建立了1种同时测定右旋糖酐发酵液中蔗糖、果糖、葡萄糖等3种糖分含量的高效液相色谱定量分析方法。发酵液用流动相乙腈水溶液定容预处理,使其中的产物右旋糖酐析出以消除其对糖分测定的干扰。将预处理液离心,取上清液,在选定的色谱条件下:分离柱为OSMOSIL Sugar-D(4.6 mm I.D.×250 mm,0.46μm)柱,柱温为35℃,80%(V/V)乙腈水溶液为流动相,流速为1.0 m L/min,进样量为20μL,示差折光检测器,温度为40℃,实现了发酵液中蔗糖、果糖、葡萄糖的理想分离。在蔗糖质量浓度为0.1-15.0 g/L,果糖和葡萄糖质量浓度为0.5-25 g/L范围内,对糖分质量浓度与其峰面积进行线性回归分析,其相关系数在0.9994-0.9999之间,平均加标回收率为95.20%-104.00%,相对标准偏差在1.8%-3.2%之间。该方法可直接同时测定右旋糖酐发酵液中蔗糖、果糖、葡萄糖等3种糖分的质量浓度,为右旋糖酐发酵过程提供了一种操作简便、快速、可靠的监测方法。