黄典
- 作品数：9 被引量：20H指数：3
- 供职机构：华中农业大学生命科学技术学院微生物农药国家工程研究中心更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中央高校基本科研业务费专项资金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：化学工程生物学轻工技术与工程农业科学更多>>
- 独岛枝芽胞杆菌MCCC 1A00493活性物质分离鉴定及抗菌杀线虫分子机制研究
- 水稻黄单胞菌(Xanthomonas oryzae pv.oryzae)是一种植物病原细菌,它引起的水稻白叶枯病是水稻最严重的病害之一;南方根结线虫(Meloidogyne incognita)是我国危害最为严重的植物寄...
- 黄典
- 关键词：水稻黄单胞菌植物寄生线虫天然免疫细胞坏死
- 深海独岛枝芽胞杆菌1A00493杀根结线虫活性物质研究被引量：1
- 2017年
- 以一株具有杀南方根结线虫(Meloidogyne incongnita)活性的深海独岛枝芽胞杆菌(Virgibacillus dokdonensis)1A00493为研究对象,对其发酵上清液的杀线虫活性进行测定,并对杀线虫活性物质进行理化分析。利用正相硅胶柱、反相硅胶柱、LH-20葡聚糖凝胶柱分离以及示差折光高效液相色谱(RID-HPLC)对活性物质进行分离纯化,将纯化的活性物质进行液相色谱-质谱联用分析。结果表明,杀线虫活性物质耐高温、对蛋白酶和酸碱不敏感、硫酸铵沉淀物无杀线虫活性、3kDa超滤管滤过液有活性、易溶于甲醇和氯仿,推测活性物质是中强极性小分子物质。杀线虫活性物质主要有3种化合物,其中分子量为234Da的新型化合物很有可能是主要的活性物质。
- 郑娜黄典邵宗泽喻子牛张吉斌
- 关键词：根结线虫活性物质分离纯化
- 独岛枝芽胞杆菌MCCC 1A00493产生的4-乙烯基苯酚鉴定和作用南方根结线虫特性研究被引量：1
- 2022年
- 【目的】根结线虫危害严重,难防难控,前期研究发现一株深海来源的独岛枝芽胞杆菌(Virgibacillus dokdonensis)MCCC 1A00493对南方根结线虫具有良好的体外拮抗效果,本研究分离鉴定菌株发酵液中杀线虫活性物质,对其作用线虫的多种模式进行研究,为菌株有效控制植物病原线虫的应用奠定理论基础。【方法】采用硅胶柱层析和半制备高效液相色谱对独岛枝芽胞杆菌发酵上清液中的杀线虫活性物质进行分离纯化,采用液相色谱质谱联用、核磁共振对纯化物进行结构鉴定;并对其趋避、诱杀、熏杀和卵孵化抑制活性进行检测。【结果】结构鉴定确定独岛枝芽胞杆菌MCCC 1A00493发酵液中分离的杀线虫活性物质为4-乙烯基苯酚。4-乙烯基苯酚对线虫具有触杀、熏杀、卵孵化抑制和高浓度驱避低浓度引诱活性,15μg/mL 4-乙烯基苯酚72 h触杀线虫校正死亡率为71.23%±9.06%;20 mg/mL 4-乙烯基苯酚24 h熏杀线虫死亡率达100%;100μg/mL 4-乙烯基苯酚作用线虫卵10 d后,卵孵化抑制率达66.2%;在琼脂平板上,10 mg/mL的4-乙烯基苯酚对线虫有驱避作用,1 mg/mL的4-乙烯基苯酚对线虫有引诱作用;在Pluronic凝胶中,25 mg/mL的4-乙烯基苯酚驱避线虫,5 mg/mL和10 mg/mL的4-乙烯基苯酚引诱并杀死线虫。【结论】首次报道4-乙烯基苯酚对植物病原线虫具有多种作用模式,尤其是高浓度下对根结线虫具有趋避作用而低浓度下具有诱杀作用的新特性。因此,4-乙烯基苯酚可以作为一种潜在的生物杀线虫剂。
- 黄典余豪陈稳程万里邵宗泽张吉斌
- 关键词：南方根结线虫杀线虫活性
- 多粘类芽胞杆菌KM2501-1杀南方根结线虫活性产物研究被引量：6
- 2020年
- 【目的】南方根结线虫(Meloidogyne incognita)是一种危害严重的土传性植物病原线虫,给农业生产造成了巨大的经济损失,前期研究发现多粘类芽胞杆菌(Panebacillus polymyxa)KM2501-1具有很好的温室防治南方根结线虫效果,且可产生多种挥发性杀线虫活性物质,但对其非挥发性产物是否有杀线虫活性没有研究。本研究拟进一步分离鉴定其产生的杀线虫活性代谢产物,发掘新的杀线虫药物。【方法】对菌株KM2501-1进行液体发酵并离心收集发酵上清液,通过硅胶柱层析、高效液相色谱分离等方法得到高纯度的杀线虫活性物质,并通过液相色谱质谱联用分析、核磁共振等技术鉴定杀线虫活性物质的结构。【结果】生物活性检测显示,多粘类芽胞杆菌KM2501-1发酵上清液具有较强的南方根结线虫触杀活性,并能有效抑制南方根结线虫卵孵化,体外杀线虫效率高达87.66%,抑制卵孵化效率达92.26%。结构鉴定结果显示多粘类芽胞杆菌产生的杀线虫活性物质为环二肽类物质cyclo(Pro-Phe),800 mg/L的cyclo(Pro-Phe)杀线虫效率达84.75%。进一步的显微观测结果表明,与对照组相比,活性物质cyclo(Pro-Phe)处理后的根结线虫肠道组织紊乱、结构发生破坏。【结论】多粘类芽胞杆菌KM2501-1产生的cyclo(Pro-Phe)是一个具有杀线虫新功能的活性物质,其可能通过破坏线虫肠道杀死线虫。
- 程万里陈珍杨雪黄典张吉斌
- 关键词：南方根结线虫杀线虫活性
- 杀线虫深海芽胞杆菌的筛选
- 2022年
- 根结线虫(root-knot nematodes)对作物危害严重,难防难控。海洋微生物作为巨大的生物资源宝库,近年来逐渐成为开发杀线虫微生物菌剂的热点。为了获得对根结线虫具有拮抗活性的深海微生物资源,本研究用模式线虫——秀丽隐杆线虫(Caenorhabditis elegans)进行初筛,从203株深海芽胞杆菌(Deep-sea Bacillus)中获得24株触杀活性在50%以上的菌株;以植物病原线虫——南方根结线虫(Meloidogyne incognita)进行复筛,获得14株触杀活性高于50%的菌株。选取复筛触杀活性最好的6株菌对南方根结线虫进行熏杀活性测定,发现阿耶波多氏芽胞杆菌(Bacillus aryabhata)MCCC 1K02966、海泥芽胞杆菌(Bacillus oceanisediminis)MCCC 1A14063、坚强芽胞杆菌(Bacillus firmus)MCCC 1A00263不仅对根结线虫的触杀活性达到60%以上,且熏杀活性也达到40%以上,同时具有触杀和熏杀双重杀线虫活性,在农业线虫防治领域中具有开发应用潜力。
- 陈稳黄典余豪程万里程万里张吉斌
- 关键词：秀丽隐杆线虫南方根结线虫触杀活性
- 海洋细菌抗菌筛选及深海独岛枝芽胞杆菌A493活性物质分离鉴定被引量：6
- 2013年
- 以水稻黄单胞菌等植物病原菌为指示菌,采用平板对峙法对411株海洋细菌进行了抗菌筛选,初筛获得具有抗菌活性的海洋菌株81株,复筛获得具有稳定抗菌活性的菌株7株,最后通过测定抗菌谱,得到1株抗菌谱特异并且稳定拮抗水稻黄单胞菌的深海独岛枝芽胞杆菌(Virgibacillus dokdonensis)A493。对水稻白叶枯病害的温室生防实验表明,经过A493无菌发酵上清液处理,水稻生长20d后对水稻白叶枯病害的防治效果达到了66.7%,且对水稻的正常生长无不良影响。通过离子交换色谱法提取,再经2次薄层层析硅胶板回收分离,得到了纯化活性物质,经过ESI-MSn分析,初步判断活性物质分子量为317Da。Doskochilova系统纸层析结果显示活性物质很可能为新的氨基糖苷类物质。
- 张少博邵宗泽黄典陈莉喻子牛张吉斌
- 关键词：深海微生物植物病原菌水稻黄单胞菌抗菌物质
- 深海枝芽胞杆菌A493产生的新活性物质Z11的抗菌机理被引量：3
- 2013年
- 以一株抗菌谱窄的深海枝芽胞杆菌(Virgibacillus dokdonensis)A493为研究对象,对其产生的新的氨基糖苷类抗菌活性物质Z11抑制水稻黄单胞菌的浓度范围和抗菌作用机理进行了研究。结果表明Z11抑制水稻黄单胞菌的浓度范围为14～56μg·mL-1;机理研究显示Z11不改变水稻黄单胞菌细胞膜的通透性,但能影响其蛋白质的合成及细胞壁合成关键酶N-乙酰葡糖胺-1-磷酸尿苷酰转移酶(GlmU)的活性。
- 黄典陈莉邵宗泽孙风琴张少博林达张鼎楠喻子牛张吉斌
- 关键词：水稻黄单胞菌活性物质抗菌机制
- 深海独岛枝芽孢杆菌A493产活性物质特性与发酵条件优化研究被引量：1
- 2012年
- 以一株抗菌谱较窄并且稳定拮抗水稻黄单胞菌的深海独岛枝芽孢杆菌(V.dokdonensis)A493为研究对象,研究了其产活性物质特性及发酵条件的优化。A493产抗菌活性物质可以耐受100℃的高温,在pH值4～10和紫外照射环境中活性稳定,可以通过3kDa的超滤管,对蛋白酶不敏感,只能溶解于水和甲醇。酸沉淀和硫酸铵沉淀实验结果排除了活性物质是脂肽类物质的可能性,初步研究显示该活性物质可能是极性较强的水溶性活性小分子新化合物。确定A493最佳发酵条件为:接种菌龄12h、接种量1%、发酵时间48h、发酵温度28℃、培养转速180r·min-1、250mL锥形瓶中的装液量为70mL。优化后,其单位体积发酵液抑菌效果提高了18.7%,活性物质对水稻黄单胞菌的抑菌效价相当于15.6μg·mL-1的标准链霉素。
- 陈莉张少博黄典邵宗泽孙风芹王雪飞喻子牛张吉斌
- 关键词：水稻黄单胞菌理化特性发酵条件
- 抗植物病原线虫的多粘类芽胞杆菌KM2501-1发酵培养基和发酵条件优化被引量：4
- 2018年
- 多粘类芽胞杆菌KM2501-1可以有效抑制南方根结线虫对植物的危害,促进植物生长,具有良好的应用前景。采用正交实验和单因素实验分别对多粘类芽胞杆菌KM2501-1的发酵培养基和发酵条件进行了优化。结果表明,多粘类芽胞杆菌KM2501-1发酵培养基的最优配方为:可溶性淀粉3%、豆粕3%、氯化钙0.05%、氯化钠0.25%;最适发酵初始pH值为8.5,最适发酵温度为28℃。将多粘类芽胞杆菌KM2501-1在优化培养基中的发酵上清液稀释5倍后,作用根结线虫48 h的校正死亡率为87.15%,比优化前提高了61.61%;多粘类芽胞杆菌KM2501-1在优化培养基中发酵48 h后的芽胞数为2.5×10~8 cfu·mL^(-1),是优化前的6.25倍,芽胞率达到100%时发酵周期为48 h,优化效果十分显著。该研究为多粘类芽胞杆菌KM2501-1的中试和大规模发酵生产提供了基础数据。
- 杨景艳程万里曾立黄典蔡珉敏郑龙玉喻子牛张吉斌
- 关键词：发酵培养基发酵条件杀线虫活性
