焦振彬
- 作品数:3 被引量:9H指数:2
- 供职机构:河南农业大学生命科学学院更多>>
- 发文基金:河南省教育厅自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:生物学更多>>
- 香椿(Toona sinensis)微卫星富集文库构建及特性分析被引量:4
- 2015年
- 采用Dynal磁珠富集法构建了香椿微卫星富集文库,通过测序结果对文库的特性进行了分析。实验使用改良CTAB法提取香椿基因组DNA,用(AC)8、(AG)8和(ATG)123种带有生物素标记的探针与香椿基因组DNA的酶切片段进行杂交,将磁珠捕获的含有微卫星序列的DNA片段插入p MD 18-T载体,并转入感受态细胞Trans 5α构建克隆,经筛选后得到含356个克隆的香椿基因组微卫星富集文库。从富集文库中挑选插入片段长度为400-800 bp的128个克隆进行测序,其中含有SSR的序列77条,得率达60.16%,其中完美型占82.69%,非完美型8.65%,混合型8.65%。上述结果为SSR位点的进一步开发奠定了基础。
- 裴宋雨任志勇焦振彬程月琴王红卫
- 关键词:香椿微卫星磁珠富集文库
- 地黄微卫星富集文库构建及特性分析被引量:5
- 2013年
- 应用Dynal磁珠-生物素标记的微卫星探针(AC)8,(AG)8和(ATG)12与地黄基因组DNA酶切片段杂交,捕获含有微卫星序列的DNA片段,连接到pMD 18-T载体上,转入感受态细胞Trans 5α,构建地黄富集微卫星文库。利用M 13 F和M 13 R载体序列引物筛选文库,对插入片段长度为400~800 bp的克隆进行测序。共获得96条序列,48条(50%)含有微卫星位点,其中完美型占66%,非完美型22%,混合型12%。微卫星重复基元中,二核苷酸(AG)n和三核苷酸(CAT)n最为常见。
- 程月琴焦振彬张佩叶永忠王红卫
- 关键词:地黄微卫星磁珠富集文库
- 磁珠富集法构建播娘蒿SSR文库及特性分析
- 2014年
- 为构建播娘蒿SSR文库,通过Dynal磁珠富集法富集生物素标记的(AC)8,(AG)8和(ATG)12探针与播娘蒿基因组的酶切片段杂交的片段,捕获含有SSR位点的DNA序列,连接到pMD18-T载体上,并转入感受态细胞DH5d,共获得778个克隆.挑选阳性克隆,利用SuperSNX24一F引物对茵液克隆进行PCR检测.利用M13F,M13R载体引物和探针结合的方法对文库进行2次筛选,获得93个长度为400~1000bp的克隆并测序.结果表明,82条序列舍有SSR位点,占测序条数的88.17%.共有SSR位点数127个.其中完全型SSR位点102个,不完全型SSR位点10个.混合型SSR位点15个,分别占SSR位点总数的80.31%,7.87%,11.81%.SSR重复基元中,以二核苷酸(CT)n,(AC)n,(GT)n,三核苷酸(GAT)n最为常见,得率分别为20.47%,26.77%,21.26%和15.75%.
- 王亚平焦振彬裴宋雨叶永忠王红卫
- 关键词:播娘蒿磁珠富集法