毛佳慧
- 作品数：6 被引量：19H指数：3
- 供职机构：江苏大学临床医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省普通高校研究生科研创新计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 不同状态p53小鼠骨髓间质干细胞分泌外泌体的差异被引量：4
- 2017年
- 目的:比较3种p53状态(p53^(+/+)、p53^(+/-)和p53^(-/-))的小鼠骨髓间质干细胞(mouse bone marrow mesenchymal stem cells,m BMMSC)分泌的外泌体(exosome)是否存在差异。方法:采用透射电镜及蛋白质印迹鉴定和分析p53不同状态m BMMSC分泌的外泌体的形态及膜表面特异性标志蛋白CD9和CD63,采用Nanosight纳米颗粒跟踪分析仪比较外泌体浓度和大小的差异。结果:3种m BMMSC分泌的外泌体均为圆形或椭圆形的膜性囊泡,直径均在100 nm左右。p53^(-/-)m BMMSC和p53^(+/-)m BMMSC分泌的外泌体浓度明显高于p53^(+/+)m BMMSC,p53^(-/-)m BMMSC与p53^(+/-)m BMMSC分泌的外泌体浓度无显著性差异。3种细胞来源的外泌体均表达膜表面特异性标志蛋白CD9、CD63。结论:p53缺失的m BMMSC能分泌更多的外泌体。
- 毛佳慧梁照锋田伊卿潘昭吉李霞钱晖许文荣
- 关键词：P53外泌体
- miR-1调控胃癌细胞SGC-7901迁移能力的实验研究被引量：3
- 2016年
- 目的探讨微小RNA-1(miR-1)对胃癌细胞系SGC-7901迁移能力的调控作用。方法脂质体转染寡核苷酸片段NCmimics及miR-1-mimics、NC-inhibitor及miR-1-inhibitor至SGC-7901细胞,定量RT-PCR检测转染后SGC-7901细胞中miR-1的表达水平,Transwell实验观察转染后细胞迁移能力,western blot检测转染后细胞上皮间质转化(EMT)指标。结果miR-1-mimics转染组miR-1的表达水平(900.10±240.40)明显高于NC-mimics转染组(1.01±0.18),差异有统计学意义(t=6.48,P<0.01)。miR-1-inhibitor转染组miR-1的表达水平(0.65±0.04)明显低于NC-inhibitor转染组(1.01±0.14),差异具有统计学意义(t=4.19,P<0.05)。miR-1-mimics转染组迁移细胞数量[(362±10)个]明显高于NC-mimics转染组[(112±10)个],差异有统计学意义(t=21.65,P<0.01)。miR-1-inhibitor转染组迁移细胞数量[(64±8)个]明显低于NC-inhibitor转染组[(133±14)个],差异有统计学意义(t=17.07,P<0.01)。与NC-mimics转染组比较,miR-1-mimics转染组上皮细胞钙粘蛋白(E-cadherin)表达减弱(t=19.28,P<0.01),神经钙粘蛋白(N-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)表达增强(t=5.43,P<0.01;t=23.14,P<0.01);与NC-inhibitor转染组比较,miR-1-inhibitor转染组E-cadherin表达增强(t=6.14,P<0.01),N-cadherin和Vimentin表达减弱(t=6.78,P<0.01;t=7.94,P<0.01)。结论 miR-1过表达可促进胃癌细胞的迁移;miR-1低表达能可抑制胃癌细胞的迁移;miR-1可能通过EMT转化增强胃癌细胞的迁移能力。
- 杨欢付海龙毛佳慧李霞王梅钱晖许文荣
- 关键词：微小RNA-1胃癌迁移上皮间质转化
- 低浓度5-氟尿嘧啶对胃癌细胞生物学特性的影响
- 2016年
- 目的探讨低浓度5-氟尿嘧啶(5-FU)对胃癌细胞转录因子OCT4、SOX2及细胞增殖能力的影响。方法用MTT法检测并确定5-FU对胃癌细胞系MGC803、SGC-7901的半数抑制浓度(IC50),实时荧光定量PCR及western blot检测经不同浓度的5-FU处理后胃癌细胞转录因子OCT4、SOX2表达水平,平板克隆形成实验分析胃癌细胞增殖能力的改变情况。结果5-FU对MGC803、SGC-7901细胞的IC50分别为(28.82±1.25)和(23.95±1.34);低浓度5-FU(0.5、1μmol/L)处理后,胃癌细胞MGC803、SGC-7901中转录因子OCT4、SOX2在mRNA及蛋白质水平中的表达均增强,差异具有统计学意义(P<0.05);平板克隆形成实验结果表明,经低浓度5-FU(0.5、1μmol/L)作用后胃癌细胞的增殖能力变强,形成的克隆数增多,差异有统计学意义(P<0.05);但5-FU浓度为2μmol/L时OCT4和SOX4的表达有不同程度的减弱,且克隆形成能力也有下降。结论低浓度5-FU能增强胃癌细胞转录因子表达、促进胃癌细胞增殖。
- 付海龙杨欢毛佳慧李霞王梅钱晖许文荣
- 关键词：胃癌细胞5-氟尿嘧啶低浓度转录因子
- 胃癌间质干细胞敲减YAP抑制胃癌的发展被引量：1
- 2017年
- 目的:探讨胃癌间质干细胞(gastric cancer-derived mesenchymal stem cell,GC-MSC)中YAP敲减对血管形成,胃癌细胞增殖和迁移的影响。方法:采用慢病毒感染GC-MSC进行敲减YAP,定量PCR、蛋白质印迹验证YAP敲减效果。定量PCR检测YAP敲减后GC-MSC血管内皮生长因子(VEGF)、血小板衍生生长因子(PDGF)、IL-8mRNA表达水平。收集GC-MSC YAP敲减组和对照组上清液,通过内皮细胞血管形成实验检测YAP敲减后GCMSC促血管形成能力的变化。平板克隆实验及迁移实验检测YAP敲减的GC-MSC上清液对SGC-7901细胞增殖和迁移的影响。结果:GC-MSC中YAP敲减后YAP蛋白和基因表达水平相对于对照组显著下调(P<0.01)。YAP敲减后GC-MSC中VEGF、PDGF、IL-8 mRNA表达水平显著下调(P<0.01)。YAP敲减后的GC-MSC促血管形成能力显著下降。YAP敲减的GC-MSC抑制胃癌细胞SGC-7901增殖和迁移。结论:GC-MSC中YAP分子可能通过参与胃癌的血管形成、胃癌细胞的增殖和迁移进而影响胃癌的发生发展。
- 田伊卿潘昭吉毛佳慧张斌史惠钱晖许文荣
- 胃癌外体(exosome)内miRNA-1的检测分析被引量：9
- 2016年
- 目的检测胃癌细胞系来源外体（exosome）及其胃癌组织和血清中exosome内miRNA-1的表达水平并分析其临床意义。方法采用实时荧光定量RT-PCR分别检测胃癌细胞系来源exosome、胃癌患者组织及血清exosome内miRNA-1的表达水平,分析其与临床资料相关性,并绘制ROC曲线进行效能分析。结果 miRNA-1在人胃癌细胞系MGC-803（6.51±0.41）和SGC-7901（14.81±1.30）中的含量明显高于胃上皮细胞系GES-1（1.05±0.25）,差异有统计学意义（t分别为11.26、10.38,P均〈0.01）;而MGC-803、SGC-7901细胞培养上清exosome内miRNA-1的表达水平（49.98±11.77和28.68±4.66）显著高于GES-1来源exosome（1.00±0.02）差异有统计学意义（t分别为4.162、5.942,P均〈0.01）;25对胃癌组织标本中有18例癌组织miRNA-1表达上调,7例表达下调,胃癌组织[1.110（0.070,4.307）]平均表达水平高于癌旁组织[1.149（1.110,2.075）],差异有统计学意义（Z=-1.897,P〈0.05）。miRNA-1在胃癌患者血清exosome内的表达水平[4.130（0.151,12.720）]较体检健康者血清exosome内表达水平[0.704（0.077,7.243）]明显增高（Z=-2.407,P〈0.05）,且与胃癌的淋巴结转移相关;胃癌患者血清exosome内miRNA-1的ROC曲线下面积（AUC^ROC）为0.723 0,95%可信区间（CI）为0.627 0～0.818 7,cut off值为2.39,敏感性为66%,特异性为68%。结论胃癌组织及其胃癌患者血清来源exosome内富含miRNA-1,有望成为新的胃癌诊断标志物。
- 付海龙杨欢毛佳慧李霞王梅钱晖许文荣
- 关键词：胃癌微小RNA-1血清
- 血清外体内fibulin-1检测在胃癌诊断中的应用被引量：3
- 2016年
- 目的评价血清外体（exosome）内fibulin-1蛋白分子在胃癌诊断中的临床应用价值。方法 Exosome沉淀法提取胃癌细胞及胃上皮细胞上清、胃癌患者及体检健康人血清exosome;western blot、ELISA法检测exosome内fibulin-1蛋白的表达水平,绘制ROC曲线并进行诊断效能分析。结果胃癌细胞及其上清exosome内fibulin-1表达水平显著低于胃上皮细胞及其上清exosome;胃癌患者血清exosome内fibulin-1的表达水平（31.94±16.92）μg/mL明显低于体检健康者（47.16±17.27）μg/mL（P=0.045）;胃癌患者血清exosome内fibulin-1的ROC曲线下面积（AUC^ROC）是0.727 5,95%可信区间（CI）为0.569 4～0.885 6,cut off值为43.19μg/mL,敏感性为70%,特异性为75%。结论血清exosome内fibulin-1分子有望作为胃癌诊断的潜在新型分子标志物。
- 杨欢付海龙毛佳慧李霞王梅钱晖许文荣
- 关键词：胃癌
