- 地高辛标记对旱稻进行southern杂交分析主要影响因素的优化和验证被引量：1
- 2017年
- 以转基因旱稻和野生型旱稻为材料,对通过地高辛随机引物标记法进行的旱稻基因组Southern杂交条件进行了优化分析,包括探针制备效率、DNA样品量、酶切体系及转膜时间等。结果表明:影响探针制备效率的首要因素是温度而不是时间;DNA上样量在10~30μg均可以获得高质量的杂交图;60μL体系15 h即可酶切彻底并获得良好的杂交效果;转膜时间6 h即可。本研究所优化的地高辛标记的旱稻杂交分析结果稳定重复性好,具有较高的灵敏度和信噪比。
- 邢文岳苏乐乐李朝炜魏景芳朱昀
- 关键词：旱稻地高辛
- 抗旱基因8981转化‘吉粳88’的研究被引量：1
- 2016年
- 以‘吉粳88’成熟胚为外植体,用农杆菌介导法转入抗旱基因8981,对转化过程中愈伤组织的诱导、转化、筛选等条件进行研究,建立一个稳定、高效的农杆菌介导的遗传转化体系,并对获得的转基因植株进行PCR鉴定、除草剂抗性检测和抗旱性鉴定分析。结果表明:‘吉粳88’在诱导愈伤的过程中,不需要切芽;当菌液浓度OD600=0.2,浸染时间为20min时,转化效率最高且效果最好;在筛选培养前,需要经过恢复培养。PCR检测证明8981基因已整合到‘吉粳88’基因组中,抗性检测发现转基因植株对除草剂和PEG胁迫都有一定的抗性。
- 闫素红刘颖朱昀苏乐乐鲁冰魏景芳
- 关键词：吉粳88农杆菌转化抗旱性
- 抗蚜基因PPA遗传转化‘鲲旱2号’的研究
- 2016年
- 以‘鲲旱2号’成熟胚为外植体,通过农杆菌介导法将抗虫基因PPA导入旱稻愈伤组织中,以期获得抗虫转基因旱稻植株。对影响愈伤组织诱导效果的2,4-D浓度进行了研究。结果表明:当2,4-D浓度为2mg/L时,愈伤组织诱导效果最佳。对获得的转化植株进行PCR检测证明PPA基因已成功整合到旱稻基因组DNA。对阳性植株的后代喷施0.8mg/mL除草剂检测表明,转基因植株后代具有良好的除草剂抗性。
- 张冠华李朝炜闫素红苏乐乐郭蒙魏景芳
- 关键词：旱稻农杆菌介导转化
- 农杆菌介导的水稻‘绥8’转化研究
- 2016年
- 以‘绥8’成熟胚为外植体,研究了愈伤组织的诱导、筛选、再生情况,并对转化植株进行PCR和抗旱性鉴定,以建立高效的愈伤诱导、农杆菌转化和再生体系。结果表明:‘绥8’材料成熟胚易消毒,不易染菌;铺种使用2NBK培养基,可诱导出大量长势良好的愈伤组织,不需切芽;转化后的愈伤组织不需要恢复阶段,在筛选过程中愈伤长势良好但是颜色较浅,区分抗性愈伤较难;分化时绿点率和分化率很高。PCR鉴定证明外源基因成功转化到‘绥8’基因组中,其转化率和阳性率分别为17%和70%。对转基因植株进行抗旱性鉴定,20%PEG胁迫复水后,与野生型相比,表现出良好的抗旱性。
- 苏乐乐李冬杰张冠华王沛沛魏景芳
- 关键词：农杆菌介导
- 不同LEA抗逆基因的旱稻转化及后代分析
- 作为一个农业大国,我国对水稻的生产育种进行了各种研究,利用杂交、转基因等手段进行了各种抗逆性状水稻新品种的培育。近些年,水分的短缺严重影响着水稻的产量和质量,因此,节水抗旱稻的研究变得尤为重要。与水稻相比,旱稻在缺水条件...
- 苏乐乐
- 关键词：旱稻LEA转基因SOUTHERN杂交
- 文献传递
