得APP695-CHO稳转染细胞,用12.5 mg/L、25 mg/L、50 mg/L刺五加皂苷处理稳转染细胞,48h后,ELISA法检测细胞培养上清中Aβ1-40含量,用Western-blot法检测细胞裂解液中APP-N端片段蛋白的表达。结果在胚鼠皮层神经元细胞与对照组相比,25 mg/L、50 mg/L的刺五加皂苷能够抑制内源性γ-内切酶的活性,而且随着浓度的升高,抑制作用增强;在APP695-CHO稳转染细胞中,Aβ1-40的分泌量增高,APP-N端片段的蛋白表达水平减少,不同剂量刺五加皂苷能缓解这些变化。结论刺五加皂苷能抑制内源性γ-内切酶减少Aβ1-40的生成,对APP酶解起到一定的影响,对阿尔茨海默病的发病及进展有一定的保护作用。
- 刘芳李净洋邱烨许妍姬
- 关键词：刺五加皂苷Β淀粉样蛋白
- 淀粉样前体蛋白C端片段对细胞骨架状态的影响
- 2016年
- 【目的】探讨大鼠胚胎神经元内转染淀粉样前体蛋白C端片段对细胞骨架状态的影响。【方法】大鼠胚胎大脑皮层获得原代神经元进行培养,利用APP-C端片段、APLP2-C端片段基因重组质粒转染到神经元当中,用免疫染色的实验方法,观察肌动蛋白(actin)、微管蛋白(tubulin)、微管相关蛋白(MAP2),磷酸化丝切蛋白(Ph-cofilin)的形态,并用Western Blotting方法测定了Ph-cofilin水平,每组实验重复测量十次。【结果】APP/APLP2-CTFs转染组与对照组相比有明显的向细胞外伸展的F-actin的重新聚合,细胞四周伸出的突触有所收缩;tubulin的结构发生紊乱;轴突当中的MAP2蛋白表达显著减弱,而且APP-C99组的MAP2蛋白的表达水平最低。蛋白印迹和免疫组化结果均显示APP/APLP2-CTFs转染组与对照组相比Ph-cofilin水平有所增高(P <0.05)。【结论】转染淀粉样前体蛋白C端片段可以诱导细胞骨架蛋白和状态的改变。
- 许敢峰刘芳陈慧许妍姬
- 关键词：ACTINTUBULINMAP2
- 硒、锌对老年性痴呆模型小鼠APP酶解通路的保护作用及机制研究被引量：3
- 2017年
- 目的研究硒、锌对老年性痴呆(Alzheimer’s,AD)模型小鼠酶解通路的保护作用及机制。方法选用健康雄性2月龄昆明种小鼠60只,随机分为正常对照组(NC)、AD模型组、硒[Se,7.5μg/(kg bw)]+AD组、锌[Zn,5 mg/(kg bw)]+AD组、硒[Se,7.5μg/(kg bw)]+锌[Zn,5 mg/(kg bw)]+AD组、脑复康[Piracetam,230 mg/(kg bw)]+AD共6组,每组10只。连续60d腹腔注射D-半乳糖[150 mg/(kg bw)],建立老年性痴呆模型,采用酶联免疫吸附测定法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测血清中α、β、γ-分泌酶含量以及脑组织中Aβ1-40含量;Western-blot法检测脑组织中糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)和磷酸化Tau(Ph-tau)蛋白水平。结果 ELISA法显示,与AD组比较,硒、锌可以增强α-分泌酶活性,抑制β、γ-分泌酶的活性,且硒锌联合作用增强,脑组织中Aβ_(1-40)含量明显降低。Western-blot法检测显示,与NC组比较,AD模型组GSK-3β、Ph-tau蛋白表达水平升高,而硒、锌处理组和硒锌联合作用组,GSK-3β、Ph-tau蛋白表达水平明显降低。结论硒、锌通过增加内源性α-分泌酶的活性,抑制β、γ-分泌酶的活性,减少Aβ_(1-40)的生成,降低GSK-3β、Ph-tau蛋白表达水平,可能对AD的发病及进展有一定预防保护作用。
- 刘芳邱烨李净洋许妍姬
- 关键词：硒锌AΒGSK-3
- 硒、锌干预对体外淀粉样前体蛋白酶解通路的影响被引量：1
- 2016年
- 目的研究硒、锌干预对体外淀粉样前体蛋白(amyloid precursor protein,APP)酶解通路的影响。方法用0.1μmol/L的硒、锌处理胚鼠皮层神经元细胞,采用酶联免疫吸附测定法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测γ-内切酶活性;另用脂质体转染构建APP695高表达CHO细胞系,用G418(500mg/L)对转染后细胞进行筛选,最终获得表达人CHO-APP695细胞模型,Western-blot法检测APP-N端片段蛋白的表达。用0.1μmol/L的硒、锌处理转染细胞,48h后,ELISA法检测细胞培养上清中Aβ1-40含量,Western-blot法检测细胞裂解液APP-N端片段蛋白的表达。结果 Western-blot法检测显示CHO-APP695细胞高表达APP-N端片段蛋白;与对照组比较,硒、锌处理组抑制内源性γ-内切酶的活性,且硒、锌联合使用,抑制作用增强;Aβ1-40的含量也减少;单纯硒、锌和硒锌联合处理组,APP-N端片段蛋白表达水平增加。结论硒、锌抑制内源性γ-内切酶对APP蛋白的剪切,减少Aβ1-40的生成,可能对阿尔茨海默病的发病及进展有一定的预防保护作用。
- 刘芳许妍姬
- 关键词：硒Β淀粉样蛋白体外
