刘鲜艳
- 作品数：4 被引量：3H指数：1
- 供职机构：南方医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 胶原蛋白Ⅵ抗体通过FcγRIIb信号通路调节巨噬细胞分化
- 刘鲜艳
- 人细胞表面黏附分子P选择素启动子报告基因的构建及鉴定被引量：2
- 2016年
- 目的构建人细胞表面黏附分子P选择素(p-selectin)基因启动子荧光素酶报告基因载体pGL3-pselectin-promoter,检测其转录活性,并应用于筛选药物对其转录活性的影响。方法根据UCSC软件查找的人基因组DNA的p-selectin启动子序列并设计两端引物,扩增人基因组DNA中的p-selectin启动子。用限制性内切酶KpnⅠ和XhoⅠ双酶切质粒pGL3-Basic和p-selectin启动子后,将p-selectin基因启动子插入到pGL3-basic报告基因载体上。重组质粒命名为pGL3-pselectin-promoter。将其与内参质粒p RL-SV40瞬时共转染293F细胞,检测双荧光素酶活性。对不同启动子片段长度的p-selectin报告基因进行双荧光素酶的检测。以炎症因子和药物分组刺激转染了报告基因质粒的293F细胞并检测双荧光素酶活性。结果成功构建p-selectin基因启动子荧光素酶报告基因载体pGL3-pselectin-promoter,质粒酶切及测序结果完全正确。瞬时共转染pGL3-pselectin-promoter/p RL-SV40组荧光素酶活性为0.8573±0.4703,高于转染pGL3-Basic/p RL-SV40组的荧光素酶活性值0.03955±0.05894。pGL3-1826 bp相比较于pGL3-1092 bp组和pGL3-3738 bp组具有最强的转录活性。炎症因子LPS和TNF-α和药物As2O3均具有上调pGL3-pselectin-promoter转录活性的作用。结论 pGL3-pselectin-promoter在293F细胞中能被转录激活,并验证了炎症因子对其转录表达的作用,并为药物筛选与评价提供解决方案。
- 徐若霆周辉刘玮璐吴炜刘鲜艳张文强谭洁赵明
- 关键词：P选择素荧光素酶
- HPC2突变体真核表达载体的构建被引量：1
- 2011年
- 目的构建在哺乳动物细胞表达的HPC2真核表达突变载体,并在U2OS细胞中表达。方法从人U2OS细胞中克隆HPC2 cDNA片段,并利用Gateway技术构建pcDNA3.2/V5/HPC2质粒。将质粒用脂质体瞬时转染U2OS细胞,细胞裂解后用Western blot分析HPC2的表达情况。设计突变引物,以HPC2质粒为模板进行PCR,将PCR产物连接并转化扩增,得到特定位点突变的pcDNA HPC2质粒。结果 PCR、酶切、测序均表明pcDNA-V5/HPC2突变质粒构建成功,并可在U2OS细胞中表达。结论成功构建了pcDNA-V5/HPC2突变真核表达载体,为研究HPC2的功能提供了有力的工具。
- 何菲刘鲜艳吴炜姜勇赵明
- 关键词：基因表达突变
- 胶原蛋白Ⅵ抗体通过FcγRⅡb信号通路调节巨噬细胞分化
- 背景:已证明动脉粥样硬化相关抗原有oxLDL、HSP60、β2-糖蛋白和纤连蛋白等,这些抗原相关的疫苗或抗体具有预防或治疗动脉粥样硬化的作用。目的:本研究旨在疫苗验证胶原蛋白Ⅵ的α 6亚基是动脉粥样硬化相关抗原,探讨重组...
- 刘鲜艳
- 关键词：抗体FCΓR动脉粥样硬化M1
