李博文
- 作品数：10 被引量：13H指数：2
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- 相关领域：农业科学医药卫生生物学文化科学更多>>
- 绵羊种布鲁菌致病机制与防控研究进展被引量：1
- 2021年
- 布鲁菌病(Brucellosis)是一种高度流行的人畜共患传染病,可造成巨大的经济损失,严重制约了当今畜牧业的发展并对人类健康构成了严重威胁。绵羊种布鲁菌病是由绵羊种布鲁菌(Brucella ovis,B.ovis)引起的一种以绵羊生殖系统功能障碍和怀孕绵羊流产为特征的慢性传染性疾病。目前,对于绵羊种布鲁菌的胞内寄生机制和感染机制尚不清楚,现将从病原学、流行病学、致病机制和疾病防控等方面对绵羊种布鲁菌病的研究进展进行概述,为后期挖掘绵羊种布鲁菌的致病机理和与其相关的研究奠定一定的理论基础。
- 周志雄顾国婧李文杰李博文赵宇罗艺晨帅学宏黄庆洲焦寒伟
- 关键词：致病机制
- 羊种布鲁杆菌介导的mmu-miR-149-3p靶基因的初步鉴定被引量：1
- 2020年
- 布鲁杆菌病是由布氏杆菌(Brucella)引起的一种急性或慢性人兽共患传染病,在我国,羊种布鲁杆菌(Brucella melitensis,B.melitensis)最为流行。前期研究发现,mmu-miR-149-3p的潜在靶基因有10个,分别为:Bcl6b、Nos2、Slc7a11、Olr1、Ikbke、Slc31a2、IL1rl1、Dusp16、Ifit1和Rhoc。本试验通过X-treme Gene高效转染试剂,分别将5,50和100 nmol/L,Cy3标记的mimics转染至RAW264.7细胞24 h后,流式细胞仪分析,筛选出最佳转染mimics的浓度;并将mmu-miR-149-3p mimics与mmu-miR-NC mimics,按照最佳转染浓度,转染至RAW264.7细胞24 h后,加入TRIzol裂解细胞,提取总RNA,转录组获得cDNA;利用NCBI primer设计mmu-miR-149-3p的10个潜在靶基因的特异性引物,运用qRT-PCR方法,进行验证试验。结果发现,转染Cy3标记的mimics最佳浓度为100 nmol/L,其阳性率为49.94%,平均荧光强度为18.74;与mmu-miR-NC mimics转染组相比,在mmu-miR-149-3p mimics转染组中,Olr1、Slc7a11和IL1rl1的相对表达量显著降低。结果初步表明,mmu-miR-149-3p的靶基因为Olr1、Slc7a11和IL1rl1。这为揭示mmu-miR-149-3p在B.melitensis侵染巨噬细胞过程中的功能奠定了基础,还为进一步阐释B.melitensis的感染机制以及防控布病提供了参考。
- 焦寒伟周志雄李文杰顾国婧李博文赵宇刘煜萱王怡丹王兴龙陈吉轩帅学宏黄庆洲罗艺晨伍莉
- 髓样分化蛋白-2研究进展被引量：1
- 2019年
- 髓样分化蛋白-2(Myeloid differentiation protein-2,MD-2)是一种分子量为20~30 kD的分泌蛋白,它结合在Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)胞外区,能与TLR4组成复合体(MD-2/TLR4),在细菌脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)的识别及其信号转导中发挥重要作用,MD-2也是目前炎症、感染、免疫等病理过程研究的热点之一。本文对MD-2基因结构、基因表达及MD-2与机体天然免疫等方面研究结果进行综述,以期阐释MD-2的基因与天然免疫的关系,为揭示MD-2基因的功能提供技术参考。
- 王芷涵罗艺晨帅学宏顾国婧李博文李文杰周志雄赵宇伍莉陈吉轩黄庆洲焦寒伟
- 关键词：MD-2信号转导天然免疫
- 羊种布氏杆菌介导巨噬细胞mmu-miR-146a-5p的差异表达及其靶基因的初步鉴定
- 2019年
- 羊种布氏杆菌(Brucella melitensis,B.melitensis)感染巨噬细胞后,运用高通量测序技术挖掘出mmu-miR-146a-5p差异表达。利用TargetScan和miRDB数据库分别进行mmu-miR-146a-5p靶基因的在线预测,结果分别有224和125个,利用韦恩分析发现,2个数据库的在线预测结果交集有70个;进一步利用PicTar数据库进行mmumiR-146a-5p靶基因的在线预测,并与韦恩分析结果取交集;转染mmu-miR-146a-5p mimics至巨噬细胞中,通过荧光定量PCR方法检测预测靶基因的相对表达量,发现Ptpra与Tfdp2表达量显著降低,结果初步表明,mmu-miR-146a-5p的靶基因为Ptpra与Tfdp2。该试验为进一步研究mmu-miR-146a-5p在羊种布氏杆菌感染巨噬细胞过程中的作用奠定了基础。
- 焦寒伟赵宇罗艺晨顾国靖李博文李文杰周志雄伍莉王红均黄庆洲
- 关键词：巨噬细胞
- 绵羊种布鲁氏菌通过Caspase-4调控NLRP3的试验研究
- 布鲁氏菌病(Brucellosis)是一种在全世界范围内广泛传播的人兽共患传染病,该病的流行严重威胁着养殖业的发展和人类公共卫生安全。布鲁氏菌(Brucella)是一种革兰氏阴性胞内寄生菌,布鲁氏菌入侵动物机体后,会攻击...
- 李博文
- 关键词：NLRP3RNAI炎性细胞因子
- 布鲁菌介导细胞自噬的研究进展被引量：2
- 2021年
- 布鲁菌是布鲁菌病的病原体,在世界范围内给养殖业带来巨大损失。自噬是细胞的一种代谢方式,细胞在自噬相关基因的调控下清除细胞内病原微生物和吞噬降解受损、衰老细胞器及大分子物质,以维持机体内环境平衡。布鲁菌入侵细胞后,能够诱发细胞自噬,而这一复杂的过程需要很多细胞因子的参与,探究布鲁菌引发的细胞自噬已成为揭示布鲁菌致病机制的新热点,现就这一新热点的研究进展进行综述。
- 顾国婧李博文李文杰周志雄罗艺晨帅学宏赵宇陈吉轩黄庆洲伍莉焦寒伟
- 关键词：布鲁菌病布鲁菌细胞自噬致病机制毒力因子
- “科研式”教学法在动物生理学课程教学改革中的探索与实践被引量：3
- 2019年
- 动物生理学是我国动物医学和动物科学专业的核心基础理论课程,是研究生理条件下,即正常动物体的机能活动及其生命活动规律的学科,是生物学的重要分支,也是学术型研究生入学考试的专业课之一,因此,在本科教学过程中,具有十分重要的地位[1-3]。作为一门核心专业基础理论课程,主要培养学生全面系统掌握动物机体各个系统、器官和细胞的正常活动过程,尤其是各个细胞和器官之间,相互调控和作用,从而在复杂的外界环境中,维持正常生命活动的机制。不仅要让学生理解知识点,还要能够学以致用,解决生产实践中的实际问题。但在科学技术快速发展的今天,随着信息化和智能化的进一步普及,传统的动物生理学教学模式,很难满足当今高等教育所要求培养的,具有原创性思维和探索型的高素质人才的目标[4-5]。因此,“科研式”教学法在新形势下,针对动物生理学课程的教学改革显得极其重要,为培养具有创新性思维、勇于探索和富有创造能力的高素质人才,提供坚实的基础和保障。
- 焦寒伟周志雄顾国靖李博文李文杰赵宇伍莉陈吉轩帅学宏黄庆洲
- 关键词：学术型研究生探索型动物生理学基础理论课程生命活动规律生理条件
- 布鲁氏菌介导的mmu-miR-671-5p的靶基因预测与功能富集性分析被引量：1
- 2019年
- 为进行布鲁氏菌介导的mmu-miR-671-5p的靶基因预测,本试验利用布鲁氏菌(Brucella)感染RAW264.7细胞后,分别运用miRanda和TargetScan软件进行差异表达的mmu-miR-671-5p靶基因的预测,预测的靶基因分别有11 953和9 252个,将预测结果取交集进行韦恩(Venn)分析,重叠部分的靶基因有3 681个;利用GO与KEGG进行功能富集性分析,再利用PicTar软件进一步对mmu-miR-671-5p的靶基因进行预测,将预测结果与Venn分析结果进一步取交集,结果显示,mmu-miR-671-5p的预测靶基因有7个;实时荧光定量PCR分别验证7个预测靶基因的相对表达量发现,Tnfrsf1b与Tnip 1基因相对表达量极显著降低(P<0.01);在RAW264.7细胞中转染mmu-miR-671-5p inhibitors,分别验证7个预测靶基因的相对表达量发现,Tnfrsf1b与Tnip 1基因的相对表达量极显著升高(P<0.01);对mmu-miR-671-5p与Tnfrsf1b和Tnip1的3′非翻译区(3′UTR)结合靶位点分别进行预测,结果初步表明,mmu-miR-671-5p的靶基因为Tnfrsf1b与Tnip 1,其预测结合靶位点均只有1个,分别位于Tnfrsf1b和Tnip1 3′UTR全长位置的91和305 bp。本研究结果为进一步揭示mmu-miR-671-5p在布鲁氏菌感染RAW264.7细胞过程中的功能提供科学依据。
- 赵宇罗艺晨顾国靖李博文李文杰周志雄帅学宏伍莉陈吉轩黄庆洲焦寒伟
- 关键词：布鲁氏菌RAW264.7细胞
- 某蛋鸡场金黄色葡萄球菌和沙门菌的分离鉴定及药物敏感性分析被引量：2
- 2017年
- 为了解某蛋鸡场金黄色葡萄球菌和沙门菌对抗菌药物的耐药情况,采集重庆市某蛋鸡场48份羽毛样品、123份肛拭子样品,将羽毛样品经MH高盐培养液增菌后划线接种于MH高盐平板,将肛拭子样品经沙门菌增菌液增菌后划线接种于S.S.平板。将疑似菌落接种LB液体培养基培养后提取基因组,PCR扩增金黄色葡萄球菌特异性nuc基因和沙门菌特异性invA基因片段。对分离鉴定的金黄色葡萄球菌和沙门菌进行药物敏感性试验。最终共分离鉴定出9株金黄色葡萄球菌、6株沙门菌。药敏试验结果表明,分离的金黄色葡萄球菌和沙门菌耐药严重,且存在多重耐药。本研究基本摸清了该蛋鸡场金黄色葡萄球菌和沙门菌对常见抗菌药物的敏感性,为该蛋鸡场的临床用药提供了参考。
- 黄文青李博文高彤王豪举丁红雷
- 关键词：金黄色葡萄球菌沙门菌PCR药物敏感性试验
- 猪戊型肝炎病毒ORF3蛋白影响HepG2细胞核黄素代谢的lncRNA-mRNA调控网络的鉴定被引量：2
- 2021年
- 为初步鉴定并挖掘出猪戊型肝炎病毒(Hepatitis E virus,HEV)ORF3蛋白影响HepG2细胞核黄素代谢信号通路的lncRNA-mRNA调控网络,本试验通过构建腺病毒过表达载体,制备高滴度过表达腺病毒,介导猪HEV-ORF3在HepG2细胞中实现过表达。Western blotting检测ORF3蛋白过表达成功后,运用lncRNA高通量组学测序,筛选出差异表达的lncRNA并进行靶向差异基因预测,对lncRNA靶向差异基因进行GO功能和KEGG通路富集分析,初步鉴定出与核黄素代谢信号通路相关的lncRNA-mRNA调控网络。Western blotting结果显示,在约为12 ku处出现目的条带,说明成功实现腺病毒介导猪HEV-ORF3在HepG2细胞中过表达。lncRNA高通量组学测序结果显示,共发现102个显著差异表达lncRNAs表达量上调,80个显著差异表达lncRNAs表达量下调。GO功能和KEGG通路富集分析显示,初步挖掘出lncRNA(MSTRG.13995.2)和lncRNA(MSTRG.1960.1)可能是与核黄素代谢信号通路相关的显著差异表达lncRNA,分别通过顺式调控其靶向基因APC-5和FLAD1来影响核黄素代谢信号通路。本试验初步鉴定出lncRNA(MSTRG.13995.2)-APC5和lncRNA(MSTRG.1960.1)-FLAD1可能是影响HepG2细胞核黄素代谢信号通路的lncRNA-mRNA调控网络。
- 焦寒伟周志雄李梦娟肖玉李博文郭晓奕曾慧顾国婧帅学宏
- 关键词：HEPG2细胞
