王明明
- 作品数：2 被引量：12H指数：2
- 供职机构：滕州市中心人民医院更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 胰岛素样生长因子Ⅰ转染对脂肪干细胞TWEAK/Fn14信号通路的影响被引量：4
- 2015年
- 背景:胰岛素样生长因子Ⅰ具有诱导间充质干细胞向软骨细胞分化的能力,通过基因转染的方式将胰岛素生长因子Ⅰ转染入脂肪干细胞或许能够更好的促进脂肪干细胞向软骨细胞分化。目的:探讨胰岛素样生长因子Ⅰ基因对脂肪间充质干细胞体外定向成软骨分化能力以及对TWEAK/Fn14信号通路的影响。方法:构建慢病毒载体p LVX-IGF-I-IRES-Zs Greenl基因并转染第3代人脂肪间充质干细胞,诱导细胞向软骨分化。同时将pL VX-IRES-Zs Greenl转染的脂肪间充质干细胞设为绿色荧光蛋白/脂肪间充质干细胞组,单纯脂肪间充质干细胞设为对照组。结果与结论:与绿色荧光蛋白/脂肪间充质干细胞组和对照组相比,胰岛素样生长因子Ⅰ/脂肪间充质干细胞组细胞中TWEAK mR NA表达水平降低,而胰岛素样生长因子Ⅰ,Col2al和Sox9 mR NA的表达水平增加,Col2a1表达水平增加,基质金属蛋白酶3以及TWEAK的表达降低。提示pL VX-IGF-I-IRES-ZsG reenl慢病毒转染脂肪间充质干细胞后可获得胰岛素样生长因子Ⅰ的高效表达,且能下调细胞TWEAK基因及蛋白表达,可促进体外培养的脂肪间充质干细胞转化为软骨细胞。
- 刘玉平王明明刘涛李明俞光荣
- 关键词：转染干细胞脂肪干细胞脂肪间充质干细胞基因转染TWEAK
- 人髌下脂肪垫来源脂肪间充质干细胞的分离、培养及鉴定被引量：8
- 2015年
- 背景:髌下脂肪垫在膝关节手术中经常要部分切除,其可以作为脂肪间充质干细胞的重要来源。目的:探讨自髌下脂肪垫中分离、培养脂肪间充质干细胞的策略及细胞分子表面标记情况。方法:髌下脂肪垫组织取自膝关节镜手术的患者,以Ⅰ型胶原酶消化消化脂肪组织获取干细胞,用10%低糖DMEM培养基培养,利用MTT法测定不同代细胞增殖情况并绘制生长曲线。检测第5代细胞表面CD29及CD44的表达。结果与结论:培养24 h后可见原代细胞贴壁,1周后细胞呈纺锤型并且增殖速度加快,传代后的细胞贴壁及增殖细胞速度加快。生长曲线示第2及第5代的细胞增殖能力明显较第8代能力强。所取细胞能够分化为骨细胞和脂肪细胞。流式细胞仪检测结果显示第5代脂肪间充质干细胞重96.8%表达CD29,97.6%表达CD44。提示自髌下脂肪垫分离及提取脂肪干细胞简单易行,所得细胞的纯度及增殖能力均符合组织工程种子细胞的基本条件。
- 刘玉平刘涛王明明李明俞光荣
- 关键词：干细胞间质干细胞细胞培养技术脂肪间充质干细胞细胞培养种子细胞表面抗原
