李小璐
- 作品数：3 被引量：1H指数：1
- 供职机构：湖北医药学院更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 一种重组人白血病抑制因子的制备方法
- 本发明涉及医药领域，具体为一种应用从大肠杆菌细胞表达产物中制备具有高纯度重组人白血病抑制因子的方法。具体为应用大肠杆菌表达白血病抑制因子蛋白，并且利用低温诱导使白血病抑制因子蛋白呈可溶性表达，之后应用阳离子交换色谱、阴离...
- 杜伯雨宋伟关欣李小璐吴帆郗雪艳
- 文献传递
- 重组人白血病抑制因子在大肠杆菌中的表达及纯化被引量：1
- 2017年
- 目的:利用大肠杆菌表达并制备重组人源白血病抑制因子(Leukemia inhibitory factor,LIF)。方法:构建p ET-30a-rh LIF表达载体并转入大肠杆菌菌株BL21(DE3)之中,IPTG诱导使无标签的目的蛋白呈可溶性表达,继而利用三步柱层析纯化目的蛋白。最后对所获目的蛋白活性进行测定,并对其N端和C端的完整性分别应用Edman测序法以及质谱法进行鉴定。结果:通过三步柱层析以及中间的内毒素去除步骤可使无标签rh LIF获得纯化,检测结果提示所获目的蛋白内毒素水平<1 EU/μg,其活性同市售商品化LIF产品一致,Edman测序结果提示少部分目的蛋白N端存在甲硫氨酸修饰,质谱检测结果表明所获目的蛋白C端完整性较好。结论:建立了一种新的重组人源白血病抑制因子表达和纯化的方法,本方法不需利用标签蛋白,并可有效降低所获蛋白中内毒素水平,所获rh LIF蛋白可用于干细胞培养以及相关生物学研究。
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- 关键词：纯化大肠杆菌
- 一种重组人白血病抑制因子的制备方法
- 本发明涉及医药领域，具体为一种应用从大肠杆菌细胞表达产物中制备具有高纯度重组人白血病抑制因子的方法。具体为应用大肠杆菌表达白血病抑制因子蛋白，并且利用低温诱导使白血病抑制因子蛋白呈可溶性表达，之后应用阳离子交换色谱、阴离...
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