杨琳
- 作品数：2 被引量：4H指数：1
- 供职机构：山东省口腔生物医学重点实验室更多>>
- 发文基金：山东省科技发展计划项目山东大学自主创新基金山东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 血管内皮生长因子和转化生长因子β1基因调控人根尖乳头细胞矿化相关因子的研究被引量：3
- 2012年
- 目的克隆人血管内皮生长因子(VEGF)异构体中的VEGF165,构建真核表达载体,探讨过表达VEGF165和转化生长因子β1(TGFβ1)对人根尖乳头细胞矿化相关因子的影响。方法提取人脐静脉内皮细胞系ECV304总RNA,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法扩增VEGF165基因,插入pcDNA3.1hisA,构建重组质粒pcDNA3.1hisA-VEGF165,经酶切及测序验证正确后,将其和pcDNA3.1hisA-TGFβ1转染人根尖乳头细胞,采用实时定量聚合酶链反应检测转染效率和骨涎蛋白(BSP)、牙本质涎磷蛋白(DSPP)、骨钙素(OCN)、牙本质基质蛋白1(DMP1)的表达。结果插入表达载体的VEGF165基因序列与GenBank数据库中的序列具有100%同源性;转染后VEGF165及TGFβ1 mRNA显著增高;各实验组DSPP mRNA的表达均升高(P<0.05),实验2组和实验3组的OCN mRNA升高(P<0.05),各组间BSP mRNA的表达差异无统计学意义(P>0.05),DMP1 mRNA均未见表达。结论成功构建VEGF165真核表达载体,VEGF165和TGFβ1均能促进人根尖乳头细胞多种矿化因子的表达,与根尖乳头细胞的分化相关。
- 杨海兵韩萱杨琳王燕
- 关键词：血管内皮生长因子转化生长因子Β1转染矿化作用
- 过表达VEGF165和TGFβ1对鼠牙本质样组织再生的影响被引量：1
- 2013年
- 目的:探讨重组质粒pcDNA3.1hisA-VEGF165和pcDNA3.1hisA-TGFβ1稳定转染仓鼠卵巢细胞(CHO)后持续分泌的血管内皮细胞生长因子165(VEGF165)和转化生长因子β1(transforming growth factor,TGFβ1)蛋白对大鼠体内牙本质样组织形成的影响。方法:脂质体介导重组质粒pcDNA3.1hisA-VEGF165和pcDNA3.1hisA-TGFβ1转染CHO细胞,经G418筛选,建立单克隆细胞株。反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测转染后CHO细胞中VEGF165和TGFβ1mRNA的表达情况,酶联免疫吸附测定(ELISA)检测转染后上清中VEGF165和TGFβ1蛋白的表达水平。接种转染后的CHO细胞至胶原膜,选择24只Wistar大鼠双侧上颌第一磨牙为实验牙,将胶原膜置于人工穿髓孔处,ChemFlex玻璃离子充填窝洞。8周后处死动物取材,制备硬组织切片,甲苯胺蓝染色。采用SPSS17.0软件包对ELISA数据进行统计学分析。结果:RT-PCR和ELISA结果显示,CHO细胞转染后VEGF165和TGFβ1基因和蛋白稳定表达。甲苯胺蓝染色显示,转染pcDNA3.1hisA-VEGF165的CHO组中穿髓孔下方见毛细血管明显充血及炎症细胞浸润,未见硬组织形成;转染pcDNA3.1hisA-TGFβ1的CHO组中,穿髓孔下方可见少量深染矿化团块,周围见增生的牙髓成纤维细胞,偶见炎症细胞浸润,未见管状牙本质形成;转染pcDNA3.1hisA-VEGF165和pcDNA3.1hisA-TGFβ1的2种CHO组中,穿髓孔下方可见大量深染矿化团块,几乎完全封闭穿髓孔,未见结构规则的牙本质桥形成,团块下端成牙本质细胞呈柱状整齐排列;对照组未见硬组织形成。结论:TGFβ1能促进体内矿化组织形成,VEGF165和TGFβ1共同作用,能更好地促进体内矿化组织形成。
- 杨琳杨海兵田成王燕
- 关键词：血管内皮细胞生长因子转化生长因子Β1矿化作用
